酵母产品质量要求第1部分：食品加工用酵母

酵母产品质量要求第1部分：食品加工用酵母

国家标准 GB/T20886.1一2021 代替GB/20886一2007 酵母产品质量要求 第 1部分:食品加工用酵母 Qualityrequirementsforyeasproduets Part1:Yeastforfoodproessing 2021-12-31发布 2022-07-01实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标涯花警理委员会国家标准
GB;/T20886.1一2021 前 言 本文件按照GB/T1.1一2020<标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草 本文件是GB/T20886《酵母产品质量要求》的第1部分 GB/T20886已经发布了以下部分 -第1部分:食品加工用酵母 第2部分;酵母加工制品 本文件代替GB/T20886《食品加工用酵母》,与GB/T20886一2007相比,除结构调整和编辑性改 动外,主要技术变化如下 -删除了特种功能酵母的定义和分类(见2007年版的3.3和4.3). -增加了食用酵母的术语和定义(见3.4); 增加了食用酵母的分类(见4.2); -增加了食用酵母的理化要求(见5.2.3) 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 本文件由全国食品工业标准化技术委员会(sAc/TC64)提出并归口 本文件起草单位;安琪酵母股份有限公司、广西湘桂脖母科技有限公司.山东圣琪生物有限公司 英联马利(北京)食品销售有限公司、食品发酵工业研究院有限公司 本文件主要起草人;武竹英、陈蓉、周世伟、刘明,易勇、王丽霞、陈晖,郭新光、吴李蝉、张继祥、崔素芳、 孟镇,罗必英、刘志强,孟庆祥 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为 -2007年首次发布为GB/T208862007， 本次为第一次修订
GB/T20886.1一2021 引 言 随着发酵工业的迅速发展,食品加工用酵母及其相关产品种类向多元化发展,产品质量提高到一个 新的水平,行业从技术到品种都有了长足的发展与进步 制定GB/T20886《酵母产品质量要求》,是对 食品加工用酵母及其相关产品的质量和对应检测方法的规范化和标准化,是规范食品加工用酵母及其 相关产品行业秩序、促进产业发展的基础性工作 GB/T20886《酵母产品质量要求)拟由三部分构成 第1部分:食品加工用酵母; 第2部分:酵母加工制品; 第3部分:富营养素酵母
GB;/T20886.1一2021 酵母产品质量要求 第1部分;食品加工用酵母 范围 本文件规定了食品加工用酵母的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则和标志,包装、运 输、贮存 本文件适用于食品加工用酵母的生产、检验和销售,不适用于自产自用酵母 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件 GB/T191包装储运图示标志 GB/T317白砂糖 GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备 GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T1355小麦粉 GB4789.152016食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数 GB5009.3一2016食品安全国家标准食品中水分的测定 GB5009.4食品安全国家标准食品中灰分的测定 GB5009.5一2016食品安全国家标准食品中蛋白质的测定 GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 3.1 食品加工用酵母yeastforfdpreessing 以糖蜜或淀粉质类原料为主要碳源,加人氮源,磷源等适宜细胞生长的发酵用营养物质接种酵母 菌种,经发酵培养、分离、过滤、干燥等工序制成的能够发酵产生二氧化碳、酒精或增加食品风味、营养等 功能的酵母类食品或食品配料 3.2 面用酵母baker's syeast 具有发酵力的用于米,面等食品加工的食品加工用酵母
GB/T20886.1一2021 3.3 酒用酵母brewingyeast 酿酒酵母brewer'syeast 具有发酵产生酒精能力或产生酒体所需特有风味,用于白酒、啤酒、葡萄酒、黄酒、果酒等饮料酒和 酒精发酵的食品加工用酵母 3.4 食用酵母edibleyeast 可直接作为食品,或者作为食品原料添加在各类食品中,增加食品风味、营养等功能的食品加工用 酵母 3.5 高活性干酵母instantdryyeast 即发酵母instantyeast 即发干酵母instantryyeast 发酵后经干燥后制成的有高发酵力或出酒率,且发酵速度快、溶解性能好,含水量低的食品加工用 酵母 3.6 高活性半干酵母instantsemi-dryyeast 冷冻酵母 发酵后经干燥后制成的有较高发酵力,且发酵速度快、溶解性能好、含水量较低的食品加工用酵母 3.7 鲜酵母reshyeast 压榨酵母 具有强壮生命活力的酵母细胞所组成的有发酵力的,经分离等工序制得的水分含量较高的固体状 态的食品加工用酵母 3.8 酵母乳 creamyeast 具有强壮生命活力的酵母细胞所组成的有发酵力的,经分离等工序制得的水分含量高的液体状态 的食品加工用酵母 3.9 低糖型酵母 low-sugaryeast 不能耐受高的渗透压,在糖含量较低条件下发酵力较高的面用酵母 3.10 高糖型酵母highsugaryeast 耐高糖型酵母 osmoticpressureresistanceyeast;sugartolerantyeast 可以耐受一定的渗透压,在糖含量较高条件下发酵力较高的面用酵母 3.11 非活性食用酵母inaetieedible yeast 通过热处理的方式使其失去活性的食用酵母 3.12 发酵力fermentationactivities 单位时间内面用酵母利用外界营养源发酵产生二氧化碳的能力,是衡量面用酵母发酵性能高低的
GB;/T20886.1一2021 指标 3.13 出酒率aleoholicratefromfermentationstareh 在一定温度下,定量酵母发酵定量的玉米粉醒液,在规定时间内发酵所产生的酒精量(以96%体积 分数乙醉计)占淀粉的百分比,是衡量酒用酵母发酵性能高低的指标 产品分类 4.1发酵用酵母 4.1.1面用酵母 高活性干酵母 4.1.1.1 按照耐糖情况分为低糖型高活性干酵母和高糖型(耐高糖型)高活性干酵母 4.1.1.2高活性半干酵母 按照耐糖情况分为低糖型高活性半干酵母和高糖型(耐高糖型)高活性半干酵母 4.1.1.3鲜酵母 按照耐糖情况分为低糖型鲜酵母和高糖型(耐高糖型)鲜酵母 4.1.1.4酵母乳 按照耐糖情况分为低糖型酵母乳和高糖型(耐高糖型)酵母乳 4.1.2酒用酵母 高活性干酵母 4.1.2.1 按耐受发酵温度分为常温型高活性干酵母和耐高温型高活性干酵母 4.1.2.2鲜酵母 按耐受发酵温度分为常温型鲜酵母和耐高温型鲜酵母 4.1.2.3酵母乳 按耐受发酵温度分为常温型酵母乳和耐高温型酵母乳 4.2食用酵母 4.2.1活性食用酵母 4.2.2非活性食用酵母 5 要求 5.1感官要求 应符合表1的要求
GB/T20886.1一2021 表1食品加工用酵母的感官要求 项目 要求 形态 条状、块状、颗粒、粉状或乳状 色泽 乳白色至深棕色 气味 具有酵母特有气味,无腐败,无异臭 杂质 无正常视力可见杂质 5.2理化要求 5.2.1面用酵母 应符合表2的规定 表2面用酵母的理化要求 干酵母 鲜酵母 酵母乳 项目 高活性干酵母 高活性半干醇母 低糖型高糖型！低糖型高糖型低糖型高糖型低糖型 高糖型 550 55o 发酵力"'/mL/h) 450 500 500 水分 /100 5.5 15.026.0 63.074.o 71.086.0 /g g 酸度/mL/100g) 30.0 50,0 活细胞率/% 75 也可符合标示值 5.2.2酒用酵母 应符合表3的规定 表3酒用酵母的理化要求 高活性干酵母 鲜酵母 酵母乳 项目 耐高温型 耐高温型 耐高温型 常温型 常温型 常温型 出酒率/%> 48.0 45.0 48.0 45.0 48.0 45.0 水分/g/100g 5,5 63.0~74,0 71.0一86.0 80.0 96.0 96.0 活细胞率"/% 酸度/mL/100 30.0 50.0 0g 也可符合标示值 5.2.3 食用酵母 应符合表4的规定
GB;/T20886.1一2021 表4食用酵母的理化要求 项目 活性食用酵母 非活性食用酵母 水分/g/100g 5,0 5,0 蛋白质(以干基计)/g/100B) 40.0 40.,0 习 总灰分/g/100 8.0 8.0 g 1×1o 活细胞数/(CFU/8 试验方法 6.1 -般要求 本方法中所用的水,在未注明其他要求时,应符合GB/T6682一2008中三级水要求;所用试剂,在 未注明其他规格时,均指分析纯 分析中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品,在没有 注明其他要求时,均按GB/T601、GB/T602GB/T603的规定制备 试验中所用溶液在未注明用何种 溶剂配制时,均指水溶液 6.2感官要求 取适量样品,放人无色、洁净、干燥的玻璃杯(或白瓷盘)中,置于明亮处,在自然光下用肉眼观察其 形态、色泽,嗅其气味,检查有无正常视力可见杂质 6.3发酵力 按附录A测定 6.4出酒率 按附录B测定 6.5水分 按GB5009.3一2016中“直接干燥法”测定 6.6酸度 按附录C测定 6.7活细胞率 按附录D测定 6.8蛋白质 按GB5009.52016第一法测定,折算系数F取6.25 6.9总灰分 按GB5009.4测定
GB/T20886.1一2021 6.10活细胞数 按GB4789.15一2016中酵母计数方法测定 检验规则 7.1组批 同原料,同配方、,同工艺、同一生产线连续生产的,质量均一的产品为一批 7.2抽样 7.2.1产品按批抽样 批量不大于600件时,从不少于3件包装中抽取样品;批量大于600件时,从不 少于0.5%比例的包装中抽取样品 每份样本总量不少于三倍试验检测量 7.22桶装产晶应从表面10cm以下处抽取样品 取样器应站净、干燥 7.2.3抽取样品两份,签封,并标注样品信息 一份送检，一份封存,保留半个月备查 做微生物检验 时,取样器和玻璃瓶应事先灭菌(样品不应接触瓶口),当抽取的样本总量少于200只时,应适当加大抽 样比例 7.3出厂检验 7.3.1产品出厂前,应按本文件规定逐批进行检验 检验符合本文件要求后方可出厂 7.3.2出厂检验项目: -面用酵母:感官、发酵力、水分 酒用酵母;感官、出酒率,水分 -活性食用酵母;感官,蛋白质、水分、活细胞数 非活性食用酵母;感官,蛋白质,水分 7.4型式检验 7.4.1型式检验的项目:本文件规定的全部项目 7.4.2 般情况下,型式检验应每年至少进行一次 有下列情况之一时,亦应进行型式检验 原辅材料有较大变化时; a b更改关键工艺或设备时; 新试制的产品或正常生产的产品停产三个月后,重新恢复生产时; c 出厂检验与上次型式检验结果有较大差异时; d 国家监督机构按有关规定需要抽检时 e 7.5判定规则 7.5.1抽取样品经检验,检验项目全部符合要求,判定该批产品符合本文件 7.5.2检验项目如有一项至两项不符合要求,应重新自同批产品中抽取两倍量样品进行复检,以复检 结果为准;若仍有一项不符合要求,判定该批产品不符合本文件 检验结果如有三项及以上指标不符合 要求,判定该批产品不符合本文件
GB;/T20886.1一2021 标志,包装,运输、贮存 8.1标志 8.1.1销售包装使用标签时,还应注明产品分类 8.1.2包装储运图示按GB/T191的规定执行 8.2包装 包装容器应整洁,无破损,应符合国家相关规定 8.3运输 运输工具应清洁 不应与有毒,有害、有腐蚀性和含有异味的物品混装、混运,应避免受潮、受压,暴 晒 装卸时,应轻拿轻放,不应直接钩扎包装 8.4贮存 8.4.1应储存在通风、干燥、清洁的仓库内,严防日晒雨淋,严禁火种 不应与有毒、有害、有腐蚀性和 有异味的物品放在一起 8.4.2鲜酵母放人包装箱<储罐)内,应按照产品标识要求冷藏贮存 8.4.3高活性干酵母宜于阴凉、干燥处储存 8.4.4高活性半干酵母应冷冻保存
GB/T20886.1一2021 附录 A 规范性 发酵力的测定 A.1方法提要 在30C士0.2时,测定按一定成分配制的面团,在规定的时间内，经酵母发酵产生的二氧化碳气 体的体积 A.2试剂和材料 A.2.1氯化钠 A.2.2特制二等小麦粉:符合GB/T1355的要求,使用前按GB5009.3测定其水分 注对于相同产地,质量相对稳定的面粉,发酵力测定时要求计算面粉含水量从而控制总加水量 A.2.3白砂糖;应符合GB/T317的要求 A.3仪器和设备 A.3.1发酵仪活力计. A.3.2发酵力测定参考装置;见图A.1 18cm C 0.6cm" 标引序号说明: -1000ml.广口玻璃瓶 心 -2500ml小口试剂瓶 c -1000ml 玻璃量筒; D 恒温水浴 图A.1发酵力测定装置 A.3.3恒温水浴;控温精度士0.2 A.3.4天平;感量0.01g A.3.5和面机
GB;/T20886.1一2021 A.3.6温度计;分度值为0.1C A.3.7恒温箱 A.3.8真空泵 A.3.9布氏漏斗 A.3.10抽滤瓶 A.3.11中速定性滤纸 A.4试验步骤 A.4.1鲜酵母、酵母乳 A.4.1.1样品处理 A.4.1.1.1酵母乳的处理 放两层中速滤纸于布氏漏斗中,开启真空泵,加少量水,使滤纸和漏斗底部紧贴 用量筒量取酵母 乳约50ml,倒人布氏漏斗中,抽滤5n ,加人去离子水约50ml于布氏漏斗中,继续抽滤25 ,直 min， min， 至漏斗下方无液体滴落,取出备用 A.4.1.1.2块状、颗粒或粉状鲜酵母可直接检测 A.4.1.2面团制备 A.4.1.2.1面团不含糖(低糖型酵母 称取氯化钠4.0g,加水约145mL溶解,制成盐水溶液(以下简称为盐水) 称取特制二等小麦粉 280.0g,倒人和面机中 另称取鲜酵母样品6.0g(若样品已冷藏,应事先在30下放置1h)至50ml 的小烧杯中,用少量上述盐水溶解鲜酵母,将溶解后的鲜酵母倒人和面机内,并用少量盐水洗涤小烧杯 2次,洗涤液和剩下的盐水一并倒人和面机内,混合搅拌5min,面团温度应为30C士0.2C A.4.1.2.2面团含糖16%(高糖型酵母 称取氯化钠2.80g和白砂糖44.8g,加水约125mL溶解,制成糖盐水 称取特制二等小麦粉 280.0g，倒人和面机中 另称取鲜酵母样品9.0g(若样品已冷藏,应事先在30C下放置1h)至50mL 的小烧杯中,用少量上述糖盐水溶解鲜酵母,将溶解后的鲜酵母倒人和面机内,然后再用少量糖盐水洗 涤小烧杯2次,洗涤液和剩下的糖盐水一并倒人和面机内，混合搅拌5nmin，面团温度应为 30C士0.2C 注，可依据不同设备的发酵室体积,成比例增加或减少各成分的含量;亦可把面团切分成小面团,置于发酵室中进 行发酵力测试,结果需按反比例折算 A.4.1.3测定 A.4.1.3.1第一法(仲裁法 将面团放人仪器的检测容器中,送人发仪(A3.1)话力室内 发脖温度为30c士05仑 调节记 录仪零点,关闭放气小孔 从和面到面团放人仪器内的第8min开始计时 记录第1h面团产生的二 氧化碳气体量,即为该酵母的发酵力
GB/T20886.1一2021 A.4.1.3.2第二法 测定装置如图A.1所示 将制备好的面团立即投人A瓶,并把A瓶放人30C士0.5C恒温水浴 中,连接B瓶(B瓶内盛有2000ml排除液) 从和面到面团放人A瓶内的第8min开始计时 记录第 1h的排水量,即为面团产生的二氧化碳气体量,记为该酵母的发酵力 注如果成比例增加或减少各成分的含量,需要成反比例折算1h的产气量;例如,测试中各成分均为A.4.1.,2所示 成分的十分之一,则取平均值乘以10,即为最终结果,单位;ml/h. 所得结果保留整数 A.4.2高活性干酵母、高活性半干酵 A.4.2.1面团制备 面团不含糖(低糖型酵母 A.4.2.1.1 称取氯化钠4.0g,加水约150ml溶解,制成盐水 分别称取特制二等小麦粉280,0g和干酵母 2.8g，倒人和面机中,混合搅拌1nmin,然后加人盐水,继续混合搅拌5min后,此时面团温度应为 30士0.2C A.4.2.1.2面团含糖16%高糖型酵母) 称取氯化钠2.80只和白砂糖44.8g,加水约130mL溶解,制成糖盐水 分别称取特制二等小麦粉 280.0g和干酵母4.0g,倒人和面机中,混合搅拌1min,加人糖盐水,继续混合搅拌5min后,此时面团 温度应为30c士0.2c. 注可依据不同设备的发酵室体积,成比例增加或减少各成分的含量;亦可把面团切分成小而团,置于发酵室中进 行发酵力测试,结果需按反比例折算 A.4.2.2测定 A.4.2.2.1 第 一法(仲裁法》 同A.4.1.3.1 A.4.2.2.2第二法 同A.4.1.3.2 A.5注意事项 -发酵力检测室内室温应控制在17C25C 冬天,糖盐水(或盐水)温度要求控制在不超过38C,如用38C以下的糖盐水(或盐水)检测发 醉力时,面团温度不能控制在30C士0.2C时,可将面粉放在40C烘箱中烘10 min一 20min:夏天,室温较高时,糖盐水(或盐水)可在冰箱适当降温,但糖盐水(或盐水)温度要求 控制在不低于10C,如用10C以上的糖盐水(或盐水)检测发酵力时,面团温度不能控制在 30C士0.2C时,可将面粉放在4Cl0C冰箱中静置10min20min. 测量面团温度时,温度计应插人面团的中心部位,且与面团紧密、充分接触,待示值稳定后读取 数值 10
GB;/T20886.1一2021 和好后面团温度要求控制在30C士0.2C范围内,如和面后面团温度超出30C士0.2C范 围,应重新制备面团 -每次发酵力检测时面团的柔软度要保持一致,和出的面团以柔软、表面光滑、不粘手为原则 A.6精密度 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值应不超过20mL/h 11
GB/T20886.1一2021 附录 B 规范性) 出酒率的测定 B.1试剂和材料 B.1.1黄玉米粉或白玉米粉 B. 1.2蔗糖溶液;20g/I 1.3-淀粉酶 . BB .1.4糖化酶 B .1.5消泡剂;食用油 B. .1.6硫酸溶液:10%体积分数) . .1.7氢氧化钠溶液;4mol/L B.2仪器和设备 B.2.1高压蒸汽灭菌锅 B.2.2三角瓶:500mL B.2.3恒温箱:控温精度士0.5C B.2.4精密酒精计;精度0.2%体积分数). B.2.5容量瓶;100ml B.2.6燕溜烧瓶:l000mL B.2.7电子天平:感量0.1mg B.3分析步骤 B.3.1酵母活化液的制备 称取酒用鲜酵母或高活性干酵母1.0g(精确至0.0001g),加人蔗糖溶液16mLl,摇匀,置于32C 恒温箱内活化1h,备用 B.3.2液化 称取过孔径0.425mm筛的玉米淀粉50g,于500mL三角瓶内,按每克玉米粉加人c诧粉酶(80U一 ，并加人热水175mL,搅匀 调pH至6.0一6.5,在电炉上边加热边搅拌 至沸后停止加热用 100U)， 自来水冲洗三角瓶壁上的玉米糊,使内容物总质量为2501 放人70C85C恒温箱内液化30min. e B.3.3蒸煮 将装有已液化好玉米糊的三角瓶用棉塞和防水纸封口后,放人高压蒸汽灭菌锅,于压力0.1MPa 保压1h 取出,冷却至60C B.3.4糖化 用硫酸溶液(B.1.6)调憋蒸煮液pH至4.5左右 按每克玉米粉加人糖化酶(150U~200U),搅匀 放人60C恒温箱内,糖化60min 冷却至30C35C 12
GB;/T20886.1一2021 B.3.5发酵 于每个三角瓶中加人酵母活化液(见B3.1)2.0mL,摇匀,盖塞 将三角瓶放人32恒温箱内,发 酵65h 测定耐高温型干酵母时,将三角瓶放人40C恒温箱内发酵65h， B.3.6蒸熠 用氢氧化钠溶液中和发酵醋pH至6.0~7.0,将发酵醋液全部倒人1000ml蒸憎烧瓶中 用 100ml水分多次冲洗三角瓶,并将洗液倒人蒸僧烧瓶中,加人消泡剂1滴2滴,进行蒸僧 用 100ml容量瓶(外加冰水浴)接收蒸僧液 当蒸僧至95ml时,停止蒸榴,取下 待温度平衡至室温 后,定容至100ml B.3.7测量酒精度 将定容后的溜出液全部倒人洁净、干燥的100mL量筒中,静置数分钟,待酒中气泡消失后,放人洗 净,擦干的精密酒精计 静置后,水平观测与弯月面相切处的刻度示值,同时插人温度计记录温度 根 据测得的酒精度和温度,按照附录E.换算成20C时的酒精度 B.4试验数据处理 出酒率按公式(B.1)计算,其数值以%表示 D×0.8411×100 ×100 (B.1 X= m×S 式中 -100g样品的出酒率(以96%乙醇计),%; Y 试样在20C时的酒精度,% D 将100%乙醇换算成96%乙醇的系数 0.8411 -玉米粉的质量,单位为克(g); 7 -玉米粉中的淀粉含量,根据附录F测定,% 计算结果表示到小数点后一位 B.5精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的2% 13
GB/T20886.1一2021 录 附 C 规范性) 酸度的测定 C.1方法提要 采用酸碱滴定法测定样品的酸度 C.2试剂和溶液 c.2.1酚酞指示液(1%);按GB/T603配制 C.2.2氢氧化钠标准溶液(0.05mol/L):按GB/T601配制与标定 c.3仪器 c.3.1三角瓶:250mL C.3.2碱式滴定管:l0mL c.3.3电子天平:感量0.1mg C.4 分析步骤 称取鲜酵母样品酵母乳按附录A中A.4.1.1.1制备成鲜酵母)2g3g(精确至0.01g)于三角瓶 中,加人50ml冷却过的去二氧化碳的水溶解,使溶解后溶液的温度在1520C,倒人铺有两层中 速滤纸布氏漏斗中,开启真空泵,抽滤0.5min,加人去离子水约10m于布氏漏斗中,继续抽滤 0.5min， 取滤清液,迅速加酚酞指示液2滴,用氢氧化钠标准溶液滴定至微红色,记录消耗的氢氧化钠 标准溶液体积数 C.5试验数据处理 酸度按公式(C.1)计算 c×V X 一 (C.1 ×100 又o. 11 式中 X 酸度,l00g样品消耗0.1mol/几氢氧化钠标准溶液的体积,单位为毫升(mL); 氢氧化纳标准溶液的浓度,单位为摩尔每升(mol/I); 消耗氢氧化钠标准浴液的体积,单位为毫升(mL) 样品的质量,单位为克(g); 7 -换算系数 0.1 计算结果表示到小数点后一位 C.6精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的5% 14
GB;/T20886.1一2021 D 附 录 规范性 活细胞率的测定 D.1方法提要 活的酵母细胞能将进人细胞的染色剂还原而不被染色,计算定量酵母中的活细胞数 D.2溶液 D.2.1无菌生理盐水 D.2.2次甲基蓝染色液;称取次甲基蓝0.025g、氯化钾0,.042g六水氯化钙0.048g、碳酸氢钠0.02g、 葡萄糖1.0g混合,加无菌生理盐水定容至100mL D.3仪器和设备 D.3.1显微镜 D.3.2血球计数板:l6×25 D.3.3电子天平:感量0.1mg D.3.4恒温水浴;控温精度士0.5C D.4酵母活化 称取高活性干脖母0l熊或鲜脖母0.3g(精确至0.001g,若样品已冷藏,应事先在30C下放置 lh)，加人20ml无菌生理盐水(38C40)中,在32C恒温水浴中活化1h D.5活细胞率的测定 将活化液振荡均匀,吸取酵母活化液0.1mL,加人染色液0.9mL,摇匀,室温下染色10min,立刻 在显微镜下用血球计数板计数 D.6分析步骤 将盖玻片盖在血球计数板计数室上,使之紧紧盖在血球计数板上，吸取0.lmL染色后的溶液 D.6.1 从血球计数板和盖玻片结合处放0.02mlL染色后的溶液至血球计数板的计数室内(从刻度吸管的最上 端开始往下放0.02mL),让菌液自动吸人计数室 菌液中不应含有气泡,静置1 min一2min后,用显 微镜观察计数 D.6.2用10×接物镜和16×接目镜找出方格后,换用40×接物镜,调整微调至视野最清晰,开始计数， 当细胞处于方格线上时,计数原则;数上不数下,数左不数右 计芽抱时,超过母细胞的二分之一者按细 胞计,小于二分之一者按芽袍计 D.6.3计数方法调整显微镜(15×40)视野,检查计数室内酵母细胞分散是否均匀,随机计数4个中方 格(100个小方格)内的酵母细胞数,取三次计数的算术平均值为结果 无色透明的细胞为酵母活细胞 被染为蓝色的为酵母死细胞 D.7试验数据处理 活细胞率按公式(D.1)计算 15
GB/T20886.1一2021 X = ×100 (D.1 =Aa 式中 X 活细胞率,% 酵母活细胞数 A 酵母死细胞数 计算结果表示到小数点后一位 D.8精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的5% 16
GB;/T20886.1?2021 S " S 83 8 ? 5 17
GB/T20886.1一2021 3 s s 3 紧 案 三 3 2 二 9 9 二 2 品 3 二 交 鹦 18
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GB/T20886.1一2021 附录 F 规范性 玉米粉中淀粉含量的测定 r.1原理 玉米粉中的淀粉经酸水解成具有还原性的单糖,水解液经处理除杂质后,用直接滴定法,测定还原 糖含量,再乘以系数,折算为淀粉含量 试剂和溶液 F.2 P.2.1 盐酸 F.2.2盐酸溶液[e(HCI)=1.5mol/L]按GB/T601配制 F.2.3氢氧化钠溶液(400g/L);称取氢氧化钠40g,加水溶解,并定容至100ml. F.2.4乙酸铅溶液(200g/L);称取乙酸铅20g,加水溶解,并定容至100mL r.2.5硫酸钠溶液(100g/L);称取硫酸钠10g,加水溶解,并定容至100mL F.2.6碱性酒石酸铜甲液;称取硫酸铜(CusO5Hl,O)15g,次甲基蓝0.5g,加水溶解,并定容至 1000ml，贮于棕色玻璃瓶中 F.2.7碱性酒石酸铜乙液;称取酒石酸钾钠50g和氢氧化钠75g,溶于水中,再加人亚铁氮化钾4g,待 完全溶解后,加水稀释,并定容至1000mL,贮于橡胶塞玻璃瓶中 r.2.8葡萄糖标准浴液(g/L);称取已于98C一100C下烘至但重的无水葡萄糖1.000g,用500ml 水溶解后,加人盐酸(F.2.1)5mL,再加水稀释,并定容至1000mL F.2.9甲基红指示剂称取甲基红0.2g,用95%乙醇溶解,并定容至100ml F.3 仪器和设备 水浴锅;温度0C一100C. F.3.1 r.3.2三角瓶 F,3.3容量瓶 F.3.4滴定管(25mL) F.3.5回流装置(250mL F.4分析步骤 F.4.1 样品处理 称取玉米粉1g(精确至0.0001g)于250mL磨口三角瓶中,加人盐酸溶解(F.2.2)100mL,插上冷 凝管,置沸水浴中回流2h 然后冷却至室温,加人甲基红指示液(F.2.9)2滴,用氢氧化钠溶液(F.2.3)中 和至溶液呈淡黄色 慢慢加人乙酸铅溶液(F,2.4)10mL,摇匀,放置10min 再加人硫酸钠溶液 F.2.5)10ml,摇匀,将其全部移人500ml容量瓶中,用水洗涤三角瓶,洗液一并倒人容量瓶中,定容 过滤,弃去最初滤液约20mL,收集其余滤液供测定用 F.4.2还原糖测定 F.4.2.1标定碱性酒石酸铜溶液 吸取碱性酒石酸铜甲液、乙液各5.0mL于150ml.三角瓶中,加人10mlL水和2粒玻璃珠,从滴定 管放葡萄糖标准溶液约9mL,控制在2min内加热至沸,趁沸以1滴/2s的速度继续滴加葡萄糖标准 20
GB;/T20886.1一2021 溶液,直至溶液的蓝色刚好褪去为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积 平行测样三份,取平均值 计算每10ml.(甲、乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg) F.4.2.2样品溶液预测定 吸取碱性酒石酸铜甲液、乙液各5.0ml于150ml三角瓶中,加人10ml水和2粒玻璃珠,从滴定 管放样品溶液约5ml,控制在2min内加热至沸,趁沸以先慢后快的速度,从滴定管中滴加样品溶液 待样品溶液颜色变浅时,以1滴/2s的速度滴定,直至溶液的蓝色刚好褪去为终点,记录消耗样品溶液 的体积 F.4.2.3样品溶液的测定 吸取碱性酒石酸铜甲液、乙液各5.0ml于150ml三角瓶中,加人10ml水和2粒玻璃珠,从滴定 管放比预测定体积少ml的样品溶液,控制在2min内加热至沸,趁沸以1滴/2s的速度滴定,直至溶 液的蓝色刚好褪去为终点,记录消耗样品游液的体积 同时做三份平行样.取平均值计算 F.5计算 淀粉含量按公式(F.1)计算: m12×45 F.1) ×V 式中: S 试样中淀粉含量,%; -10mL 碱性酒石酸铜溶液(甲乙液各5ml)相当于还原糖(以葡萄糖计)的质量,单位为毫 1？ 克(mg); 试样质量,单位为克(g) n 测定时平均消耗样品溶液的体积,单位为毫升(mL); V 试样中葡萄糖折算成淀粉的换算系数 45 计算结果表示到小数点后两位 F.6精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的5% 21