中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达产品残留DNA检测荧光定量PCR法GB/T34777-2017

中国仓鼠卵巢（CHO）细胞是常用的哺乳动物细胞表达系统之一，已广泛应用于生物制品的生产中。由于生物制品可能含有CHO细胞产生的残留DNA，因此需要建立高灵敏度、高特异性的检测方法来保障产品质量和安全性。

一、荧光定量PCR原理

荧光定量PCR是基于聚合酶链式反应（PCR）原理，通过荧光探针实时监测PCR反应产生的扩增产物，从而对靶分子进行定量检测的方法。该方法具有高灵敏度、高特异性、高准确性等优点，已成为生物制品残留DNA检测的首选方法。

二、残留DNA检测方法

中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达产品残留DNA检测荧光定量PCR法GB/T34777-2017是一种适用于生物制品残留DNA检测的标准方法。该方法基于荧光定量PCR原理，通过选择高保真度的PCR酶和特异性的引物及探针，实现对CHO细胞产生的残留DNA的快速、准确、高灵敏度检测。

1. 样品处理及PCR反应条件

样品处理包括DNA提取和纯化，PCR反应条件包括荧光探针的使用、PCR酶的选择、引物的设计和PCR反应体系的调整等。具体步骤如下：

1. 将待测样品DNA提取，并进行纯化。提取过程中应注意避免污染。
2. 设计高特异性引物和荧光探针，并优化PCR反应体系。
3. 进行PCR反应，并在荧光检测系统中实时监测扩增曲线。

2. 数据分析

根据荧光定量PCR实时监测数据，可以绘制扩增曲线和标准曲线，计算出样品中的目标DNA含量，最终得到残留DNA的浓度。同时，还需要进行质量控制，确保检测结果的准确性和可靠性。

总的来说，中国仓鼠卵巢（CHO）细胞表达产品残留DNA检测荧光定量PCR法GB/T34777-2017是一种快速、准确、高灵敏度的生物制品残留DNA检测方法，能够有效保障生物制品的质量和安全性。