化学品体外3T3中性红摄取光毒性试验方法GB/T21769-2008

化学品在生产和使用过程中可能会对人体、动植物环境造成不良影响，因此需要进行安全评价。其中一种常用的方法是通过体外细胞实验来评估其毒性。

实验材料

• 3T3细胞
• 高糖DMEM培养基
• FBS（fetal bovine serum）
• 中性红（NR）
• 化学品样品

实验步骤

1. 将3T3细胞接种到96孔板中，并在37℃、5% CO2下孵育至细胞密度达到要求。
2. 将培养基抽掉，加入测试化学品样品后，继续孵育24小时。
3. 将培养基抽掉，加入含有0.02%中性红的PBS（磷酸盐缓冲液），在37℃下染色2小时。
4. 用PBS洗涤细胞3次，使细胞清晰可见。
5. 加入200μL DMSO（二甲基亚砜）混合均匀，测量各孔中细胞的吸光度。

结果分析

根据各孔的吸光度值，可以计算出化学品对3T3细胞中性红摄取的影响。如果吸光度值明显低于对照组，则说明该化学品存在光毒性作用。

结论

通过体外3T3中性红摄取光毒性试验方法，可以初步评估化学品的光毒性作用，为进一步的安全评价提供参考。