国家标准 GB/T25172一2020 代替GB/T25172一2010 猪常温精液生产与保存技术规范 Teehniealspeeifieationforproductionandpreservationoffreshboarsemenm 2020-11-19发布 2021-06-01实施国家市场监督管理总局发布国家标涯花警理委员会国家标准
GB/T25172一2020 前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准代替GB/T25172-2010《猪常温精液生产与保存技术规范》,与GB/T25172一2010相比主要变化如下 -增加了“GB23238”和“GB/T6682”见第2章) -增加了“宜用设备采精法,按使用说明书操作”见5.1.2.3); 将精子畸形率由“<18%”修改为“<20%”见5.2.2,2010年版的5.2); 删除了“细菌菌落数”(见5.2,2010年版的5.2); 精子活力证实方法增加了“使用自动分析仪器应按其检测方法操作”(见5.2.3.2); 将稀释液pH值“6.4~7.2”修改为“6.87.,2”(见4,5.4,2010年版的6.1.3); -将稀释后精液“每头份剂量”“总精子数”修改为“剂量、每剂量中直线前进运动精子数应符合 GB23238的规定 ”见5.4.l,2010年版的6.2.5); 将“精液产品质量(见表2)”修改为“常温精液产品质量和标志应符合GB23238的规定 ”(见 5.6,4,2010年版的8,4) 本标准由农业农村部提出本标准由全国畜牧业标准化技术委员会(sAc/Tc274)归口. 本标准起草单位;青岛市畜牧兽医研究所、华南农业大学、北京养猪育种中心,黄岛区家畜改良站本标准主要起草人:戈新、张守全、王建华、周海深、张宝询、李培培、刘玉华、程明、孟庆利
GB/T25172一2020 猪常温精液生产与保存技术规范范围本标准规定了猪常温精液生产与保存的基本要求和技术要求,描述了对应的试验方法,给出了保存和运输的内容本标准适用于猪的常温精液生产与保存规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB23238种猪常温精液术语和定义下列术语和定义适用于本文件 3.1 原精液 rawsemen 采集后未经稀释的精液 3.2 freshsemen 常温精液经稀释后在16C c一18下保存,仍具有受精能力的精液注:改写GB232382009,定义3.2 3.3 精子活力 spermmotility 在37C下呈直线前进运动的精子占总精子数的百分率精子密度 spermmconcentration 单位体积精液中的精子数 3.5 abnormalspermpercentage 精子畸形率畸形精子占总精子数的百分率基本要求 4.1种公猪应健康且达到种用要求成年公猪宜每周采精二次至三次,青年公猪宜每周一次至二次
GB/T25172一2020 4.2采精员应经过专业培训,工作时应着洁净工作衣、帽,穿长胶鞋,戴无毒塑料手套 4.3采精室应设置采精区和安全区采精区设置假台猪,地面防滑,并保持清洁、安静和避光 4.4精液处理室应设置精液检查、稀释和分装区,温度宜控制在22C一25C,避免太阳光直射或紫外灯照射配备仪器和用品参见附录A 4.5稀释液 4.5.1配制用水应符合GB/T6682中二级水或三级水的要求 4.5.2商品稀释剂按说明书使用不得使用过期或变质稀释剂 4.5.3自配稀释液所用试剂应为分析纯,稀释液配方参见附录B 4.5.4稀释液pH值应为6.8~7.2 4.5.5使用前1h配制,配制后应及时贴上标签,标明品名、配制日期和时间、经手人 45.6稀释液应密封后置于冰箱中0C一4C冷藏,保存时间不应超过24 5 技术要求 5.1精液采集 5.1.1采精前准备集精杯或保温杯(内置无毒塑料袋并覆盖四层纱布或一层精液过滤纸)、载玻片、盖玻片、精液 5.1.1.1 处理器皿应预热至37C 5.1.1.2显微镜载物台恒温板应预热至37C 精子密度仪使用前应预热 5.1.2采精 5.1.2.1应剪去公猪包皮部长毛,清洁体表,擦干水溃 5.1.2.2应挤净包皮积液,先用0.1%高锰酸钾溶液清洗腹部和包皮,再用温水清洗后擦干 5.1.2.3宜用设备采精法,按使用说明书操作手握法采精时,应一只手戴双层无毒聚乙烯手套,按摩公猪包皮部,待公猪爬跨假台猪并伸出阴茎,脱去外层手套,握紧龟头,使其不能旋转,顺势将阴茎的 “s”状弯曲延直另一只手持集精杯或保温杯,弃去最初射出的少量精液,收集精液至射精完毕 5.1.2.4采精完毕后,应标记公猪耳号,送至精液处理室 5.2精液检验 5.2.1检验项目外观、气味、采精量、精子活力、精子密度和精子畸形率 5.2.2原精液质量应符合表1的规定,其中任何一项不符合要求的则废弃
GB/T25172一2020 表1原精液质量编号项目指标证实方法外观呈乳白色,均匀一致目测气味略带腥味,无异味鼻嗅采精量/ml 见5.2.3.1 l00 >70 见5.2.3.2 精子活力/% >1 见5.2.3.3 精子密度/(10个/mL) 精子畸形率/% 二20 见5.2.3.4 5.2.3证实方法 5.2.3.1采精量采用称量法计算采精量,lg相当于1ml 5.2.3.2精子活力取中层精液10L15ML,在200倍400倍显微镜下检查每份精液取样二次,每个样观察三个视野,计算平均值使用自动分析仪器应按其检测方法操作 5.2.3.3精子密度采用精子密度仪测定应定期用血细胞计数板法校正 5.2.3.4精子畸形率采用伊红或姬姆萨染色法检查时,在200倍400倍显微镜下观察左、中、右三个视野中不少于200 个精子也可采用相差显微镜直接观察每二个月抽检一次 5.3精液稀释 5.3.1精液采集后应尽快稀释,放置时间不宜超过15n min 5.3.2采用等温稀释精液与稀释液温差不得超过1,根据精液温度调节稀释液温度,不得反向操作 5.3.3将稀释液沿杯壁缓慢加人精液中,轻轻摇动或沿一个方向搅拌,混合均匀高倍稀释时,先低倍稀释(1:1)~(1:2),30s后再加人余下的稀释液 5.3.4稀释液总量以体积V计,数值以毫升(mL)表示,按式(1)计算 u×c V - ×Ug 式中: -采精量,单位为毫升(mL); U 精子密度,单位为10个每毫升(10个/mL); 每剂量中直线前进运动精子数,单位为10个; U？剂量,单位为毫升(mL). 5.3.5精液稀释后应静置5min,按5.2.3.2检测精子活力,活力不得低于70%
GB/T25172一2020 5.4精液分装 5.4.1剂量,每剂量中直线前进运动精子数应符合GB23238的规定 5.4.2可采用袋装或瓶装,应使用对精子无毒害作用且灭菌的一次性塑料或硅胶制品 5.4.3分装完毕,应排出空气后密封 5.5记录应及时将精液检验、精液稀释、精液分装的处理和结果填人精液质量检测登记表，登记表见附录C 5.6精液保存和运输 5.6.1精液应置于22C25C下1h2h后,平放人16C~18C恒温箱内避光保存;也可用12层 15层纱布(或干毛巾)包严直接放人恒温箱内 5.6.2保存的精液每隔4h8h摇动一次并记录,摇动时应轻缓均匀 5.6.3每批精液应留样备查同批号的精液在有效期内应抽样检查并记录,常温精液保存登记表见附录D. 5.6.4常温精液产品质量和标志应符合GB23238的规定 5.6.5 精液应置于10C一I8C的恒温箱内避光运输,运输过程中避免强烈震动碰撞
GB/T25172一2020 录附 A 资料性附录精液处理室配备仪器和用品精液处理室配备仪器和用品见表A.1 表A.1精液处理室配备仪器和用品名用规格(技术参数涂电子科 3000g/1g,6000g/2g 称量精液,稀释液显微镜观测精子数、活力和畸形率 40×l600X 显微镜恒温板室温50(可调),工作面温差0.5C 载玻片、盖玻片恒温预热精子密度仪测定精子岗度 50mill/ml一1400mil/ml pH计测量范围0.014.0,精度士0.1 测定精液、稀释液的pH o 恒温箱保存精液 16C一18 干燥箱室温十5C250C,波动度<土2 预热器皿和消毒用品冰箱保存试剂和剩余稀释液冷藏室0C4 200g/0.01g 电子天平称量化学试剂(选用等温精液与稀释液恒温水浴锅双孔或四孔恒温磁力搅拌器 0C一99,容量<500ml 稀释液搅拌,加热测定精子密度血球计数板 25×16 0999 计数器精子计数微量移液器 100l~2004l 精液取样或稀释微量移液器精液取样或稀释 100Al~1000Al 1000ml士5ml 量取液体量筒三角瓶配制稀释液 1000ml 储水瓶 51. 盛放配制用水烧杯精液稀释 1000ml,2000ml 热封口机袋装精液封口分装精液分装架载玻片精子活力的测定盖玻片精子活力的测定擦镜纸擦拭显微镜镜头移液枪吸嘴 200Al. 精液取样或稀释稀释剂配制精液稀释液
GB/T25172一2020 表A.1(续) 称规格(技术参数用途精液袋,瓶分装及保存精液温度计 -60 测量精液、稀释液等温度稀释液配制或精液稀释玻璃棒标签纸精液、稀释液标签
GB/T25172?2020 ? B ?? ????? ?????B.1 B.1????? ?- ? ? ? ?/d D 37.15 60.00 l1.50 ll.50 6.00 3.70 ll.65 " ll.65 1.25 3.70 2.35 2.35 EDTA 1.25 1.20 1.75 1.75 ? ? 0.75 0.75 ù 0.60 0.50 0.60 ù 1.00 0.50 1.00 0.50 ?(PVP,Typel 1.,00 1.00 ?(Tris) 5.50 5.50 4.1o 4.l0 0.07 0.07 ? 1.00 ?ù 1.00 ?:λ??
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GB/T25172-2020 猪常温精液生产与保存技术规范

1. 引言

猪种常温精液的生产与保存技术是繁殖业中的重要环节，直接影响着猪种的遗传改良效果。GB/T25172-2020 猪常温精液生产与保存技术规范旨在提高猪种常温精液的生产质量和管理水平。

2. 标准范围

GB/T25172-2020 猪常温精液生产与保存技术规范适用于猪种公猪常温精液的采集、处理、保存和运输等方面。

3. 常温精液采集

常温精液采集是整个生产过程中的第一步，其采集方法和操作规范直接关系到后续的贮存和使用效果。GB/T25172-2020 标准对常温精液采集的操作要求进行了详细规定。

4. 常温精液处理

常温精液的处理包括常温精液的液化、稀释、质量检测等工艺环节。标准明确规定了常温精液处理的操作流程和具体要求。

5. 常温精液贮存

常温精液贮存是保证猪种常温精液质量的重要环节，也是猪种常温精液管理的核心之一。标准规定了常温精液贮存条件、容器选择、贮存期限等方面的要求。

6. 常温精液运输

常温精液的运输是将常温精液从生产地点运往使用地点，是猪种常温精液管理中的重要环节。标准规定了常温精液运输过程中的操作要求和注意事项。

7. 结论

GB/T25172-2020 猪常温精液生产与保存技术规范是猪种精液生产和管理中的重要参考依据，对于提高猪种常温精液生产的质量和管理水平具有重要意义。