粮油检验大豆异黄酮含量测定高效液相色谱法GB/T26625-2011

一、仪器设备和试剂

1.仪器设备

高效液相色谱系统(HPLC)、荧光探测器。

2.试剂

甲醇(色谱纯)、乙腈(色谱纯)、水(二硅氧烷处理)、乙酸、乙酸铵、大豆异黄酮标准品。

二、样品制备

1.取大豆粉2克，称净后加入50 ml 乙醇，用磁力搅拌器搅拌30min。

2.离心10min，将上清液过滤，取5 ml 进行进一步的处理。

三、测定方法

1.色谱条件

柱：Hypersil BDS C18(4.6mm×250mm,5μm)

流动相：甲醇-水(含0.05%乙酸)-乙腈(15:70:15)

流速：1ml/min

柱温：30℃

检测波长：270nm(激发波长为254nm)

荧光探测器：固定激发波长254nm，测定波长为270nm

2.标准曲线绘制

以大豆异黄酮标准品为原料，分别制成不同浓度的标准溶液，然后进行色谱分析，根据峰面积和浓度间的关系绘制标准曲线。

3.样品测定

将样品进样后，进行色谱分析，根据标准曲线计算样品中大豆异黄酮的含量。

四、实验结果

经过实验，本方法测定大豆异黄酮的含量精确度高、重复性好、灵敏度高。样品中大豆异黄酮的含量为XX mg/kg。

五、结论

高效液相色谱法是一种可靠、快速、灵敏的测定大豆异黄酮含量的方法。通过本方法测定的结果可以有效保证食品质量安全，同时也为制定合理的膳食方案提供了科学依据。