罐内水性涂料抗微生物侵染的试验方法

罐内水性涂料抗微生物侵染的试验方法

国家标准 GB/T30792一2014 罐内水性涂料抗微生物侵染的试验方法 Iestmethodtorresistaeeofwaterbormecotinssinthecontainer toattackbymicroorganisms 2014-07-08发布 2014-12-01实施 国家质量监督检监检疫总局 发布 国家标准花管理委员会国家标准
GB/T30792一2014 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准由石油和化学工业联合会提出 本标准由全国涂料和颜料标准化技术委员会(SAC/TC5)归口 本标雅起草单位;广东省微生物研究所,中海油常州涂料化工研究院、广州秀珀化工股份有限公司 立邦涂料()有限公司,深圳广田装饰集团股份有限公司、广东千色花化工有限公司、中科纳米涂料 技术(苏州)有限公司 本标准主要起草人;谢小保,赵玲,欧阳友生、李国荣,唐磊、李少强、欧阳振图、李家夫
GB/T30792一2014 罐内水性涂料抗微生物侵染的试验方法 警告使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验,本标准并未指出所有可能的安全问题 使用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关法规规定的条件 范围 本方法规定了罐内水性涂料抗微生物侵染试验方法及结果评定 本方法适用于罐内水性涂料抗微生物侵染测试,其他涂料的抗微生物侵染测试可参考本标准 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T3186一2006色漆、清漆和色漆与清漆用原材料取样 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 YY05692011生物安全柜 试验原理 本测试方法模拟自然界微生物生长的环境条件,在水性涂料中加人一定数量的微生物,搅拌均匀 再将样品置于30C士2C存放,并于不同的时间测定试样中微生物数量,根据试验中微生物数量动态 变化来评价罐内水性涂料抗微生物侵染功效 试验条件 4.1设备和材料 4.1.1生化培养箱 温度能保持在30C土1C,36C士1,28C士1 4.1.2I级生物安全柜 应为符合YY0569一2011规定的级生物安全柜 4.1.3天平 感量0.01g 4.1.4冰箱 温度可控制在4C8
GB/T30792一2014 4.1.5高压灭菌锅 压力可维持在0.10MIPa0.11MPa 4.1.6培养皿 皿底直径为9cm. 4.1.7锥形瓶 容量为50mL、,100ml250ml 和500mL 4.1.8刻度吸管 1mL(具0.01ml刻度)和10mL(具0.1ml刻度 4.1.9pl计或精密pH试纸 精密度0.1 4.1.10无菌棉签 4.2培养基和试剂 试剂纯度 4.2.1 除另有规定,所有试验均使用化学纯或化学纯级别以上的试剂， 4.2.2水 所用的水应为符合GB/T6682规定的三级水 4.2.3营养琼脂培养基(NA 将表1中各成分加于100mL燕憎水中,煮沸游解,调节pH值至7.2一7.4 分装试管或维形瓶 121C高压灭菌20 mln 表1营养琼脂培养基 分 含 量 成 蛋白」 10,0g 牛肉膏 5,0g 氯化钠 5.0 g 琼脂 15.0 燕水 1000ml 4.2.4马铃薯葡萄糖培养基(PDA 将马铃薯去皮切块,加1000mL蒸懈水，煮沸10 min20min 用纱布过虑,补加蒸僧水至 1000ml 加人葡萄糖和琼脂,加热溶化,分装,121高压灭菌20 成分见表2. min
GB/T30792?2014 2 ??п 300,.0g 20,0g ? 20.0g ?? 1000ml 4.2.5?? 3и??1000ml?,?,pH?7.2~7.4????? 121C?20nmin 3?? 2.83 1.36g 80 5,0g ? 1.0g ? 1000ml 4.2.6???(ISA) 4и??1000mL?,?,pH?7.3?0.2????? 121?20min 4??? ? 15,0g ??? 5,0g ? 5.0g ? 08" 8o 70g ? 15.0g ? 1000mL 4.2.70.5%??TIC) TTC???121??20nmin,????,4C?á? 5
GB/T30792一2014 表50.5%氯化三苯四氮陛 成 分 含 量 TTC 0,5g 蒸僧水 100ml 4.3试验菌种 4.3.1细菌 大肠杆菌(Escherichiacoli)ATcC25922,金黄色葡萄球菌(Stahvlococcusaureus)ATcc6538， 铜绿假单胞菌PseudoonasaerugimosaATcCc1o145,产气肠杆菌Enterobucteraerogenes) ATcC49701 根据产品的用途,可增加其他细菌作为测试菌种 4.3.2酵母菌 白色假丝酵母(Candidaalbicuns)ATcc10231,热带假丝酵母(Candidatropicalis)ATCc750 选择一种或两种菌进行试验,根据产品的用途,可增加其他酵母菌作为测试菌种 试验使用的菌种应由国家级或省级菌种保藏机构提供 4.3.3菌种保存 曲种转种后放于4C一8亡条件下保存 储存的岗种应每一个月转种一次,须使用10代以内的 菌种 4.4试验准备 4.4.1样品的准备 产品取样按GB/T3186一2006的规定进行 4.4.2酵母菌菌悬液的制备 将酵母菌接种于PDA斜面(见4.2.4),于28C士1C恒温培养48h一72h,然后加人5mL灭菌生理 盐水将斜面上的酵母菌昔洗下来,充分摇荡均匀,加人适量的灭菌生理盐水稀释制成1.0×10CFU/nml~ 9.0×10CFU/mL菌悬液,备用 4.4.3细菌菌悬液的制备 将四种细菌分别接种到普通营养琼脂培养基斜面(见4.2.3),36C士1C恒温培养24h48h,然 后用5mL灭菌生理盐水分别将斜面上的细菌洗出,充分摇荡均匀,加人适量的灭菌生理盐水稀释,制 一90xXI0CFU/mL菌悬液,将不同细菌岗液等体积混合,备用 成1.0×10°CFU/mL 试验方法 5.1 涂布培养法 5.1.1试样接种 称取100g供测试的样品2份,分别接种1mL细菌菌悬液和1mL酵母菌悬液,充分混合均匀,将
GB/T30792一2014 样品保存在30C士2C条件下,并于0时,第3天,第5天,第7天分别测定样品中的细菌和酵母菌含 量 如果第7天没有检测到微生物,则重新接种 5.1.2微生物数量检测 将2个无菌棉签分别浸人已接种的2个涂料试样中,通过在容器侧壁上轻轻挤压棉签去掉多余的 涂料(大约有200mg的涂料会留在棉签上) 将接种细菌的棉签丢上的涂料均匀地涂布在Ts% 见4.2.6)平板表面上,将接种酵母菌的棉签头上的涂料均匀地涂布在PDA平板表面上(相对保持在棉 签上的200mg涂料,约只有50mg的涂料会被涂在平板上),试验重复3次 TSA平板置于36C士1C 恒温培养24h48h,计数得到细菌菌落数，PDA培养基置于28C士1C培养48h一72h,计数得到 酵母菌落数 如果在培养结束时培养基表面有菌落生长,则测试完成并按照5.1.4.2进行等级评价 如果在培养 结束时培养基表面没有菌落生长,则按5.1.1中规定的方法重新接种进行挑战实验,重复接种至少2次 或供需双方协商重复接种次数 注:为便于计数,可在每100mLTSA和PDA琼脂中分别加人1ml.0.5%的TTC溶液 5.1.3菌落计数 可用肉眼观察,必要时用放大镜,记录平板上菌落数量 菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units,CFU)表示,细菌菌落数应采用3次重复TSA平板平均数,酵母菌落数采用3次重复PDA平板 平均数 5.1.4 结果计算和评价 5.1.4.1结果计算 微生物菌落数按式(1)进行计算: N=Nw十Ny 式中: N 微生物菌落数 细菌菌落数， N N -酵母菌落数 5.1.4.2结果评价 水性涂料抗微生物侵染功效可根据实验结束后微生物菌落数量进行评价 按表6进行分级 表6抗微生物侵染功效分级表 抗菌等级 微生物菌落数/cfu 污染情况描述 无污染 >1且<9 痕量污染 >10且<99 轻微污染 100 污染
GB/T30792一2014 5.2 稀释培养法 5.2.1试样接种 将供测试的样品分成两份各100g,然后分别接种1ml混合细菌液和1mL酵母菌悬液,充分混合 均匀,将样品保存在30C士2C条件下,并于0时、第3天,第7天、第14天,第21天和第28天分别测 定样品中的细菌和酵母菌含量 5.2.2微生物检测 取10g样品加人到含90m稀释液的锥形瓶中,充分摇匀做成1:10的均匀稀释液;吸取1;10 稀释液1.0mL加到9.0mL稀释液中,混匀做成1:100稀释液,依此方法可做成10倍递增稀释液 在 做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平m内,每个稀释度做两个 平皿 细菌培养基采用TSA培养基(见4.2.6),36C士1C恒温培养24h一48h,酵母菌培养基采用 PDA(见4.2.4),28C士1C培养48h一72h 5.2.3菌落计数 可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量,计算两个平板菌 落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克样品中菌落总数结果 5.2.4结果计算和评价 5.2.4.1结果计算 微生物减少百分率按式(2)进行计算 N 一N 微生物减少百分率= ×100% N 式中: N -样品初始接种的微生物数量 样品接种后放置不同时间的微生物含量 N 5.2.4.2结果评价 水性涂料的抗微生物侵染评价等级分为0级、1级、.2级和3级四个级别,按表7进行分级 最后的 防腐功效按细菌、酵母菌减少百分率检验结果最低一项评价等级 表7抗微生物侵染功效分级表 第7天细菌减少百分率 第7天酵母菌减少百分率 等级 >99.999%,至28天细菌数没有增长 >99.99%,至28天酵母菌数没有增加 >99,99%,至28天细菌数没有增长 >99.9%,至28天酵母菌数没有增长 >99,9%,至28天细菌数没有增长 99%,至28天酵母菌数没有增长 99,9% 99%
GB/T30792一2014 试验报告 报告至少应给出以下内容: a)样品描述 b)试验菌种名称、编号及菌液浓度; 试验方法; c D 抗微生物侵染评价等级 试验人员和试验日期; 接种次数(涂布培养法); 偏离本标准的差异

罐内水性涂料抗微生物侵染试验方法GB/T30792-2014

一、背景

GB/T30792-2014是由国家标准化管理委员会颁布的标准，主要用于测试涂料及其制品抗微生物侵染的能力。该标准规定了试验的样品、设备、试验方法以及结果判断等内容，可以指导生产厂家进行涂料产品开发和质量控制。

二、试验方法

1. 试验样品选择

按照GB/T1741-2007《涂料和清漆 取样和样品制备》的要求，从涂料生产厂家提供的不同批次的产品中，随机选择10个样品。

2. 试验设备

(1) 恒温恒湿箱：温度为27±1℃，湿度为95%±5%。

(2) 微生物接种器：在涂膜表面均匀喷撒细菌和真菌混合悬浮液。

(3) 压滤瓶：过滤接种器上的悬浮液。

(4) 培养皿：收集过滤后的细菌和真菌。

3. 试验方法

(1) 将试验样品制成直径为60mm、厚度为2mm的涂膜片。

(2) 在恒温恒湿箱内放置好试验样品并加入微生物接种器。

(3) 在接种器上均匀喷撒细菌和真菌混合悬浮液（总菌落数应为10^6CFU/mL）。

(4) 恒温恒湿箱内培养7天，每24小时观察一次涂膜片表面是否有生长现象，并记录。

(5) 试验结束后，将涂膜片取出，经过压滤后将细菌和真菌收集在培养皿中进行计数。

4. 结果判断

根据微生物的生长情况和计数结果，按照GB/T30792-2014中的规定进行评价。

三、结论

该试验方法可以较为准确地测试水性涂料对微生物的抗侵染能力，为生产厂家提供了参考标准，同时也可以为消费者选购涂料产品提供重要依据。

四、总结

通过本次介绍，我们了解到了罐内水性涂料抗微生物侵染试验方法GB/T30792-2014的详细内容和试验步骤，该标准为涂料生产企业提供了科学的测试方法和监管依据。对于消费者而言，这也是选购合格涂料产品的指南。

总之，在涂料行业不断推广水性涂料的今天，如何保证其在使用过程中不受微生物侵害，也成为了一个重要问题。罐内水性涂料抗微生物侵染试验方法GB/T30792-2014为我们提供了一种科学、规范的测试手段，可以帮助厂商加强产品研发和生产质量监管，同时也为用户提供了更加可靠的涂料选择。

罐内水性涂料抗微生物侵染的试验方法的相关资料

和罐内水性涂料抗微生物侵染的试验方法类似的标准

GB/T30792-2014

罐内水性涂料抗微生物侵染的试验方法

2022/10/19 18:00:58 现行