隐形眼镜护理液卫生要求

隐形眼镜护理液卫生要求

国家标准 GB191922003 idtISO/DIS11980:1996 SO/DIS119811996 隐形眼镜护理液卫生要求 Hygienicrequirementforcontaet lenscaresolution 2003-06-13发布 2004-02-01实施 发布 雷靠金恭型国家标准
GB19192一2003 前 言 隐形眼镜护理液的卫生质量直接关系到配戴者的眼睛健康 根据《传染病防治 法》、《传染病防治法实施办法》和《消毒管理办法》,特制定本标准 本标准等同采用1soDIs1198l;1996与ISo/DIsl1980;1996,并根据国际标准的基本原理、试验 方法与评价标准,选择适应我国具体情况的技术要求.试验菌株与培养方达,参照采用1so/cD1729 1996、ISO/CD14730:1996、ISO/DIS13212:1996与ISO/DIS14534:1996 本标准第四章(对茄科镰刀霉菌的消毒效果除外)为强制性,其余各章为推荐性 本标准由卫生部提出并归口 本标准由上海市疾病预防控制中心负责起草,苏州中化药品工业有限公司、北京博士伦眼镜护理产 品有限公司,眼力健制药有限公司参加起草 本标准主要起草人沈伟、何静芳、仲伟鉴潘希和、王彩娟,桑蔚、孙伟之
国家标准 隐形眼镜护理液卫生要求 GB19192一2003 idtISO/DIS11980:1996 ISO/DIS11981:1996 Hygienierequirementforcontact lenscaresolution 范围 本标准规定了隐形眼镜(硬性镜和/或软性镜)护理液的定义、技术要求、试验方法、检验规则以及包 装、标志与使用说明等要求 本标准适用于隐形眼镜专用护理液产品 引用标准 下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文 本标准出版时,所示版本均 为有效 所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性 GB159792002一次性使用卫生用品卫生标准 1so/DIs11980;1996光学仪器与光学器材 隐形眼镜及其护理产品临床研究指导 1so/Ds11981;1996光学仪器与光学器材 -隐形眼镜和隐形眼镜护理产品 隐形眼镜及 其护理产品物理相容性试验方法 药典1995年版二部“澄清度检查法”与“无菌检查法” 卫生部《消毒技术规范》(第三版)第一分册《实验技术规范》(1999)“消毒剂毒理 学实验技术” 定义 本标准采用下列定义 隐形眼镜护理液contactlenscaresolution 专用于隐形眼镜护理的,具有清洁、消毒、冲洗或保存镜片,中和清洁剂或消毒剂,物理缓解(如润 滑)隐形眼镜引起的眼部不适等功能的溶液或可配制成溶液使用的可溶性固态制剂,包括使用时可直接 或非直接接触眼球的产品 隐形眼镜护理液可分单一功能型与多功能型 单一功能型隐形眼镜护理液系仅具有上述一种功能 的产品;多功能型隐形眼镜护理液系同时具有清洁,消毒、冲洗、保存四种功能的产品 3.2多次量产品multidoseproducts 最小包装容器内的护理液容量能使用一次以上的产品 3. -次量产品singledoseproducts 最小包装容器内的护理液容量只能使用一次的产品 清洁cleaning 3 去除蛋白质、有机物、污物等的处理 5 3. 消毒disinfetion 国家质量监督检验检疫总局2003-06-13批准 2004-02-01实施
GB19192一2003 杀灭或清除病原微生物使其达到无害化的处理 3.6中和neutralisation 消除消毒剂和/或抗微生物剂抑/杀菌活性的处理 有效成分aetiveingredient 产品中具有清洁、消毒、中和等功能的组分 3.8抛弃日期discarddate 多次量产品开封后的最长使用期限 3.9有效期validdate 自生产之日起,未开封的具有清洁、消毒、中和等功能的产品保持其上述功能的最长有效使用期限 3.10保质期guaranteedate 自生产之日起,未开封的无上述功能的产品维持其最低有效成分含量的最长使用期限 技术要求 隐形眼镜护理液技术要求应符合表1中的要求 表1隐形眼镜护理液技术要求 求 适 用 项目名称 要 理化性能 外观 澄清液体 液态成品原液与固态成品使用液 pH 6.57.8 直接与眼接触的产品原液或使用液 26034o 渗透压(mosm/kgH.O" 直接与眼接触的产品原液或使用液 有效成分含量 在标示含量范围内 所有产品 过氧化氢残留量/mmg/kg 以过氧化氢为有效成分的产品 H.o 30 与镜片的物理相容性 用护理液处理前后,镜片的物理参直接与镜片接触的产品原液或使 数应一致 用液 微生物 活菌计数/cfu/R》 不直接接触眼睛的固态产品 l00 致病菌 不得检出 不直接接触眼睛的固态产品 无菌检查 无菌生长 直接接触眼睛的液态产品 消毒效果[杀灭率/(%7 大肠杆菌 >99.90 金黄色葡萄球菌 >9990 具有消毒功能的产品 绿脓杆菌 >99,90 白色念珠菌 >90,00 茄科镰刀霉菌 >90.00 安全性 >5000 急性经口毒性 0mg/kg 所有产品 致突变试验 无致突变性或遗传毒性
GB19192一2003 表1(完 项目名称 要 求 适 无刺激性 皮肤刺激" 眼刺激" 无刺激性 直接与眼接触的产品原液或使用液 皮肤变态反应 极轻 细胞毒性" 无细胞毒性 稳定性 成品稳定性 符合产品标识有效期或保质期 所有产品 开封产品抛弃日期 符合产品标识抛弃日期 多次量产品 含有新成分的各种产品;或有效成分 无不良反应 临床试验 与已上市产品浓度不一致的产品 有效成分为过氧化氢的护理液,用中和后产物进行测定 试验方法 5 随机抽取三个批号的最小容量包装产品进行测试,每个批号至少抽取三件,三分之一用于检测， 三 分之一必要时复测,三分之一留样 5.1理化指标 5. .1.1外观 按药典(1995年版二部)“澄清度检查法”测试,应符合表1中的相应要求 5.1.2pH 取试样20mL,在温度(25士1)C时用已校正的酸度计进行测定,应符合表1中的相应要求 5.1.3渗透压 取0.5mL试样,用渗透压计测定 以蒸水或已知校正值的溶液做校正,以三次读数的平均值为 测定结果,应符合表1中的相应要求 5.1.4有效成分含量 按国家标准、药典、行业标准的顺序选择测定方法 每份试样平均测三次,取其平 均值,应符合表1中的相应要求 5.1.5过氧化氢残留量 将护理液按说明书规定的方法和最短作用时间进行中和,取中和后样液5.0mL至150mL锥形瓶 内,加人10%硫酸5m及蒸水10mL,以0.002mol/L高钰酸钾标准溶液滴定,稳定摇动滴定至粉 红色并至少保持15、为终点 同时作空白对照 按式(1)计算过氧化氢残留量,应符合表1中的相应 要求 (V一V×c×170.1 H.O.(mg/kgH.O)= 0.002又5o 式中:V 样品消耗0.002mol/L高酸钾溶液的体积,mL 空白消耗0.002mol/L高酸钾溶液的体积,mL N、 -高酸钾标准溶液的摩尔浓度 5.1.6与镜片的物理相容性 按ISO/DIS11981方法测试,应符合表1中的相应要求 5.2微生物指标 5.2.1固态样品处理
GB19192一2003 精确称取2.000g试样,放人20.0mL.0.03mol/1磷酸盐缓冲液(PBS)内(如产品中含有抑菌成 分,则用中和剂代替PBS),完全溶解后取样按下述方法进行检测 5.2.2活菌计数 取1.0mL样液接种营养琼脂培养基,每管平行接种两个平皿,于35C37C培养48h,按式(2)计 算平板上平均菌落数,应符合表1中的相应要求 (2 活菌计数(cfu/g)=平板上平均菌落数×10 5.2.3致病菌 按GB159791995《一次性使用卫生用品卫生标准》附录A中的方法进行金黄色葡萄球菌、绿脓 杆菌、大肠杆菌检测,应符合表1中的相应要求 注1:本试验用中和剂必须通过附录D(标准的附录)中规定的悬液定量中和剂鉴定试验 注2如找不到合适中和剂,可按药典(1995年版二部)“无菌检查法”中“薄膜过滤法”处理样液,将 薄膜直接接种相应的培养基进行检测 5.2.4无菌检查 按药典(1995年版二部)"无菌检查法"测试(如产品中含有抑菌成分,须先用薄膜 过逃达处理),应符合表1中的相应要求 消毒效果指标 见附录A(标准的附录),应符合表1中的相应要求 安全性指标 .41忽性经口毒性试验.致突变试验,皮肤制微试验,眼刺激试验,皮肤变态反应试验 按卫生部《消毒技术规范(第三版)第一 分册《实验技术规范》(1999)“消毒剂毒理 学实验技术”测试,应符合表1中的相应要求 5.4.2细胞毒性试验 见附录B(标准的附录),应符合表1中的相应要求 5.5稳定性指标 见附录c(标准的咐录),应符合表1中的相应要求 5.6临床试验 须进行临床试验的产品 5.6.1 a含有新成分的各种护理液;须进行60位受试者3个月的临床试验; b有效成分高于已上市产品浓度的各种护理液;须进行30位受试者1个月的临床试验; 有效成分低于已上市产品浓度的眼内溶液以及具有清洁、消毒或中和作用的护理液;须进行 30位受试者1个月的临床试验 5.6.2试验对照,必须设与受试者等量的配对对照 3 5.6. 试验方法:按ISO/DIS11980方法进行,应符合表1中的相应要求 检验规则 6.1出厂检验 出厂检验项目,包括外观,pH渗透压,有效成分含量、活菌计数,致病菌、,无菌检查 2 6. 定期检验 定期检验项目,过氧化氢残留量,消毒效果每半年检验一次;安全性、稳定性每两年检验一次 6. 3 型式检验 型式检验项目,包括本标准技术要求的全部内容 在下列情形之一时,应进行型式检验 新产品; -当原料、工艺、配方有重大改变,可能影响产品性能时;
GB19192一2003 -停产六个月以上重新恢复生产时 卫生主管部门提出进行型式检验时 6.4致突变试验规定 6.4.1我国首创或根据国内外文献报道首次进行生产的新护理液;必须做三项致突变试验 6.4.2从国外进口在我国销售、或国外已批准生产现由我国生产的护理液至少做两项致突变试验(基 因水平和染色体水平 6. .4.3与国内已获准生产的护理液属同一类的产品;至少做一项致突变试验 6.4.4定期检验与型式检验;至少做一项致突变试验 包装、标志与使用说明 7.1包装 与隐形眼镜护理液直接接触的包装材料;应安全无害,不影响产品在有效期内的卫生质量 刀.1.2隐形眼镜护理产品的运输包装;应能保护产品在运输、贮存过程中不受损坏 7.2标志 销售包装标志,应用中文标明产品名称,主要有效成分、净含量,生产批号、有效期或保质期,制 7.2.1 造商名称与地址、批准文号、执行标准号,以及必要的使用说明与注意事项 进口产品还应标明经销商 名称与地址 运输包装标志;应用中文标明产品名称,规格与数量、生产批号、有效期或保质期、制造商名称与 7.2.2 地址、批准文号、执行标准号,以及必要的注意事项 进口产品还应标明经销商名称与地址 7.3使用说明 7.3.1每一销售包装内均应附有使用说明 7.3.2使用说明必须用明确的中文标明如下内容;产品名称与剂型、主要有效成分与含量、性能、适用 范围与禁忌、详细使用方法与步骤、不良反应或副作用、贮存条件、有效期或保质期,以及注意事项 一次量产品的使用说明应写明“只能使用一次”;多次量产品说明应写明“每次使用后必须立即 7.3.3 关闭容器”,并标明抛弃日期
GB19192一2003 附 录 A 标准的附录 消毒效果试验方法 目的 A1 用于确定隐形眼镜护理液是否具有消毒功能 A2测试方法 A2.1 悬液定量杀菌试验 A2.1.1试验微生物 细菌:大肠杆菌(ATcC8739或8099) a 金黄色葡萄球菌(ATcC6538 绿脓杆菌(ATCC9027) b酵母菌:白色念珠菌(ATcC10231 》霉菌,茄科镰刀霉菌(ATcc36031 A2.1.2操作程序 2.1.2.1取菌种3一14代营养琼脂斜面新鲜培养物(18h一24h),用0.03mal儿瞬酸盐缓冲液 PBS)洗下,稀释成含菌量为1×10'cfu/ml~1×10'cfu/ml的菌悬液 A2.1.2.2从三批试样中分别吸取10.0mL加人三支灭菌试管中,置20c一25C水浴5nmin 在试管中分别加人0.1 A2.1.2.3 mL菌悬液,使最终含菌量为1×10cfu/mL1×10°cfu/mL,混 匀,并开始计时 A2.1.2.4分别于四个不同作用时间(推荐最短消毒时间的25%.50%、75%,I00%),各取1.0mL菌 药混合液移人9.0mL中和剂中,混匀 nmin后,吸取其原液或10倍系列稀释液1.0mL分别接种营养琼脂培养基(细菌) A2.1.2.5中和101 沙堡氏琼脂培养基(酵母菌)或马铃薯葡萄糖琼脂培养基(霉菌),每管接种两块平板，细菌与酵母菌分别 于35C37C培养48h细菌)或72h(酵母菌),霉菌于20C25C培养10dl4d,作活菌计数,取其 平均值 A2.1.2.6以0.03mol/几PBs代替样品,按上述同样方法加菌进行活菌计数作为阳性对照 取PBs、 中和剂各1.0mL分别接种营养琼脂培养基或沙保氏琼脂培养基以及未接种的上述培养基作为阴性 对照 A2.1.2.7按式(A1)计算每种菌每个作用时间点的杀灭率， 阳性对照组活菌数一试验组活菌数 杀灭率- X×100% (Al 阳性对照组活菌数 A2.1.2.8试验所选中和剂必须通过附录D中规定的悬液定量中和剂鉴定试验,并且阴性对照必须无 菌生长,否则重新测试 A2.2有机物对消毒效果影响试验 A2.2.1试验微生物 任选A2.1.1中的一种细菌进行测试 A2.2.2操作程序 A2.2.2.1取菌种3~14代营养琼脂斜面新鲜培养物(18h24h),用0.03mol/LPBS洗下并稀释 加人适量无菌小牛血清,使最终含血清量为10%,含菌量为1×10efu/mL1×10cfu/mL的菌悬液
GB19192一2003 A2.2.2.2以悬液定量杀菌试验确定的最低有效浓度所需的最短作用时间为试验时间起点,以后按等 差或等倍组距再选择三个作用时间取样检测 A2.2.2.3以下步骤按A2.1.2.2~A2.1.2.8进行 A2.2.3评价规定 达到合格的最短有效作用时间与悬液定量杀菌试验结果相同,为有机物对产品杀菌作用无明显影 响;如最短有效作用时间延长一倍或以上为有影响 A2.3模拟现场试验(镜片定量杀菌试验) A2.3.1试验微生物 根据悬液定量杀菌试验结果,选择抗力最强的一种细菌与酵母菌进行测试 试验镜片 A2.3.2 镜片类型,分低含水非离子型与高含水离子型 A2.3.2.1 试验镜片必须是未使用过的新镜片 A2.3.2.2 镜片应凹面向上放人无菌培养M内,在凹凸两面顶点各接种0.0 A2.3.2.3 mL菌液 操作程序 A2.3.3 将试验镜片(每组四片低含水非离子型与四片高含水离子型)以及阳性对照镜片(各两片 A2.3.3.1 分别放置于灭菌培养m中,取试验菌液0.02mL接种于镜片上(染菌量为2×10'efu/片1× 10°cfu/片),于20C25C吸收5min10min A2.3.3.2按生产商所提供的镜片消毒的详细说明处理试验镜片,包括清洁、消毒、冲洗、贮存的所有 步骤 A2.3.3.3处理完毕,立即以无菌操作方法分别将试验镜片移人5.0mL中和剂试管内,振摇,使镜片 上的残留菌被充分洗脱在中和剂中 A2.3.3.4按A2.1.2.5的方法进行活菌计数 A2.3.3.5将未经处理的阳性对照镜片以无菌操作方法分别移人5.0mL.0.03mol/L.PBs试管内,振 摇,充分洗脱镜片上残留菌,再按A2.1.2.5的方法进行活菌计数 A2.3.3.6取0.03mol/LPBS,中和剂各1.0mL分别接种营养琼脂培养基与沙堡氏琼脂培养基以及 未接种的上述培养基作为阴性对照 A2.3.3.7按式(A2)计算每种镜片上每种菌的消除率 消除率-困性对照维话曲整一达验组适道数x100% A2 试验所选中和剂必须通过附录D中规定的载体定量中和剂鉴定试验,并且阴性对照必须无 A2.3.3.8 菌生长,青则重新调试 A2.3.4评价规定 对细菌的消除半>99.90%,对醉脖母菌的消除半>90.00%为合格
GB19192一2003 附 录 B 标准的附录 细胞毒性试验与评价方法 B1 目的 将一定量受试物加人细胞培养液中培养细胞,通过对细胞生长和增殖的影响来评价护理液对哺乳 动物细胞的潜在毒性作用 2 试剂 a》阳性对照:64g/L苯酚溶液 b)阴性对照;下述培养基 细胞株;推荐使用L-929细胞(小鼠成纤维细胞),试验用细胞为传代48h~72h生长旺盛的 c 细胞 d培养基Eagle'sMEN加人体积分数为10%的小牛血清 磷酸盐缓冲液(PBS). e 无钙镁磷酸盐缓冲液 100.0ml 10.0ml 酚红溶液 0.5ml 200g/L氯化镁溶液 100g/L氯化钙溶液 1.0ml 水 加至1000mL B3试验步骤 B3.1细胞悬液制备;用细胞培养基配制4万个/ml细胞悬液分注于试管内(1mL/管),阴性对照组 13管(1管备用),材料组10管(1管备用),必要时设阳性对照组3管,置37C恒温培养箱中培养24h B3.2受试物制备;取0.2mL受试物加人细胞培养液中,37C培养24 受试液交换;24h后,每管舍弃原培养液,阴性对照组9管用新鲜培养液交换,阳性对照组用含 B3.3 4g/儿苯酚的细胞培养液交换,受试物组用含体积分数为50%受试液的新鲜培养液进行交换,并对三 支阴性对照管进行细胞计数,其余置37C继续培养 B3. 细胞计数与吸光度测定 B3. 分别于2、4、7天将对照组和试验组各三管进行细胞计数或吸光度测定,以判断细胞的增 殖度 B3.4.2细胞计数法;用含枸橡酸钠的结晶紫罗兰染色,血球计数板在显微镜下计数.上下限不得超过 10%,否则重新计数 B3.4.3分光光度计测定吸光度法(仲裁法);弃去原细胞培养液,用PBS洗涤,体积分数为10%的甲 醛溶液固定10nmin,水洗(2~3)次,加5g/L结晶紫罗兰1.5mL染色3min,水洗(23)次,加10g/1 十二熔基硫酸钠3.5ml.,用分光光度计在波长588nm下测定吸光度 B4结果计算 细胞计数法;细胞计数经95%可信度的数理统计,得上限,平均数、下限,通过细胞计数计算相对 B4.1 增殖度(RGR),见式(B1
GB19192一2003 试验组平均值 RGR= ×100% B1 勇对照维平值 B4.2吸光度测定法;相对增殖度计算见式(B2) 试赞吸光一空自4吸光x10% RGR= B2 丽座行照童吸死度一室首对赢吸完度 毒性评定;按表以规定把RGR值转换成六级反应以评定护理被毒性程度 B4.3 表B1反应分级标准 反应 相对增殖度 0级 100 1级 7599 2级 5074 3级 2549 4级 -21 5级 B5评价规定 试验结果为0级或1级反应为合格 B5.1 试验结果为2级反应的,应结合细胞形态分析,综合评价 B5.2 试验结果为35级反应为不合格 B5.3
GB19192一2003 C 附 录 标准的附录 稳定性试验方法 C1成品稳定性试验 c1.1目的 用于确定隐形眼镜护理液成品的有效期 C1.2测试方法 自然留样法 C1.2.1 将试样放置25C士2C室温条件下,定期(开始、3月、6月,以后每6个月一次)取样检测其理化性 能(与镜片物理相容性除外)、微生物情况,以及选择附录B中抗力最强的一种细菌进行消毒效果试验 c1.2.2加速试验法 将试样放置45C士2C与相对湿度(75士5)%条件下,定期(开始、3月、6月)取样检测,指标 同c1.2.1 c1.3评价规定 c1.3.1至少应进行6个月的自然留样与加速试验 c1.3.2各项检测结果均应符合表1中的相应要求 C1.3.3自然留样法可直接确定产品有效期 c1.3.4加速试验可根据温度与自然留样法温度差(r)计算加速因数,计算公式为 加速因数=2.0r1(当r=20时,2.0-"= =4) 然后用加速因数乘以试验时间推测产品有效期,但不 得超过两年 c2开封产品抛弃日期试验 c2.1 目的 用于确定多次量隐形眼镜护理产品开封后的抛弃日期 C2.2测试方法 C2.2.1 试验微生物;选择消毒效果试验(附录B)中抗力最强的一种细菌与一种酵母菌(白色念珠菌. c2.2.2接种日期;试验开始,第2周,拟抛弃日期的25%,.50%、,75%,100% 取样日期,第1,2.,3、！周,拟抛弃日期的25%.50%、75%,100%,拟抛弃日期后2周 C2.2.3 c2.2.4操作程序 每种菌每批次取试样50mL于灭菌试管内,加人0.5mL含菌量为10"cfu/mL菌悬液,混 C2.2.4.1 匀,使最终菌量为10'efu/mL,置于20C一25C 如产品对光敏感,应遮光贮存 C2.2.4.2在上述取样日期,每管吸取1.0nmL试样移人9.0mL中和剂中,混匀 C2.2.4.3中和10min后,取样液或10倍系列稀释液1.0mL分别接种营养琼脂培养基(细菌)或沙 堡氏琼脂培养基(酵母菌),每管接种两个平皿,于35C一37C培养48h(细菌)或72h(酵母菌),进行活 菌计数,取平均值 C2.2.4.4分别以0.03nmol/1PBS与中和剂代替试样,按上述方法加菌进行活菌计数作为阳性对照 与中和剂对照;同时分别用1.0ml.0.03mol/LPBS与中和剂接种营养琼脂培养基与沙堡氏琼脂培养 基以及未接种的上述培养基作阴性对照 C2.2.4.5在上述再接种日期(2周及以后),在试样中加人0.5mL含量为10'cfu/mL菌悬液,混匀 使最终菌量为10 cfu/mL 在再接种前取样进行活菌计数 1o
GB19192一2003 C2.2.4.6计算每种菌的减少率 阻性对照组活菌数一试验组活菌数 减少率- ×100% C1 对照组活菌数 C2.2.5评价规定 a阴性对照无菌生长,中和剂对照活菌数达到阳性对照活菌数的50%以上,否则应重新测试 b)在第14天,细菌减少率>99.90%,酵母菌减少率>90.0%,并且在以后至抛弃日期细菌与酵母 菌的活菌计数不再增加 11
GB19192一2003 附 录 D 标准的附录 中和剂鉴定试验 D1 目的 用于确定所选用中和剂是否适用于拟进行的细菌或酵母菌杀灭试验 D2试验微生物 细菌(以下任选一种) 大肠杆菌(ATcc8739或8099) 金黄色葡萄球菌(ATcC6538) 绿脓杆菌(ATcC9027) 酵母菌;白色念珠菌(ATCc10231) D3试验分组 D3.1悬液定量中和剂鉴定试验 D3.1.1第1组 吸取试样10.0ml于试管内,置20C25C水浴中5min后,加人0.1mL菌悬液混 匀 作用至预定时间,吸此样液1.0mL加于含有9.0mL0.03mol/LPBS的试管中混匀 吸取该最 终样液1.0mL,接种于平中,做活菌计数 D3.1.2第2组 吸取试样10.0ml于试管内,置20C一25C水浴中5min后,加人0.1ml菌悬液混 匀 作用至预定时间,吸此样液1.0m加于含有9.0mL.0.03mol/儿L中和剂溶液的试管中混匀,作用 0min 吸取该最终样液1.0ml,接种于平皿中,做活菌计数 如平板生长菌落数超过300个,应以0.03mol/LPBS对上述最终样液作适宜稀释后,再次进行活 菌计数 第3组 吸取中和剂10.0mL于试管内,置20C一25C水浴中5min后,加人0.1ml菌悬液 D3.1.3 混匀 作用10mim 吸取该最终样液l.0ml..用中和剂做10信系列稀释,选适宜稀释度悬液,各取 1.0mL,分别接种于平皿中,做活菌计数 第4组 吸取中和产物游液(以1份消毒剂加9份中和剂,作用10min配制面成)10.0ml于 D3.1.4 试管内,置20c25C水浴中5min后,加人0.1 mL.菌悬液混匀 作用10mim 吸取该最终样被 1.0mL,用中和产物溶液做10倍系列稀释,选适宜稀释度悬液,各取1.0mL,分别接种于平皿中,做活 菌计数 D3.1.5第5组 吸取0.03mol/儿PBs10.0nml于试管内,置20C一25C水浴中5min后,加人 o.1nmL菌悬液混匀 作用10nmin 吸取该最终样液1.0nml,用0.03mol/儿PBS做10倍系列稀释,选 适宜稀释度悬液,各取1.0mL.分别接种于平皿中,做活菌计数 D3.1.6第6组 吸取试验所用同批次0.03mol/1.PBS1.0ml,接种于平皿中,做活菌培养计数 D3. 第7组 吸取试验所用同批次中和剂1.0mL.接种于平皿中,做活菌计数 1 .7 D3.1.8第8组 将未接种的试验用培养基平板直接置温箱内培养， D3.2载体定量中和剂鉴定试验 D3.2.1第1组 吸取试样5.0ml于无菌小平皿内,将其置20C25C水浴中5min后,用无菌锻子 夹人一菌片(布载体),并使浸透于试样中 待作用至试验预定的时间,立即用无菌锻子取出菌片移人含 5.0mL0.03nmol/LPBS试管中,作用10min 将试管振打80次,吸取该最终样液1.0mL,接种于平 12
GB19192一2003 皿中,做活菌计数 D3.2.2第2组 吸取试样5.0mL于无菌小平皿内,将其置20C25C水浴中5min后,用无菌锻子 夹人一菌片,并使浸透于试样中 待作用至试验预定的时间,立即用无菌毁子取出菌片移人含5.0ml 中和剂试管中,将试管振打80次 作用10min 吸取该最终样液1.0ml.,接种于平皿中,做活菌计数 如平板生长菌落数超过300个,应重新吸取该最终样液0.5ml .,用0.03mol/IPBS做适当稀释， 选适宜稀释度悬液,吸取1.0mL,分别接种于平皿中,做活菌计数 D3.2.3第3组 吸取中和剂5.0mL 于无菌小平皿内,将其置20C25C水浴中5min后,用无菌锻 一菌片,并使浸透于中和剂内,作用10 子夹人 立即用无菌锻子取出菌片移人含5.0mL中和剂试 min 管中,将试管振打80次,混匀 吸取该最终样液1.0mL,用中和剂做10倍系列稀释,选适宜稀释度悬 液,吸取1.0ml,分别接种于平皿中,做活菌计数 D3.2.4第4组 吸取中和产物溶液(以浸有消毒剂的载体置5.0mL中和剂内,作用10min)5.0ml 于无菌小平皿内,将其置20c 25C水浴中5min后.用无菌锻子夹人一菌片,并使浸透于中和产物 中 作用10min,用无菌缀子取出菌片,移人含5.0mL中和产物溶液的试管中,将试管振打80次,混 匀 吸取该最终样液1.0ml.,用中和产物溶液做10倍系列稀释,选适宜稀释度悬液,吸取1.0ml,分 别接种于平皿中,做活菌计数 D3.2.5第5组 吸取0.03mol/几PBs5.0mL于无菌小平m内,将其置20C一25C水浴中5nmin 后,用无菌锻子夹人一菌片,并使浸透于0.03mol/几PBS中 作用10min,立即用无菌子取出菌片 移人含5.0mL0.03mol/L PBS的试管中,将试管振打80次,混匀 吸取该最终样液1.0mL,用 0.03mol/LPBS做10倍系列稀释,选适宜稀释度悬液,吸取1.0mL,分别接种于平皿中,做活菌计数 D3.2.6第6组 吸取试验所用同批次0.03mol/LPBS1.0mL,接种于平皿中,做活菌计数 D3.2.7第7组 吸取试验所用同批次中和剂1.0mL,接种于平皿中,做活菌计数 D3.2.8第8组 将未接种的试验用培养基平板直接置温箱内培养 D4评价规定 试验结果符合以下全部条件,所测中和剂可判为合格 a第1组无试验菌,或仅有极少数试验菌菌落生长 b第2组有较第1组为多,但较第3、4、5组为少的试验菌菌落生长,并符合表D1要求者， 表D1中和剂鉴定试验合格标准中对第1组与第2组菌落数的要求 第2组平板平均菌落数 第1组平板平均菌落数 >(X十5 >(Y十0.5Y 注1;x指在1l0之间的菌落数,Y为大于10的菌落数 注2:对抑菌作用不明显消毒剂所用中和剂的鉴定试验中,当第1组与第2组菌落数相近,难以达到本表要求时， 可根据具体情况另行作出判断和评价 第3、4、5组有相似量试验菌生长,并在1×10cfu/mL(片)~1×10'cfu/mL(片)之间,其组间 菌落数误差奉按式(D)汁算,其仙应不超过15% 三组间菌落平均数一各组菌落平均数)的绝对值之租 ×100%D1 组间菌落数误差率一 三重简草巧雷落戴 d第68组无菌生长 否则,说明试剂或培养基有污染,全部试验应换未污染试剂或培养基 重做 连续三次试验取得合格评价 e 13
GB19192一2003 D5注意事项 a试验所分各组均有其特定意义,不得任意删减 b严守无菌操作,保持试液和器材的无菌,注意更换吸管,以防止沾染影响试验的准确性; c)在计算微生物浓度时,须考虑其稀释倍数 d第2组如在预定时间无菌生长,可适当缩短作用时间,但最短不得少于30s 14
GB19192?2003 p ? ??? ?? E10.03mo/1LPBs(pH7.2) 2.83 (NaeHPO,? g 1.36 (KHPO g ? 1000ml E2??? 1?;?? ??? 100ml ? 4g8g 95%? l00ml 1%? 80ml 2?:??? ? 2g g ?? 200ml 3?;? 100 1)95%? ml (2??? 70ml 95%? 30ml ? 4?:????? 10mL ?? ? 5 l0 g g 90ml 5%??? ? 900ml E3?? ? 10g ? 5 g ? 5g ? 20 g ? 1000mL E4 ?? 40g ? 10g 20 ? g
GB19192一2003 蒸馏水 1000mlL E5 无钙铁PBs(p7.27.4) 磷酸二氢钾(KH,PO 0.20g 磷酸氢二钠(NaHPO12H,O)2.89g 氢化钾(KCI) g 0.20 氢化钠(NaCD 8.00g 双蒸水 1000mL E6小牛血清 将过滤除菌后的小牛血清,放人56恒温水浴中,保温30min灭活补体 处理后分装,保存于 -20C备用 E7马铃薯葡萄糖琼脂培养基 马铃薯 200g 葡萄糖 20g 琼脂 20g 蒸馏水 1000mL GB191922003《隐形眼镜护理液卫生要求》 第1号修改单 本修改单业经国家标准化管理委员会于307年1月18日以国标委农画[2007]6号文批准,自批 准之日起实施 -2003(隐形眼镜护理液卫生要求)国家标准修改内容如下 GB19192- 刑除“表1隐形眼镜护理液技术要求”中“pH”和“渗透压”两项指标要求 “附录A消毒效果试验方法”A2.1.2.1修改为 2. A2.1.2.1取菌种314代营养琼脂斜面新鲜培养物(18h24h),用0.03mol/几磷酸盐缓冲液 (PBS)洗下,稀释成含菌量为1×10'efu/mL1×10'cfu/mL的菌悬液 菌悬液应采用玻璃珠研摩或 电动涡旋振动器振打等方式尽量使凿悬液中的缅菌为单个菌体 “附录A消毒效果试验方法”A2.1.2.2修改为 3. A2.1.2.2从三批试样中分别吸取10.0m加人三支灭菌试管中,置20C25C水浴5min 注，试验中所用的试管材料应与所检测的溶液相匹配