GB/T29587-2013
松疱锈病菌检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofCronartiumribicolaJ.C.Fisch.
- 中国标准分类号（CCS）B16
- 国际标准分类号（ICS）65.020.01
- 实施日期2013-12-06
- 文件格式PDF
- 文本页数9页
- 文件大小2.42M
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松疱锈病菌检疫鉴定方法
国家标准 GB/T29587一2013 松疤锈病菌检疫鉴定方法 DeteetionandidentifieationofCronartiumribicolaJ.CFiseh. 2013-07-19发布 2013-12-06实施 国家质量监督检监检疫总局 发布 国家标准花管理委员会国家标准
GB/T29587一2013 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口
本标淮起草单位北京出人境检验检疫局,四川省森林病虫防治检疫总站、北京林 业大学、天津出人境检验检疫局、深圳出人境检验检疫局、中华人民共 和国山东出人境检验检疫局、云南出人境检验检疫局
本标准主要起草人高文娜、杨佐忠、贺伟韩晶、昌玉峰,汪万春、周琦、廖芳、邓丛良、江丽辉,边勇、 梁新苗、,李建光,颖慧.王霸,吴兴海、丁元明、李处
GB/T29587一2013 松瘪锈病菌检疫鉴定方法 范围 本标准规定了松抱锈病菌(CroartiumribicolaJ.c.Fisch.)的检疫鉴定以病原菌的形态特征及在 寄主植物上的症状作为依据,明确了现场检疫、病原菌分离、镜检鉴定、样品保存的方法
本标准适用于松属Pinusspp.的单维管束松亚属寄主植物中松疮锈病菌的检疫鉴定
规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 sN/T1126进出境木材检疫规程 sN/T1157进出境植物苗木检疫规程 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件
单维管束松亚属Suhgen.Srobus 针叶基部的叶鞘早落,鳞叶不延下生长.针叶内具一条维管束,木材材性较软,结构均匀,强度较小 早材带至晚材带渐变,木射线管胞内壁上无锯齿,晚材细胞切向壁上具缘纹孔显著,木射线绸胞水平壁 纹孔明显、端壁常具节状加厚
双维管束松亚属Subgen.Pinus 针叶基部的叶鞘宿存,鳞叶下延生长,针叶内具两条维管束,球果种鳞的鳞脉均生于鳞盾的中央,木 材材性较硬,结构不均匀,强度较大,松脂较多,早材带至晚材带通常急变,木射线管胞内壁上具有深或 浅的锯齿,晚材管胞切向壁上具缘纹孔或有或无,木射线细胞水平壁纹孔缺如或稀少
松瘪锈病菌基本信息 中文名:松瘤锈病菌,又称白松疤锈病菌,茶煎生柱锈菌 学名:Cronar ribicolaJ.CFisch.1872 li1" niumstrobeKleb
异名;Perider" 病害中文名:松庖锈病,又称白松庖锈病、五针松庖锈病、华山松庖锈病、红松庖锈病
.white blisterrust、 病害英文名;soft-pinestemblis whitepine.stemrust,.korean-pine sterrust、" te-pIne stemrust 属于担子菌亚门Basidiomycot ina、 冬袍菌纲Teliomyeetes,锈菌目Uredinales、栅锈菌科Melamp soraceae，、 柱锈菌属C'ron nartinn
该病原菌主要通过苗木引种栽植、带皮原木贸易运输进行远距离传播和蔓延
GB/T29587一2013 松疤锈病菌的其他信息参见附录A
5 方法原理 观察松瘪锈病菌在寄主植物上的症状,显微观察病原菌的形态特征,进行检测鉴定
器材和试剂 器材 生物数码显微镜(带数码成像系统)、目(物)镜测微尺、试剂瓶、刀片,毁子、洗瓶、量筒、量杯、载玻 片、盖玻片,放大镜、枝勇、手套、木工斧(电锯),照相机样品袋、标签、采样凭证等 6.2试剂 蒸僧水、中性树胶等
检测 7.1取样 在检疫过程中,根据不同样品类型,分别按照sN/T1157或sN/T1126中的方法进行
7.2松属寄主症状检查 重点检查松属植株枝干部是否有流脂、皮层肿大、破裂并从裂缝中生出黄白色至橘黄色的锈抱子器 瘤囊)或散发出大量锈黄色的锈抱子;感病枝、干皮层可见初期呈白色后变橘黄色泪滴状“蜜滴”即性 抱子液),“蜜滴”消失后皮下可见“血迹”状斑(参见附录A、附录B)
挑取观察到可疑症状的样品,送实 验室作进一步检验鉴定
鉴定 对于有可疑症状的样品,在有症状部位挑取袍子在显微镜下观察测量,并记录特征数据
病原菌跑子形态鉴定特征 9 性袍子器和性抱子 性袍子器黄白色或橘黄色,平展于松树皮层中
性袍子无色,鸭梨形,单细胞,大小为(2.4Am~ 4.5Am)×(1.84m~2.5m)
9.2锈袍子器和锈跑子 锈袍子器由无色梭形细胞组成的庖囊状或圆柱状包膜所包裹,初期为黄白色后变为橘黄色.生于 一40.0mm
单个锈抱子锈黄 枝干皮层外,高4.0m- n,短径3.口m一5.0mm,长径4.0m 6.0mm 色,成堆时为橘黄色,球形或卵圆形,大小为(22.81 m33.6m)×(14.4 一28.84m),表面生柱状 Am 疣突,疣上有5层一7层环纹,并有一与疣突顶部共处同一球面的平滑区
GB/T29587一2013 10 结果判定 如果松树寄主症状检查结果符合7.2的描述,病原菌抱子形态观察结果符合9.1,9.2的鉴定特征、 且符合柱锈属C" ronartiun 分种检索表(参见附录C)对茶熊生柱锈菌的描述,可判定检测样品携带松庖 锈病菌Cronartiumribicola;反之,则非松庖锈病菌
11 样品保存与结果记录 保存样品经登记和经手人签字后妥善保存
对检出松瘤锈病菌的样品应制备永久玻片并干燥后保 存,以备复核,该类样品保存期满后,需销毁处理
试验记录应包括;样品来源,种类,时间;检验试验的时间,地点,方法和结果;经手人,试验人员和审 核人员的签字;寄主的症状照片等
上述资料应归档并妥善保存
GB/T29587一2013 附 录A 资料性附录 松瘪锈病菌的其他信息 A.1形态特征 性抱子器于秋季(8月9月)生于枝干皮层,成泪滴状,宣黄色,口感有甜味而有“蜜滴”之称
初 期为白色,2d3d后渐变成黄色或黄褐色,6d8d后干枯,留下“血迹”状斑点
3月5月后在上一 年产生“蜜滴”的松树病部产生具庖膜的黄色囊状锈袍子器,内含大量锈袍子,以后多年可持续产生锈袍 子器
瘤囊成熟后呈橘黄色,破裂,散出粉状锈袍子,最后留下膜状白色包被,并逐渐散落消失
A.2寄主范围 病原菌的性袍子和锈袍子阶段寄主有红松Pinuskoraiensis、华山松P.armandi,西伯利亚红松 P.sibiria、偃松P
pumt nila、台湾五针松户 ，morrisonicola、乔松Pgrifihii、海南五针松P cembra.,北美乔松P..strobus、山白松P fenzeliana,瑞土石松P.
monticola,美国白皮松P.abicaulis、 巴尔夫民松尸.halowriwna,柔松尸.Aerili.墨西哥白松尸.aywahwile,恰帕松尸.chiapeni和糖松 P.lambertiana 等松属中单维松树
A.3对寄主的危害情况 病害发生在单维松枝干皮部,不危害木质部
该病先在侧枝基部发病,然后向干皮扩展,有时枝干 同时发病
发病部位常在地上150cm以内的枝干上 A.4地理分布 日本、韩国、朝鲜,菲律宾,巴基斯坦、尼泊尔.伊朗、印度比利时,芬兰,俄罗斯,前南斯拉夫,瑞士 瑞典、西班牙,罗马尼亚、,波兰,挪威、荷兰、意大利,爱尔兰、匈牙利,德国,法国,丹麦,斯洛伐克、捷克、英 国、奥地利、美国、加拿大、(辽宁省、,四川省、云南省和陕西部分地区)
A.5生物学特性 锈袍子萌发的最适温度为19C一21C,最适湿度为90%以上,在散射光下萌发最好,黑暗条件次 之,直射光下最差
在0.5%琼脂膜上萌发最好
锈袍子具1一4(6)个芽孔,但只有其中之一为优势生 长,先端可有分支
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GB/T29587一2013 附 录c 资料性附录 柱锈属Cronariwm分种检索表 单维管束松亚属寄生 双维管束松亚属寄生 单叶松和食用松寄生 西方柱锈菌C.oceidentale 2 五针松寄生 茶蔗生柱锈菌C.ribicola 生枝干上 3 生球果上 病部皮层坏死形成溃疡 病部皮层不坏死,木质部增生形成木质癣瘤 锈袍子表面无光滑区 锈抱子表面有光滑区 锈袍子梨形至棒形 云 ;兰柱锈菌C.comandraG 锈袍子长椭圆形 阿巴拉契亚柱锈菌C.appalachianum 病部木质部增生形成纵向隆起带 香蕨柱锈菌C .cobtoniae 病部皮层增生略肥大呈长梭形 锈袍子表面有明显的光滑区;分布北美洲 类鞘弛柱锈菌C. coleoboioidle 锈袍子表面有近似的光滑区;分布欧洲和亚洲 柔软柱锈菌C flaccidn 亵瘤球形,半球形 栎柱锈菌C.qguercuun 栎柱锈菌梭型专化型C.guerceuwm.spJhaiforme 瘤梭形 10
锈抱子器半埋于寄主组织中;分布美国东南部 球果柱锈菌C.strobilianum 锈袍子器完全突出寄主表面;也可危害小枝形成髓质瘤;分布美国南部至中美洲 椎型柱锈菌C.conigenun
松疱锈病菌检疫鉴定方法GB/T29587-2013
松疱锈病是由松疱锈菌引起的松树病害，主要发生在松树嫩枝、叶片和针叶上，寄主广泛。松疱锈病的危害比较大，能够导致松树的叶片黄化、干枯、落叶等现象，最终影响松树的正常生长和发育。
为了防止松疱锈病的传播，在国内制定了相应的检疫标准，即《松疱锈病菌检疫鉴定方法GB/T29587-2013》。该标准规定了松疱锈病菌的检疫鉴定方法，主要包括实验室检测和野外观察两种方法：
实验室检测
- 样本选择：根据实际情况，选择松树嫩枝、叶片或针叶作为样品。
- 制备样品：将样品切成小块，然后用10%的氢氧化钠（NaOH）液浸泡2-5分钟，再用去离子水洗三次，去除表面细菌等污染物。
- 提取DNA：采用基因组DNA纯化试剂盒，按照说明书操作，提取松疱锈病菌的DNA。
- PCR扩增：将提取的DNA加入PCR反应管中，进行PCR扩增。PCR反应条件和程序需要根据实验室设备的不同进行调整。PCR扩增结束后，可以通过琼脂糖凝胶电泳等方法进行验证。
野外观察
- 观察对象：对松树嫩枝、叶片或针叶进行观察。
- 观察标志：根据松疱锈菌寄生的不同部位，观察其产生的不同症状。
- 观察时间：在松树生长季节，随时进行观察。如果发现异常情况，需要及时上报有关部门。
通过以上两种方法可以对松疱锈病菌进行准确鉴定，从而采取相应的措施，做好病害防治工作。
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