GB/T15670.5-2017
农药登记毒理学试验方法第5部分：急性经皮毒性试验
Toxicologicaltestmethodsforpesticidesregistration—Part5:Acutedermaltoxicitytest
- 中国标准分类号（CCS）B17
- 国际标准分类号（ICS）65.100
- 实施日期2018-02-01
- 文件格式PDF
- 文本页数10页
- 文件大小706.07KB
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农药登记毒理学试验方法第5部分：急性经皮毒性试验
国家标准 GB/T15670.5一2017 部分代替GB/T15670-1995 农药登记毒理学试验方法 第5部分:急性经皮毒性试验 Iosieologiealtestmethodsforpestiecidesregistration Part5:Aeutedermaltoxieittest 2017-07-12发布 2018-02-01实施 中华人民共利国国家质量监督检验检疙总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/T15670.5一2017 增加了受试物的制备、配制注意事项(见6.1) 修改了剂量分组的内容,提出至少3个剂量组要求(见6.3.1,1995年版的3.4.1); -染毒时间由4h时改为24h(见6.4.3,l995年版的3.5.4). 本部分由农业部提出并归口
本部分起草单位;农业部农药检定所
本部分主要起草人;孙金秀、陶传江,张丽英
本部分所代替标准的历次版本发布情况为 GB/T156701995
GB;/T15670.5一2017 农药登记毒理学试验方法 第5部分急性经皮毒性试验 范围 GB/T15670的本部分规定了急性经皮毒性试验的基本原则、方法和要求
本部分适用于为农药登记而进行的急性经皮毒性试验
规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
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GB14925实验动物环境及设施 农药登记资料规定农业部令[2007]第10号 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件
3. 急性经皮毒性aeutedermaltoxieity 经皮肤染毒受试物连续接触24h所产生的健康损害效应
3.2 剂量dose 所给受试物的量,以实验动物单位体重所接受受试物的质量表示(mg/kg体重)
3.3 半数致死剂量medianlethaldose LD.n -次或在24h内多次给予实验动物受试物后,引起实验动物总体中半数死亡的毒物统计学剂量 以实验动物单位体重接受受试物的质量表示(mg/kg体重)
3.4 剂量-反应关系dose-responserelationshijp 剂量与特定效应的发生率间的关系
试验目的 通过24h内连续经完整皮肤染毒受试物,观察受试物对实验动物所产生的毒性作用,初步了解受 试物能否经皮肤吸收和毒作用模式,为急性毒性分级、标签管理及其他毒理学试验剂量的选择提供 依据
GB/T15670.5一2017 5 试验概述 试验前去除实验动物受试部位的被毛将实验动物分成若干剂量组(至少3个组),每组涂布不同剂 量的受试物,然后观察实验动物中毒反应和死亡情况,对试验中死亡和试验结束时处死的动物应做大体 解剖,计算LD和95%可信区间
6 试验方法 6.1受试物配制 液态受试物一般使用原液
固体受试物应将其研磨成粉状过100目筛,并用水或其他无毒,无刺激 性,不影响皮肤通透性、也不与受试物反应的介质充分湿润,以保证受试物与皮肤有良好的接触
6.2实验动物 6.2.1种属和体重 首选大鼠,也可选白色家兔、白色豚鼠或非啮齿类动物
选用大鼠以外的其他实验动物应说明理 由
实验动物体重要求范围分别为大鼠200g一300g,白色家兔2.0kg一3.0kg,豚鼠350g一450g 可选国内常用品系
雌性动物应为未妊娠和未经产的
6.2.2动物性别 选择最敏感的性别动物进行试验
不能确定时,可提供两种性别动物的试验结果;或先进行一种性 别动物的试验后,再至少选择另外一种性别的5只动物在相同剂量下染毒,评估最敏感性别的动物
如 果有足够的证据表明所试验的动物性别肯定是最敏感的,可不必再进行第二种性别的染毒试验
6.2.3饲养环境 正式试验前,动物应在试验环境中检疫、适应3d5d时间
实验动物饲养环境条件应符合GB14925的有关规定
试验期间,为避免实验动物相互抓挠、舔 食,推荐采用单笼饲养
6.3剂量和分组 6.3.1剂量 通过每剂量一只动物的预试验确定剂量范围
剂量设计可采用霍恩氏法、概率单位法等
至少应 设3个剂量组,组间距应根据受试物毒作用特征决定,但应能保证动物出现一定梯度的毒性作用和死亡 率,以满足计算半数致死剂量的需要
6.3.2限量试验 -般情况下,使用啃齿类动物时，一次染毒两种性别各5只动物,2000mg/kg体重,或根据管理上 的需要也可选择5000mg/kg体重剂量进行试验
特殊情况下,限量试验可采用更高的剂量
如果没 有死亡发生,可结束试验,不需要做多组试验
如果出现与染毒有关的死亡,需要进行多个剂量的试验
6.3.3动物分组 实验动物随机分组,大鼠或豚鼠每一剂量组(单性别)不少于5只;家兔每一剂量组(单性别)不少于 4只
GB;/T15670.5一2017 6.4试验步骤 6.4.1 备皮 试验前24h,在动物背部正中线两侧去毛,仔细检查皮肤,要求完整无损,以免改变皮肤的通透性
染毒面积不应少于实验动物体表面积的10%
应通过对动物体重的测定确定染毒部位的面积,动物体 表面积的计算公式见附录A
6.4.2动物的固定 染毒时应采用必要的措施对动物进行适当固定,并需要一定程度的松动,不推荐完全限制动物活动 的方法
6.4.3染毒操作 将受试物均匀涂布于实验动物的去毛区,面积略小于去毛区,记录染毒面积
覆盖一层不渗透材料 后再以2层8层的多孔纱布覆盖,并用无刺激性胶布或绷带加以固定,以保证受试物和皮肤的密切接 触防止受试物挥发,脱落和被动物舔食
接触24h后取下固定物和覆盖物,用温水或适当的方法清除 皮肤上残留的受试物
在保证受试物与皮肤充分接触的条件下,对毒性较大的受试物,可根据剂量相对 减小染毒区域的面积
6.5试验观察和检查 6.5.1观察期限 每天观察一次,连续14d.记录中毒发生、发展过程,死亡情况
观察期限也不是固定的,根据毒性 反应、反应出现和消失的时间可做出调整
如果动物中毒反应、死亡时间延迟(染毒后4d后才显示) 观察期限应适当延长,最长不超过21d
6.5.2观察内容 6.5.2.1临床观察 观察至少包括皮肤、被毛、眼、黏膜的改变和呼吸系统、神经系统、肢体活动、行为方式等变化发生的 时间、程度和持续时间
观察的内容包括 中枢神经系统和神经肌肉系统体位异常、叫声异常、不安、呆滞、震颤、抽搐、麻痹、运动失调、 a 对外反应过敏或迟钝,异常行为如过度反复抓挠口周、梳理、转圈,甚至自残、倒退行走等; b 植物神经系统;瞳孔扩大或缩小,流诞或流泪; 呼吸系统;鼻孔流液、鼻鲤、鼻翼扇动、呼吸深缓、呼吸过速、蜂腰; d 泌尿生殖系统;会阴部污秽,有分泌物,阴道肿胀; 皮肤和被毛:皮肤充血、紫绀、被毛蓬松或潮湿、污秽 e 眼;眼球突出、结膜充血、溢血性分泌物,角膜混浊; 消化系统;腹泻、厌食
g 应特别注意染毒区皮肤的反应
如发现动物死亡或处于体弱、濒死状态,应及时与其他动物分离， 并记录发生的时间,称量体重,解剖检查,以减少动物同类互残及死后组织自溶,避免动物信息的丢失
如果死亡动物不能立即进行大体解剖检查,应保存在能够减少自溶的低温环境中(冷藏,不能冷冻),并 在24h内进行解剖检查
GB/T15670.5一2017 6.5.2.2体重称量 应分别在染毒前、染毒后(至少每周一次)和处死前称量并记录动物体重 6.5.3病理学检查 在试验期内中毒死亡的和人道处死的动物应做大体解剖,记录每只动物的大体病理改变
染毒后 存活时间大于等于24h的动物其器官显示有大体病理改变,则需进行组织病理学检查,以便获取有关 毒作用的信息
必要时对染毒区和临近非染毒区皮肤作组织学检查
试验结果和评价 7.1结果处理 7.1.1用表格列出试验中获得的各组(两种性别或单性别动物的全部原始数据.内容应包括:动物编 号、性别、染毒剂量、体重、各种体征的有无及程度、死亡或存活状况、大体解剖及组织病理学检查时各病 变的有无及程度
7.1.2分别统计各组及不同性别动物的数量,体征发生、死亡、存活及大体解剖和组织病理学检查的各 类病变发生的频数,计算不同组、不同性别动物上述各项的发生率及不同时间的体重均值
7.1.3用适宜的统计学方法对上述数据进行统计学分析
7.1.4用适宜方法计算LD.值和95%可信区间
7.2结果评价 7.2.1对受试物能否经皮吸收及毒作用特点做出初步评价
7.2.2受试物的毒作用水平,如能得到剂量-反应关系曲线,可对急性经皮毒作用阂值做出初步评价
7.2.3明确是以何种性别的动物和接触时间得到的毒性参数
7.2.4急性经皮毒性级别按照《农药登记资料规定》中3.3.2.8的相应标准判定
试验报告 试验报告至少应包括以下内容: 试验名称、试验单位名称和联系方式、报告编号; a b 试验委托单位名称和联系方式.样品受理日期和封样情况 试验开始和结束日期试验项目负责人、试验单位技术负责人、签发日期; 试验摘要; d 受试物名称、有效成分美国化学文摘登录号(CAs号)(如已知)、代码(如有,纯度(或含量)、 剂型、生产日期批号、理化性质、配制所用溶剂和方法; 实验动物种属、品系、级别、数量、体重、性别,来源(供应商名称,实验动物质量合格证号、实验 动物生产许可证号),检疫、适应情况,实验动物饲养环境,包括温度、相对湿度、饲料、单笼饲养 或群饲、实验动物设施使用许可证号; 剂量和组别包括选择剂量的原则或依据、剂量和组别、动物分组方式和每组每种性别动物数 g h)试验条件和方法,包括主要仪器设备、染毒途径,染毒方案,试验周期、观察指标等;
GB;/T15670.5一2017 试验结果;以文字描述和表格逐项进行汇总,包括临床中毒表现,中毒表现出现、持续和恢复时 间,染毒后出现死亡的时间,体重变化,与剂量的相关性以及大体解剖和组织病理学改变等,指 出结果的统计处理方法; 试验结论;给出明确结论,如LD,95%可信区间和毒性分级,必要时对有关问题进行讨论 i k 原始记录保存情况的说明
GB/T15670.5一2017 附 录 A 规范性附录) 实验动物体表面积估算方法 A.1大鼠 大鼠体表面积按式(A.1)计算 =K
w" S (A.l1 式中 -体表面积,单位为平方厘米(cm=); K 常数,K=9.13; -动物体重,单位为克(g). W 大鼠体表面积也可直接查表A.1求得
表A.1大鼠体表面积(em) 体重/g 312 200 314 316 318 321 32r 329 331 210 323 325 220 333 335 337 339y 341 230 343 345 347 349 351 357 240 353 355 358 360 366 250 362 364 368 370 74 376 260 372 378 380 387 389 270 81 83 385 28o 391 393 394 396 398 290 400 402 404 406 407 300 409 411 413 415 416 A.2家兔 家兔体表面积按式(A.2)计算 S=KW2/8 (A.2 式中 S -体表面积,单位为平方厘米(em'); 常数，一般成年家兔为10 W -动物体重,单位为克(g). 家兔体表面积也可直接查表A.2求得
GB;/T15670.5一2017 表A.2家兔体表面积(cm') 体重/g 20 40 60 80 2000 1587 1598 1619 1629 l608 2100 1640 1650 1661 1671 1681 1702 2200 692 1712 1722 1732 2300 1742 17583 1763 1773 1783 1793 2400 1803 1812 1822 1832 2500 1842 1852 1862 1871 1881 1891 1920 2600 1900 1991 1929 2700 1939 1949 1958 1968 1977 2800 1987 1996 2005 2015 2024 2900 2034 2043 2052 2062 2073 3000 2080 2089 2099 2 108 21l7 A.3豚鼠 豚鼠体表面积按式(A.3)计算 .w S=K A.3 式中: 体表面积,单位为平方厘米(em'); 常数，一般为9.,26 W -动物体重,单位为克(g)
豚鼠体表面积也可直接查表A.3求得
表A.3豚鼠体表面积(emt) 体重/g 350 460 462 463 465 467 360 469 470 72 474 476 370 477 479 481 482 484 491 380 486 488 489 493 390 494 496 498 499 501 00 508 503 504 506 509 518 4I0 1m 513 514 516 420 519 521 523 526 524 430 528 529 531 532 534 440 536 537 539 541 542 450 544 545 547 549 550
农药登记毒理学试验方法第5部分：急性经皮毒性试验GB/T15670.5-2017
农药是现代农业生产必不可少的物质之一，但同时也带来了诸多的环境和健康问题。因此，在农药的开发和使用过程中，需要进行必要的毒理学试验来评价其对人体和环境的影响。农药登记毒理学试验方法第5部分：急性经皮毒性试验GB/T15670.5-2017就是其中之一。
该标准主要用于评价化学农药、生物农药及其制剂在通过人体皮肤进入体内时的毒性反应，包括急性皮肤刺激、吸收、毒性和过敏反应等。这些试验能够评估农药对人体的急性毒性，从而为其安全使用提供科学的依据。
按照该标准的规定，试验需要进行体外试验和体内试验两个部分。其中体外试验主要是通过皮肤模拟器来模拟人类皮肤，检测农药在不同时间内穿透皮肤的速率；而体内试验则是通过动物实验来评价农药的毒性反应。
总的来说，农药登记毒理学试验方法第5部分：急性经皮毒性试验GB/T15670.5-2017是确保农药安全使用的重要手段之一。只有通过科学的试验方法，才能更好地评估农药的毒性，并制定出更加严格、科学的农药登记标准。
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- 农药登记毒理学试验方法第8部分：急性眼刺激性/腐蚀性试验GB/T15670.8-2017
- 农药登记毒理学试验方法第7部分：皮肤刺激性/腐蚀性试验GB/T15670.7-2017解析
- 农药登记毒理学试验方法第6部分：急性吸入毒性试验GB/T15670.6-2017
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- 大型急性毒性实验方法GB/T16125-2012
- 医疗器械生物学评价第20部分：医疗器械免疫毒理学试验原则和方法GB/T16886.20-2015
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