生物样品中金属硫蛋白含量的测定GB/T38086-2019

金属硫蛋白是一种重要的代谢产物，可作为监测环境污染和生物毒性的指标之一。因此，在生物样品中准确测定金属硫蛋白的含量具有重要意义。

GB/T38086-2019标准规定了一种测定生物样品中金属硫蛋白含量的方法。该方法基于紫外-可见分光光度法，通过巯基乙酸钠还原金属硫蛋白并使其发生局部变性，然后使用5,5'-二硫代二(2-氨基丙磺酸)酸（DTNB）作为试剂，与被还原的金属硫蛋白中的游离巯基反应生成黄色的TNB（2-硫基-4-硝基苯酚）产物，测定光密度从而计算出金属硫蛋白的含量。

具体实验步骤如下：

1. 样品制备：将生物样品加入适量缓冲液，超声条件下破碎细胞壁，离心去除细胞碎片。
2. 还原：加入巯基乙酸钠（DTT）溶液将样品中的氧化态金属硫蛋白还原为还原态。
3. 局部变性：加入硫酸铵使得还原后的金属硫蛋白发生局部变性，暴露出巯基。
4. 反应：加入DTNB试剂与被还原的金属硫蛋白中的游离巯基反应生成黄色TNB产物。
5. 测定：使用分光光度计测定TNB的吸收光密度。

该方法简便、快速、准确，并且对于不同类型的生物样品都有较好的适用性。但是，测定过程中需要注意遮光，以保证测定结果的准确性。