GB/T40223-2021
植物代谢产物游离棉酚测定酶联免疫吸附法
Determinationoffreegossypolofplantmetabolites—Enzyme-linkedimmunosorbentassay
- 中国标准分类号（CCS）A40
- 国际标准分类号（ICS）07.080
- 实施日期2021-12-01
- 文件格式PDF
- 文本页数6页
- 文件大小456.24KB
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植物代谢产物游离棉酚测定酶联免疫吸附法
国家标准 GB/T40223一2021 植物代谢产物游离棉酚测定 酶联免疫吸附法 Determinationoffreegsyplfplant nmetaboiteS Enzyme-linkedlimmnosorbenassay 2021-05-21发布 2021-12-01实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标涯花管理委员会国家标准
GB/T40223一2021 前 言 本文件按照GB/T1.1一2020<标准化工作导则第1部分;标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草
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本文件由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC387)提出并归口
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本文件主要起草人:郭玲玲、马爱进,郝帅、徐丽广、孙茂忠,宋珊珊
GB/T40223一2021 植物代谢产物游离棉酚测定 酶联免疫吸附法 范围 本文件规定了植物代谢产物游离棉酚的酶联免疫吸附测定方法
本文件适用于棉粕及发酵饲料中游离棉酚的测定
规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款
其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义
原理 样品经处理后,样液中的游离棉酚、微孔板上固定的棉酚抗原与加人的棉酚抗体竟争结合,洗板除 去未结合的其他成分,再与辣根过氧化物酶标抗体结合,加酶标底物显色,用酶标仪在450nm波长下 测定吸光度值,计算游离棉酚的含量
S 试剂和材料 除非另有规定,本文件所用化学试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水
5.1游离棉酚的检测试剂盒;参见附录A
5.2棉酚;纯度>95%.CAs号为652-78-8. 5.3应按照试剂盒说明书配制所需溶液
6 仪器设备 6.1小型粉碎机
6.2分样筛;孔径0.9mm. 6.3匀浆机
6.4涡旋混合器
6.5电子天平;感量0.01g 6.6具塞离心管:15ml
GB/T40223一202 6.7 微孔板酶标仪;带450nm滤光片
6.8试剂盒所要求的仪器
样品的制备及保存 7.1样品制备 称取100g样品,用小型粉碎机进行粉碎,粉碎后的样本过孔径0.9mm分样筛
装人清洁密封容 器,并加以标识,待测
7.2样品保存 取样后应立即试验,如不能及时试验,应在一18C冰箱中冻存,且不超过2周
8 试验步骤 8.1样本前处理 称取1.00g过筛的样品,置于15ml具塞离心管中,加人试剂盒所要求提取液,按照试剂盒说明书 所述方法进行稀释和检测
8.2测定 按照酶联免疫试剂盒所述操作步骤对待测试样(液)进行定量检测
8.3平行试验 按以上步骤,对同一标准溶液、,同一样品溶液均应进行平行试验测定 8.4空白试验 除不称取试样外,均按上述步骤进行
8.5阳性质控 根据待测样本中游离棉酚的含量,选择一个合适的质控标准,以确定试验过程的操作准确性
试验数据处理 O g.1酶联免疫试剂盒定量检测的标准工作曲线绘制 按照试剂盒说明书提供的计算方法或者计算机软件,根据标准品质量浓度与吸光度变化关系绘制 标准工作曲线
9.2待测液质量浓度计算 按照试剂盒说明书提供的计算方法以及计算机软件,将待测液吸光度代人9.1所获得标准工作曲 线,计算待测液质量浓度(p)
g.3结果计算 样品中游离棉酚的含量按式(1)计算
GB/T40223一2021 "xYxax1o X =9 XI0wo 式中: 样品中游离棉酚的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); 从标准工作曲线上得到的样品中游离棉酚质量浓度,单位为微克每毫升(4g/mL); p -样本提取液体积,单位为毫升mlL); 在前处理过程中的稀释倍数; 试样的称样量,单位为克(g). m 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,保留3位有效数字
10精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%
1 准确度 本方法供酶联免疫试剂盒测试的游离棉酚溶液加标浓度为54g/mL时,平均回收率为77.3% 1.6%;当供酶联免疫试剂盒测试的游离棉酚溶液加标浓度为10g/mL时,平均回收率为80.1% 110.5%;当供酶联免疫试剂盒测试的游离棉酚溶液加标浓度为504g/mL时,平均回收率为86.4% 105,4%
12 其他 当称样量为1.00g时,游离棉酚的检出限为2mg/kg,定量限为3mg/kg
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植物代谢产物游离棉酚测定酶联免疫吸附法GB/T40223-2021解读
随着国家对农产品安全的高度重视和监管加强，植物代谢产物游离棉酚的检测成为了近年来越来越受关注的问题。而酶联免疫吸附法作为一种常用的检测手段，也得到了广泛应用。为此，国家标准化管理委员会于2021年5月发布了GB/T40223-2021标准，规范了植物代谢产物游离棉酚测定酶联免疫吸附法的方法和要求。
植物代谢产物游离棉酚的检测
游离棉酚是植物代谢产物的一种，广泛存在于水果、蔬菜、茶叶等植物食品中。它具有很强的抗氧化和生物活性，对人体健康有着很多益处。但是，在植物生长、储存、加工等过程中，游离棉酚也容易受到各种因素的影响而发生变化，甚至会产生毒性物质。因此，对植物食品中游离棉酚的定量检测非常重要。
酶联免疫吸附法原理
酶联免疫吸附法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）是一种利用酶与抗体或抗原结合反应进行检测的方法。该方法具有灵敏度高、特异性好、操作简便、成本低廉等优点。
在植物代谢产物游离棉酚的检测中，一般采用间接竞争ELISA法。即将标准物和待测样品分别添加到预先涂有抗游离棉酚单克隆抗体的微孔板上，两者竞争与单克隆抗体结合，之后再加入辣根过氧化物酶标记的游离棉酚抗原进行反应。最终，通过比较标准曲线和待测样品的吸光度值，可以计算出待测样品中游离棉酚的含量。
GB/T40223-2021标准内容
GB/T40223-2021标准主要规定了植物代谢产物游离棉酚测定酶联免疫吸附法的方法和要求。其中包括了试剂、设备、样品处理、检测步骤等方面的具体要求。此外，标准还明示了检测结果的计算、不确定度的评估以及质量控制等细节内容。
结论
GB/T40223-2021标准对于植物代谢产物游离棉酚测定酶联免疫吸附法提供了全面而详细的规范，为保障食品安全提供了有力的技术支持。同时，酶联免疫吸附法作为一种高效、便捷的检测方法，在植物代谢产物的分析检测中具有广泛的应用前景。
