GB/T34918-2017
化妆品中七种性激素的测定超高效液相色谱-串联质谱法
Determinationof7sexualhormonesincosmetics—Ultrahighperformanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry
- 中国标准分类号（CCS）Y42
- 国际标准分类号（ICS）71.100.70
- 实施日期2018-05-01
- 文件格式PDF
- 文本页数11页
- 文件大小886.12KB
以图片形式预览化妆品中七种性激素的测定超高效液相色谱-串联质谱法
化妆品中七种性激素的测定超高效液相色谱-串联质谱法
国家标准 GB/T34918一2017 化妆品中七种性激素的测定 超高效液相色谱-串联质谱法 Determinationof7sexualhoronesincosmetics一 Ultrahmighperformanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry 2017-11-01发布 2018-05-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/34918一2017 化妆品中七种性激素的测定 超高效液相色谱-串联质谱法 警示- -使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验
本标准的使用可能涉及到某些有危 险的材料,设备和操作,本标准并未指出所有可能的安全问题
使用者有责任采取适当的安全和健康措 施,并保证符合国家有关法规规定的条件
范围 本标准规定了超高效液相色谱-串联质谱法测定水状、乳状、膏状、面膜、粉状等化妆品中七种性激 素(雌三醇、雌二醇、雌酮、己烯雌酚、睾酮、甲基睾酮、黄体酮)的原理、试剂、仪器设备、样品处理、测定、 试验数据处理和实验报告等
本标准适用于水状、乳状、膏状,面膜、粉状等化妆品中七种性激素的检测
规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 原理 用甲醇十乙晴(1十1,体积比)混合溶剂漩涡提取化妆品中的性激素,离心过滤后,加人氢氧化钠溶 液进行皂化反应,调节pH至6.5~7.5,经固相萃取小柱净化用反相超高效液相色谱-串联质谱法测定 内标法定量 试剂或材料 除非另有规定,仅使用分析纯试剂
4.1GB/T6682规定的一级水
4.2甲醇;色谱纯
4.3乙睛;色谱纯
4.4乙酸铵
4.5氢氧化钠
4.6浓盐酸
4.7甲醇十乙睛(1+1,体积比);分别量取500ml
甲醉(4.2)和500mL乙晴(4.3)充分混匀后制得 4.8乙酸铵溶液(0.5mmol/L):称取38.5mg乙酸铵(4.4),用水(4.1)溶解定容至1L
4.9氢氧化钠溶液(20g/L)称取20.0g氢氧化钠(4.5),用水(4.1)溶解定容至1L
4.10盐酸溶液(10mol/L);量取833mL的浓盐酸(4.6),用水(4.1)溶解定容至1L 4.11盐酸溶液(1mol/L);量取100mL的10mol/L盐酸溶液(4.10),用水(4.1)溶解定容至1L
GB/T34918一2017 4.12盐酸溶液(0.1mol/L);量取100ml的1mol/L盐酸溶液(4.1l),用水(4.1)溶解定容至1L 4.1310%乙晴水溶液体积比);量取100mL乙脖(4.3)和900ml.水(4.1)充分混匀后制得
4.14纤维素滤纸
4.15pH试纸;范围5.59.0. 4.16HLB固相萃取小柱或相当者:150mg
样品过滤器;有机膜,孔径0.22 4.17 m
4.18标准品和同位素内标;雌三醇、雌二醇、雌酮、己烯雌酚、睾酮、甲基睾酮、黄体酮为标准品,雌三醉 D2、甲基睾酮D3为同位索内标,纯度不小于99.0%
7种标准品和2种同位素内标的英文名称.,cAs 登录号、分子式、化学结构图参见附录A
4.19内标储备液(1004g/mL);准确称取同位素内标(4.18)各10.0mg,用甲醇(4.2)分别溶解定容至 00.0mL,于(一4士1)C下密封保存,可在一年内稳定
4.20标准储备液(1nmg/mL):准确称取标准品(4.18)各10.0mg用甲醇(4.2)分别溶解定容至 0.0mL，于(一4士1)C下密封保存,可在一年内稳定
421混合内标使用液(1g/ml)准确量取内标储备液(4.19)各1.00ml,用甲醉(4.2)定容于 00.0ml，于(一4士1)C下密封保存
4.22标准混合工作溶液;根据需要,用甲醇稀释,将各标准储备液(4.20)配制成0.0254g/mL 0.0501 4g/ml、0.204/'mL,0.0"g/mL.,0.80g/l系列浓度的标准曲线游液后,各取1.00l置于 进样瓶中,并加人50AL混合内标使用液(4.21),制得标准混合工作溶液,标准混合工作溶液中各浓度 梯度含各同位素内标0.05"g
仪器设备 5 5.1超高效液相色谱-串联质谱联用仪(配EsI源)
5.2分析天平;精度0.1mg
5.3涡旋混合器
5.4离心机:转速10000r/min;容量10mL50ml
5.5固相萃取装置
6 样品准备 6.1提取 称取0.2g样品(精确至0.001g)于15ml.具塞离心管中,准确加人2mL甲醉+乙睛(1+1,体积 比)(4.7),涡旋震荡使样品溶液达到均质状态,10000r/min离心10min,吸取上层清液至另一50ml 具塞离心管中,下层样品用2mL甲醇十乙睛(1十1,体积比)(4.7)重复提取一次 合并两次提取液后 加人35ml氢氧化的游液(30gL)(4.9),混匀.10o0r/mim离心10mim后,经纤推素谴纸(4.l)过滤 后,分别加人10mol/儿盐酸溶液(4.10),lnmol/儿盐酸溶液(4.11)和0.1mol/儿盐酸溶液(4.12),调节清 液pH值至6.5一7.5之间,待固相萃取小柱净化
6.2净化 HLB固相萃取小柱(4.16)接上固相萃取装置(5.5),小柱分别用5mL甲醇(4.2)、,10mL水(4.1)进 行活化
将待净化的样品溶液倒人小柱中,待样品溶液完全流出后,加人10ml10%乙睛水溶液 4.13清洗小柱,弃去全部淋出液
在负压下,减压抽干1min,最后用5mL甲醉(4.2)洗脱,收集样品 洗脱液于15ml离心管中,转移样品洗脱液至5mL.具塞比色管,用甲醇(4.2)定容至刻度液
经样品
GB/34918一2017 过滤器(4.17)过滤后,取1.00mL的样品溶液置于进样瓶中,并加人50L混合内标使用液(4.21),待 仪器测定
测定 7.1液相色谱/串联质谱参考条件 使用的仪器不同,最佳分析条件也可能不同,因此不可能给出仪器分析的通用色谱和质谱条件参 数
设定的参数应保证被测组分得到有效分离和测定,下面给出的色谱和质谐条件参数经证明是可 行的
色谱柱C
柱,100mm×2.1mm(内径),l.8Mm,或相当者; a b 柱温:35C; 液相色谱流动相及参考分离条件见表1 c d 进样体积;5L; e 电离方式;电喷雾电离,雌三醉,雌二醇,雌酮,已烯雌酚采用ESI(一),睾酮、甲基睾酮,黄体啊 采用ESsI(); f 正负离子喷雾电压:4.0kV; 雾化气;氮气,40psi h) 干燥气;氮气,流速:10L/min,温度;300C; 碰撞气:复气; 检测方式;多反应监测MRM); k)7种性激素药物和2种同位素内标的质谱测定参数见表2
液相色谱流动相及参考分离条件 表1 时间 流速 流动相A 流动相B min ml/min 水.0.5mmol/1乙酸锁 [甲醉+乙睛(1+1,体积比 40 60 0.3 4.5 0.3 5 95 7.0 0.3 95 60 40 8.,0 0,3 60 10.0 0.3 40 表27种性激素药物和2种同位素内标的质谱测定参数 出峰时间 定量离子对(m/e)碰撞能量碎裂电压 定性离子对(m/: 序号 药物名称 电离方式 eV min 母离子/子离子 母离子/子离子 287.1/257.2 13 16o 雌三醇 1.82 ESI(一) 287.1/171.0 35 287.1/171.0 160 35 271.1/183.0 160 雌二醉 3.07 ESI(一 271.1/183,0 271.1/145,1 35 16o 40 269,1/159,0 190 雌酣 3.26 ESI( 269.1/145.l 35 269.1/145.1 190
GB/T34918一2017 表2(续 出峰时间 定性离子对(m/ 定量离子对(m" 碰撞能量醉裂电压 72 1/您 序号 药物名称 电离方式 母离子/子离子) 母离子/子离子) min eV 20 267.1/251.1 170 己婚雕前 3.53 ESI(一 267.1/251.l 267.1/236.9 23 170 26 289,2/109.1 150 3,.33 ESI(十 289.2/97.0 睾厨 25 289.2/97.0 150 303.5/108.9 50 30 甲基睾酮 3.53 ESI(十 303.5/97.1 28 303.5/97.1 150 315.5/109.0 150 2 4.07 黄体啊 ESI(+ 315.5/109.0 25 315.5/97.1 150 雌三醉D2 1.82 ESI(一 289,1/172,7 289.1/172.7 35 150 25 甲基睾酮D3 3,.53 ESI( 306,2/96.9 306.2/96.9 130 7.2定性分析 在相同仪器分析条件下测定标准溶液和样品溶液,若样品溶液中检出的色谱峰保留时间与标准溶 液中的某种组分峰的保留时间一致,并且在扣除背景后的样品质谱图中,所选择的离子均出现,且所选 择的定性离子相对丰度与浓度相当标准工作溶液的定性离子的相对丰度进行比较时,偏差不超过规定 允许范围见表3),则可判定样品中存在该组分 表3定性确定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% 2050 1020 10 50 士20 士25 士30 士50 允许的相对偏差/% 7.3定量分析 本标准采用内标法定量
每次测定前配制标准浓度系列(4.22),按浓度由小到大依次测定,记录定量选择离子积分峰面积 以目标物与内标物质的浓度比为横坐标,目标物与内标物质的峰面积比为纵坐标,绘制标准曲线并计算 回归方程,其线性相关系数应大于0.99
标准品及同位素内标的超高效液相色谱-串联质谱多反应监测 MRM)色谱谐图参见附录B
单个物质的方法定量下限均为0.625mg/kg 8 试验数据处理 在相同仪器分析条件下测定样品溶液,选择目标离子进行定量,并根据标准曲线以内标法定量,按 式(1)计算含量
CX X，一 1
GB/34918一2017 式中 X 样品中某种组分含量,单位为毫克每千克(mg/kg); 由标准曲线得出待测样品溶液中某种组分的浓度,单位为微克每毫升4g/mL); 定容体积,单位为毫升(mL); 稀释倍数， 样品质量,单位为克(g) m 测定结果以各性激素的含量分别表示,取两次平行测定结果的算术平均值,保留三位有效数字
允许差 9 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%
10 试验报告 试验报告至少应给出以下内容 试样描述; a b 使用的标准(包括发布或出版年号 试验结果 d 与规定的分析步骤的差异; 在试验中观察到的异常现象 e 试验日期
fD
GB/T34918一2017 附 录 A 资料性附录) 7种性激素的中文名称,英文名称,CAs登录号、分子式、化学结构图及对应同位素内标 7种性激素的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式化学结构图及对应同位索内标见表A.1
表A.17种性激素的中文名称英文名称.CAs登录号、分子式、化学结构图及对应同位素内标 序 对应同位 中文名称 英文名称 cAs登录号 分子式 化学结构图 素内标 OH OH 雌三醇 Estriol 50-27-1 CHO 雌三醇D2 HO OH 雌二醉 Estradiol 50-28-2 CHO 雌三醇D2 H Ho 雕削 Estrone 53-16-7 CHO. 雕三醇D2 HO Diethylstilbestrol 6898-97-1 CHO -OH 雕三醇D2 己烯雕前 Ho OH 睾啊 Testosterone 58-22-0 CHO 甲基睾啊; H
GB/34918一2017 表A.1(续》 对应同位 中文名称 英文名称 CAs登录号 化学结构图 分子式 素内标 OH l 甲基睾酮 Methyltestosterone 58-18-4 CaHO. 甲基睾酮D3 黄体 甲基睾酬3 57-83-0 Progesterone CaH0. OH OH 雌三醇D2 Estriol-D2 53866-32-3CHD.o. O Ho 1D 甲基睾酮D3Methyltestosterone-D396425-03-5CaHD.O.
GB/T34918一2017 附录 B 资料性附录) 7种性激素标准品及2种同位素内标的提取离子色谱图 图B.1为7种性激素标准品及2种同位索内标物的提取离子色谐图
2000 3000 雌三醉 2500 500 雌二醉 000 台2 羊 000 500 000 500 500 0 1/min /min 40000- 118000 000 雌N 己婚雌阶 00 30000 2000 O0 草如a 盖 " 000 0 00o0 10000 000 /min /min 10000 10000 甲基睾削 皋刚 8000 8000 6000 6000 4000 4000 2000 200o 1/min /min 300 14000 黄体刚 12000 250 雌三醉D2 10000 8000 200 6000 150- 4000 2000 100 50 min /min 图B.17种性激素标准品及2种同位素内标的提取离子色谱图
GB/34918一2017 180o 600 甲基率醉D3 400 200 000 影 80 min 图B.1(续
化妆品中七种性激素的测定超高效液相色谱-串联质谱法GB/T34918-2017
化妆品是我们日常生活中必不可少的物品，但其中可能含有一些对人体健康有潜在危害的物质，例如性激素。化妆品中的性激素会影响人体内分泌系统的正常功能，长期使用可能导致各种疾病的发生。
为了保障消费者的健康，国家制定了GB/T34918-2017标准，规定了化妆品中性激素的测定方法和限量要求。其中包括了七种重要的性激素：雌二醇、孕激素、睾酮、雌甾醇、黄体酮、雄烯二酮和雌酮。
超高效液相色谱-串联质谱法是一种新型的化妆品检测方法，它能够快速、准确地测定化妆品中的七种性激素。该方法采用超高效液相色谱技术进行样品分离，再结合串联质谱技术进行定量分析。相比传统的气相色谱-质谱法，这种方法具有更高的灵敏度和更快的分离速度。
使用超高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中的性激素时，我们需要进行样品制备、液相色谱分离和串联质谱定量三个步骤。具体步骤如下：
- 样品制备：将待测试的化妆品样品加入稳定同位素内标溶液和甲醇，振荡混匀后离心沉淀。
- 液相色谱分离：将样品经过柱前萃取、固相萃取等步骤处理后进行液相色谱分离。
- 串联质谱定量：通过多反应监测模式定量分析七种性激素。
在测定化妆品中的性激素时，我们还需要关注限量要求。根据GB/T34918-2017标准，化妆品中每种性激素的限量均为10μg/kg。因此，在实际检测过程中，我们需要采用合适的样品制备方法和精确的质量控制，以确保测试结果的可靠性。
总的来说，超高效液相色谱-串联质谱法是一种快速、准确、可靠的化妆品检测方法，可以有效地保障消费者的健康。在今后的工作中，我们应该进一步完善该方法，提高检测效率和
总之，超高效液相色谱-串联质谱法是一种非常有前途的化妆品检测方法。在未来，该方法将更加成熟和普及，为消费者提供更安全、更健康的化妆品产品。
化妆品中七种性激素的测定超高效液相色谱-串联质谱法的相关资料
- 化学试剂丙三醇GB/T687-2011
- 高效液相色谱法测定化妆品中24种防腐剂含量
- 精油和芳香萃取物残留苯含量的测定GB/T27580-2011
- 化妆品中维生素B5的测定方法
- 化妆品名词术语GB/T27578-2011详解
- 化妆品中七种性激素的测定超高效液相色谱-串联质谱法GB/T34918-2017
- 化妆品中七种性激素的测定超高效液相色谱-串联质谱法GB/T34918-2017
- 化妆品中维生素B5的测定方法
- 涂料中全氟辛酸及其盐的测定高效液相色谱－串联质谱法GB/T28606-2012
- 化妆品中维生素B3的测定方法
- 化妆品中双酚A的测定方法——GB/T30939-2014标准
- 化妆品中禁用物质甲硝唑的测定高效液相色谱-串联质谱法GB/T30937-2014
