国家标准 GB/T37544一2019 化妆品中邻伞花泾-5-醇等6种酚类抗菌剂的测定高效液相色谱法 Determtnatonof6kindsfphemolcantiheterialugentineuding o-eymen-5-lincosmmeties一HHighperformaneeliquidchromatography 2019-06-04发布 2020-01-01实施国家市场监督管理总局发布币国国家标准化管理委员会国家标准
GB/37544一2019 前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由轻工业联合会提出本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/Tc257)归口本标准起草单位:江苏省产品质量监督检验研究院、苏州世谱检测技术有限公司、无限极()有限公司、上海市日用化学工业研究所、广州华鑫检测技术有限公司欧诗漫生物股份有限公司、完美(广东)日用品有限公司、广州质量监督检测研究院、苏州质量检测科学研究院、江苏省食品药品监督检验研究院本标准主要起草人:张晓强、卢剑、黄金凤、孙红梅、寻知庆、李晓敏、代丹、廖华勇、沈敏、张丽华、戴结玲、张征、邹洁,杨安全、袁利文、彭玉睿、李海,赵春晓、王常捷、康薇、武中平、杨洋,曲梅、孙姗姗、曹倩文、叶竹洪、施兵、叶嘉荣、汪晨霞、刘香梅、陈意光、洗燕萍、侯向褪、吴玉銮、郭新东
GB/T37544一2019 引言本标准的被测物质苯酚、4-叔丁基苯酚、2,4,6-三氯苯酚、五氯苯酚是我国《化妆品安全技术规范 2015年版)》规定的禁用物质禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质《化妆品安全技术规范 2015年版)》规定:若技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时,应进行安全性风险评估,确保在正常、合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害目前我国尚未规定这些物质的限量值,本标准的制定,仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法
GB/37544一2019 化妆品中邻伞花泾-5-醇等6种酚类抗菌剂的测定高效液相色谱法范围本标准规定了化妆品中苯酚,对氯间甲酚、邻伞花姬-5-醉、4-叔丁基苯酚、2,4,6-三氯苯酚、五氯苯酚6种酚类抗菌剂的高效液相色谱测定方法的原理、试剂和材料、仪器设备、试验步骤、结果计算、回收率与精密度,允许差等内容本标准适用于化妆品中苯酚、对氯间甲酚、邻伞花胫-5-醇、4-叔丁基苯酚、2,4,6-三氯苯酚、五氯苯酚6种酚类抗菌剂的测定本标准的方法检出限和定量限:水剂类、乳液类、膏霜类、粉类化妆品中苯酚、对氧间甲酚、邻伞花泾-5 醉、+叔丁基苯酌.24,G三氯苯酚,五氧苯酚的方法检出限为2.5mg/kg,方法定量限为85mg/kg;蜡基类化妆品中苯酚、对氯间甲酚、邻伞花胫-5-醇、4-叔丁基苯酚、2,4,6-三氯苯酚、五氧苯酚的方法检出限为 5.0mg/kg,方法定量限为17.0mg/kg 规范性引用文件下列文件对于木文件的应用是必不可少的几是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法原理试样中的苯酚,对叙间甲盼、邻伞花短-于醉、4叔丁基苯酚、2,4,G-三氯苯酚、五氧苯盼经溶剂抛取离心过滤后,用配有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪测定,保留时间和光谱图定性,外标法定量高效液相色谱-质谱/质谱法确证试剂和材料 4.1水:GB/T6682规定的一级水 4.2乙晴;色谱纯 4.3甲酸:色谱纯 4.4乙酸铵:色谱纯 4.5乙睛水溶液;雅确量取70ml乙睛(4.2)和30mL水,混匀后备用 4.6标准物质;纯度不小于98% 苯盼,对氯间甲酚、邻伞花胫-5-醇、4-叔丁基苯酚、2,4,6-三氯苯酚、五氯苯酚的中文名称、,INCI名称(国际化妆品原料名称)英文名称、CAs号、分子式、相对分子质量及化学结构式参见附录A表A.1 4.7混合标准工作溶液:分别准确称取适量标准物质(4.6)(精确至0.1mg),用乙晴(4.2)配制成质量浓度为20004g/mL.的标准储备溶液(于4C避光保存,可保存6个月准确吸取各标准储备溶液 500.0L于10ml容量瓶中,用乙睛水溶液(4.5)定容,混匀,得到混合标准储备溶液(100.04g/mL 4C避光保存) 准确移取适量混合标准储备溶液,用乙睛水溶液(4.5)逐级稀释成质量浓度为0.104g/ml
GB/T37544一2019 0.204g/mL,0.50g/mL,l.004g/ml,2.504g/ml5.004g/ml,10.04g/mL和50.04g/ml的系列混合标准工作溶液(现配现用. 4.8微孔滤膜;孔径为0.22m的有机过滤膜仪器设备 S 实验室常规设备,及下列仪器 aa 高效液相色谱(HIPLC)仪;配有二极管阵列检测器; b) 高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪分析天平;感量0.001g和0.0001g; c d 涡旋振荡器; e 超声波清洗仪:超声功率250W 离心机:最大转速不低于4000r/min. 试验步骤 6 6.1试样处理 6.1.1水剂类,乳液类、膏霜类、粉类化妆品称取试样0.2g(精确至0.001g)于15ml具塞塑料离心管中,加乙晴水溶液(4.5)至5.0ml,涡旋振荡2min,超声提取10min,4000r/min离心5nmin,取上清液过0.22m滤膜,待测定 6.1.2蜡基类化妆品称取试样0.1g(精确至000g)于15ml具塞塑料离心管中,加人0.5mL四氢吠,涡旋至样品全部溶解,再加乙睛水溶液(4.5)至5.0mL,涡旋振荡2min,超声提取10min,4000r/min离心5min. 取上清液过0.224m滤膜,待测定 6.2测定条件高效液相色谱参考条件如下色谐柱;多环芳烽专用色谱柱,54m,250mm×4.6nmm(内径),或相当者; a b 流动相;乙睛-10mmol/L乙酸铵水溶液[用甲酸(4.3)调至pH5.0],梯度洗脱程序参见表1 c 流速;1.2mL/min; d 柱温:30C; 检测波长;280nm:; e fD 进样量;:20AL 表1梯度洗脱程序乙睛/% 时间 /min 10mmol nol1乙酸铵水溶液(pH5.0/% 80 0.0 20 70 7.0 30 65 10.0 35 20.0 65 35 90 23.0 10
GB/37544一2019 表1续) 时间/min 10mmol/L乙酸铵水溶液(pH5.0)/% 乙睛/% 10 30.0 90 80 20 31.0 39.0 80 20 6.3标准工作曲线绘制按测定条件(6.2)对系列混合标准工作溶液(4.7)进行测定,以色谱峰的峰面积为纵坐标,对应的溶液浓度为横坐标作图,绘制标准工作曲线 6种标准物质的高效液相色谱图参见附录B图B.1 6.4试样测定按测定条件(6.2)对试样溶液进行测定,试样溶液中的被测物根据保留时间和光谱图定性由试样溶液的峰面积,从标准曲线上查出相应的被测物浓度试样溶液中被测物的响应值均应在仪器测定的线性范围之内,超出线性范围的试样溶液需用乙晴水溶液(4.5)稀释后再测定必要时,用高效液相色谱-质谱/质谱法进行确证实验,参见附录C 6.5空白试验除不加人试样外,均按6.1一6.2进行测定结果计算按式(1)计算试样中被测物的含量 -xVx100 70一 m又1000 式中试样中各被测物的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); u 试样溶液中各被测物峰面积对应的质量浓度,单位为微克每毫升(4g/mL). -空白试验中各被测物的质量浓度,单位为微克每毫升(4g/mL); n 定容体积,单位为毫升(mlL); 试样质量,单位为克(g). mn 计算结果精确至小数点后一位数字回收率与精密度水剂类、乳液类、膏霜类、粉类化妆品中,苯酚、对氯间甲酚、邻伞花胫-5-醇、4-叔丁基苯酚、2,4,6-三氯苯酚、五氯苯酚在添加浓度为8.5mg/kg~85.0mg/kg范围内,回收率在80%~110%之间,相对标准偏差小于10%; 蜡基类化妆品中,苯酚、对氧间甲酚、邻伞花怪-5-醇、4-叔丁基苯酚、2,4,6-三氯苯酚、五氧苯酚在添加浓度为17.0mg/kg170.01 mg/kg范围内,回收率在80%110%之间,相对标准偏差小于10% 允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%
GB/T37544一2019 附录 A 资料性附录) 6种酚类抗菌剂标准物质的信息 6种酚类抗菌剂的中文名称、,INCI名称,英文名称、CAs号、分子式,相对分子质量及化学结构式参见表A.1 表A.16种酚类抗菌剂的中文名称、,INCI名称/英文名称,CAs号,分子式、相对分子质量及化学结构式中文名称 INCI名称英文名称 CAS号分子式相对分子质量化学结构式 108-95-2 c,H,OH 苯酚 94.1 phenol OH .OH 力-chlorom 4-chloro 对氧间甲盼 c,H,cIo 59-50-7 l42.6 cresol 1-cresol OH 4-isopropyl 邻伞花姬-5-醇o-eymen-5-ol 3228-02-2 CHO 150,2 -cresol OH 4-tert 4-叔丁基苯酚 98-54-4 CHO 150,2 butylphenol 2,4,6-trichlor OH cH.C.o 197.5 2.4.6 三氯苯盼 88-06-2 ophenol .OH pentachlorop 五氯苯盼 c,HC,o 87-86-5 266.3 henol
GB/37544?2019 ? B ?? ????ɡ-5-,4-嶡?,2,4,6-??Ч??? 6???Ч???μ?B.1 20- 24.26 16 12 6.05 14.92 26.922 22.62 21.72 15 18 2 24 27 90 33 36 39 ?/min ? -; -? ɡ-5-; -4嶡; -2,4,6-?; -? ?B.16???Ч???
GB/T37544一2019 录附 C 资料性附录) 确证试验 C.1液相色谱参考条件液相色谱参考条件如下: 色谱柱:C柱,1.7赵m,150mm×2.1mm(内径); a b) 流动相5mmol乙酸铵水溶液十乙=60十40(体积比); 流速:0.3mL/min; c d 柱温:30C; 进样量:5AL e C.2 质谱参考条件质谱参考条件如下: 离子源;电喷雾离子源(ESI); a b 扫描方式;负离子扫描; c 电喷雾电压;一4500V; d 离子源温度:500C; 气帘气;氮气,0.207MPa; fD 碰撞气:氮气,0.055MPa; 检测方式:多反应监测(MRM 8 6种酚类抗菌剂的保留时间、定量离子对、定性离子对、去簇电压、碰撞电压参见表C.1 6种酚类抗菌剂标准品溶液的提取离子色谱图参见图C.1 表C.16种酚类抗菌剂的质谱MIRM模式优化参数定量离子对定性离子对目标物保留时间/min 去簇电压/V 碰撞电压/V m/e m/: 苯盼 2.37 93.0/65.0 93.0/93.0 75.0 -5.0，一24.0 对氯间甲 5.10 141.0/105.0 141.0/114.0 -75.0 -50.0,-21.0 邻伞花泾-5-醇 8.20 149.1/133.0 149,1/117.0 -75.0 -63.0,-21.0 4-叔丁基苯粉 8.59 149.1/133.0 149,1/117.0 -75.0 -63,.0，一21.0 -75.0 2,4,6-三氯苯酚 -39.0,一30.0 4.56 196,.9/161,0 196.9/123.0 265.8/265,.8 263.6/263.6 五氯苯阶 3.69 -75.0 -5.0， -5.0
GB/37544一2019 2.37 3.69 苯前五飘苯阶 5x1叫 1x10s 93.0/65.0 265.8/265,8 4×10P 8X10 3x10 6X10° 2×10 4x10 1X10 2×105 .02.0a.04.05.06.07.08.09.010.0 1.02.03.04.05.06.07.08.09.010.0 时间/min 时间/mim 8x10' 5.10 .56 4×10 2,4,6-三氧苯粉对氧间甲粉 196.9/161.0 6×10 141.0/105,0 4×104 2xIos 1×10 I.02.a04O506.07.0&.0g.0@.o I.02.03.04.05.06.O7.08.09,010.0 时间/minm 时间/min 8.59 6×10' 4-叔丁基苯阶 4x10 邻伞花姬5-醇 149.1/133.0 149.1133.0 8.20 2×10 .02.03.04.05.06.07.08.09.o0.0 时间/minm 图c.16种酚类抗菌剂的提取离子色谱图 C.3定性测定进行试样测定时,将试样适当稀释,按液相色谱-质谱/质谱条件测定样液和标准工作溶液,如果检出色谱峰的保留时间与标准物质的一致,并且在扣除背景后的样品质谱图中,所选择的离子均出现,而且选择离子的相对丰度与标准物质的进行比较,相对偏差不超过表C.2规定的范围,则可判断样品中存在这些酚类抗菌剂表C.2定性确证时相对离子丰度的允许偏差 >2050 >1020 二10o 相对离子丰度/% >50 允许的相对偏差/% 士20 士25 士30 士50

化妆品中邻伞花烃-5-醇等6种酚类抗菌剂的测定高效液相色谱法

随着人们对于化妆品安全性的要求越来越高，对于在化妆品中添加的一些成分也提出了更严格的要求。其中，酚类抗菌剂作为一种广泛应用于化妆品中的防腐剂，其安全性问题备受关注。

为了确保化妆品中酚类抗菌剂的安全使用，需要对其中邻伞花烃-5-醇等6种酚类抗菌剂进行检测。GB/T37544-2019标准就是为此而制定的。

根据GB/T37544-2019标准，可以采用高效液相色谱法对化妆品中邻伞花烃-5-醇等6种酚类抗菌剂进行测定。该方法具有灵敏度高、分离度好、检测速度快等优点。

在使用高效液相色谱法进行酚类抗菌剂的测定时，需要注意一些实验条件的设置，例如流动相的选择、柱温的控制、检测波长的设置等。同时，在样品的前处理过程中也需要注意避免一些干扰因素的存在，以确保测定结果的准确性和可靠性。

总之，GB/T37544-2019标准为化妆品行业提供了针对邻伞花烃-5-醇等6种酚类抗菌剂的测定方法，有助于确保化妆品中酚类抗菌剂的安全使用，提高消费者对于化妆品的信任度。