GB/T28093-2011
马铃薯银屑病菌检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofHelminthosporiumsolaniDur.&Mont.
- 中国标准分类号（CCS）B16
- 国际标准分类号（ICS）65.020.01
- 实施日期2012-06-01
- 文件格式PDF
- 文本页数8页
- 文件大小952.98KB
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马铃薯银屑病菌检疫鉴定方法
国家标准 GB/T28093一2011 马铃薯银屑病菌检疫鉴定方法 DeteetionandidentifieationofHelminthosporiumsolaniDur.&NMont. 2011-12-30发布 2012-06-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/T28093一2011 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口
本标准起草单位;辽宁出人境检验检疫局、检验检疫科学研究院
本标准主要起草人:刘伟、严进、王秀芬,董薇,姜丽、王有福、丘驰、陈蛛、赵文军,朱水芳、张秋娥
GB/T28093一2011 马铃薯银屑病菌检疫鉴定方法 范围 本标准规定了马铃薯银屑病菌的检疫和鉴定方法
本标准适用于马铃薯块茎上马铃薯银屑病菌的检疫和鉴定
马铃薯银屑病菌基本信息 学名Hlmimhwpriww.olaniDur、&.Monr 中文名;马铃薯银屑病菌(茄长蠕抱菌
potatosilverscurf
英文名;pc &
根据《DieionaryofFungi》第9版,马铃薯银屑病菌(HelminthosoriunsolaniDur. Mo.)的 分类地位为;真菌界(Fungi),有丝分裂抱子真菌(Mitosporicfungi)的长蠕抱属,茄长蠕抱菌
方法原理 马铃薯银屑病菌在马铃薯块茎上具有银色光泽的病斑及经过保湿培养后形成独有的“圣诞树”状袍 子梗和分生抱子是马铃薯银屑病菌鉴定的依据
主要仪器设备、用具和试剂 仪器设备;体视显微镜、生物显微镜、超净工作台、生物培养箱、光照培养箱、电子天平、高压灭菌 4.1 锅等
4.2用具;培养皿、烧杯、白瓷盘、尖头锻子、载玻片、盖玻片、量筒、酒精灯等
4.3试剂.PDA培养基(可选用市售PDA培养基)、次氯酸钠,无水乙醇等
现场检疫 抽样 5.1.1抽样方法 以批号为抽样单位,无批号的以品种为抽样单位随机抽取
每份样品的抽样点不少于5个(对于散 装的马铃薯,应在表层以下0.3m取样更为适宜)
单位包装只能有一个抽样点
5.1.2抽样数量 500粒以下取1份;501粒一2000粒取2份;2001粒5000粒取3份;5001粒一10000粒取 4份;10001粒以上,每增加10000粒增取】份,不足10000粒的余量,计取1】份
每份样品20粒块茎
GB/28093一2011 2 5. 现场查验 按进出境马铃薯种薯总件数的5%一20%随机抽检,最低抽检数量不少于10件，且不少于 1000粒
现场检查马铃薯块茎是否有马铃薯银屑病菌侵染后的典型症状(见7.1)
将现场查验发现的有马 铃薯银屑病菌的典型症状块茎用塑料袋装好,连同现场抽取的样品分别加贴标识后送实验室进行进一 步的分离和病原鉴定,并做好现场查验记录
实验室检验 马铃薯块茎症状检验 将现场抽取的马铃薯块茎样品混匀,从中随机抽取100个块茎进行检查
检查是否有马铃薯银屑 病菌侵染的症状,如果发现可疑症状连同现场查验的可疑块茎按6.2和6.3进行分离培养
6.2马铃薯块茎保湿培养 取25个50个典型症状的块茎样品,先用自来水冲洗,再用灭菌水冲洗后放人装有湿纸巾的塑料 袋中,封口后,在塑料袋上打几个0.16cm直径的小孔,在黑暗中保持在22C士2C,培养2周一3周 周期性地湿润纸巾,避免马铃薯块茎干燥
PDA培养 在马铃薯块茎表面的病斑处,切取7mm直径的小块,用1.0%次氯酸钠消毒30s,用灭菌的蒸僧水 冲洗两次,灭菌滤纸吸干水分,放置在PDA培养基(见附录A)上,在22C士2C条件下培养2周~ 3周
鉴定特征 7.1马铃薯块茎症状特征 7.1.1块茎上病斑症状 马铃薯银屑病菌主要侵染马铃薯块茎,在马铃薯周皮上形成圆形的病斑,病斑褐色至灰色
病斑深 度多局限在周皮,不扩展到块茎内部,病斑最终表现为银色(参见图B.1、图B.2)
在储藏期,被侵染的 薯块表皮最终表现为皱缩的特征,由于受伤表皮过度水分蒸发,使病斑最终表现为褐色,部分周皮可能 脱落
7.1.2块茎上病原菌特征 病斑上子实体(分生袍子梗和分生袍子)多发生在病斑的边缘,新侵染的病斑更为明显,可见黑色的 霉层(分生袍子)
在病斑上并不总产生分生抱子,这主要取决于湿度条件
保湿培养后病原菌特征 7.2 马铃薯银屑病菌产生透明的菌丝,菌丝分隔并分枝;分生袍子无分枝,具分隔
分生袍子轮生在分 生弛子梗末梢,状似“圣诞树"(参见图B.3)
分生袍子梗直立,两壁平行生长
分生抱子宽(7Am 8 64 Am、长184m Am
分生弛子最多8个分隔、暗褐色,基部圆、尾端细(参见图B.4).
GB/T28093一2011 DA培养病原菌特征 分离物在PDA培养基上形成暗褐色至黑色菌落,浅棕色的分生袍子群分布在培养基表面
菌丝 在PDA上的生长速度为1.15mm/d1.78mm/d
20下光照培养比黑暗培养的生长速度快
分生 袍子梗随培养时间的增加,颜色从浅灰色变为褐色,无分枝，1根6根丛状生长,基部球形,7个19个 一10.0pm)
分生抱子近无色至褐色,单个或成簇地自分生抱子 隔膜,(150Am550m)×(7.01 4m 梗基端往上呈轮状排列,直或稍弯,顶端渐尖,略呈锥形,3个~8个隔膜,(20m~80m)×(7.5m~ 0Am),与自然薯块上产生的分生抱子大小基本相同 结果判断 马铃薯块茎症状符合7.1,且经保煤培养和DA培养后,符合7.2,7.3的鉴定特征可以判断为马 铃薯银屑病菌
样品、菌种保藏 分离并鉴定为马铃薯银屑病菌的菌株要转移到斜面培养基上,于4C冰箱中保存至少6个月
带 有马铃薯银屑病菌的块茎也于4C冰箱中保存,其时间视薯块的情况,尽量保存
以备复检,谈判和仲 裁,保存期满后进行灭活处理
GB/28093一2011 附 录A 规范性附录 PDA培养基的制作方法 PDA培养基的制作(或选用市售PDA):马铃薯200g.葡萄糖20g琼脂20g
马铃薯切块煮沸 10min,纱布过滤,加人葡萄糖,琼脂,加水定容至1000ml,121C,高压灭菌20nmin,分装备用
GB/T28093一2011 附 录 B 资料性附录 马铃薯银屑病菌症状及形态特征 图B.1马铃薯银屑病菌在马铃薯块茎上的症状 图B.2马铃薯银屑病菌在块茎上发展以后形成的圆形、从褐色到暗灰色的病斑,最后发展为银灰色
GB/28093一2011 图B.3马铃薯银屑病菌保湿培养的微型“圣诞树”一样的分生抱子梗及分生抱子 图B.4马铃薯银屑病的分生抱子
马铃薯银屑病菌检疫鉴定方法GB/T28093-2011
马铃薯银屑病是由真菌引起的一种传染性病害，能够造成严重的经济损失。为了及时控制和防止该病的出现和扩散，需要对马铃薯进行检疫和鉴定。GB/T28093-2011规定了一种有效的检疫鉴定方法。
首先，对于检疫样品的采集，需要选择健康、有代表性的马铃薯植株进行采样。采样时要注意避开受病害侵染的部位，如病斑、黄化区等。同时，采样工具也应该对样品不产生伤害。采样完成后，将样品放入密闭袋中，标注好相应信息。
其次，检疫鉴定的样品处理需要严格按照规定进行。通常情况下，首先需要对样品进行表面消毒处理。消毒方法可以选择70%乙醇、0.1%次高氯酸钠等。接着，需要对样品进行分离培养，得到纯种菌株。这个过程中，需要注意对环境和工具的消毒，以防止污染。
最后，通过形态学观察和生理生化特性检测等方法，对分离出来的病原菌进行鉴定。例如，可以观察病原菌的菌丝、孢子、分生孢子等形态特征，以及它们在不同培养基上的生长特性、色素产生等生理生化特性。
总之，GB/T28093-2011规定的马铃薯银屑病菌检疫鉴定方法是一种科学、规范的方法。通过该方法，可以有效地保证马铃薯生产的质量和安全。希望广大农业从业者能够关注并积极应用这项技术。
