蕨藻红素含量测定高效液相色谱法

蕨藻红素含量测定高效液相色谱法

国家标准 GB/T38169一2019 蕨藻红素含量测定高效液相色谱法 一HHighperformaneeliquidchromatography Determinationofcaulerpind content 2019-10-18发布 2019-10-18实施 国家市场监督管理总局 发布 币国国家标准化管理委员会国家标准
GB/38169一2019 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准由标准化研究院提出并归口 本标准起草单位:水产科学研究院、水产科学研究院南海水产研究所、标准化研究院、 北京萨姆伯科技有限公司、农村技术开发中心、科学院过程工程研究所 本标准主要起草人;杨贤庆、邓建朝、李乐、荣辉,宋金龙、岑剑伟、马海霞、李来好、马爱进,郝帅、 戴炳业、黄永东
GB/38169一2019 蕨藻红素含量测定高效液相色谱法 范围 本标准规定了用高效液相色谱法测定蕨藻红素含量的方法 本标准适用于蕨藻天然植物中蕨藻红素含量的测定 本方法的定量限为12.5mg/kg 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T30891水产品抽样规范 原理 试样中加人乙醇溶液,经微波辅助提取,高效液相色谱-紫外检测器测定,外标法定量 试剂或材料 除非另有规定,仅使用分析纯试剂 4.1水:GB/T6682,一级 4.2无水乙醇(CH,CH.oH);色谱纯 4.3甲醇(CH,oH);色谱纯 4.485%(体积分数)乙醇溶液 取850mlL无水乙醇,加150mL水,混匀 4.5蕨藻红素;纯度>98% 4.6蕨藻红素标准储备液 称取10.0mg蕨藻红素,用无水乙醇溶解后转人100ml.容量瓶中,稀释至刻度,混匀,配制成浓度 为1004g/mL储备液,于一18C保存,保存期为3个月 4.7有机相微孔滤膜;孔径0.224mm 5 仪器设备 5.1高效液相色谐仪;配有二极管阵列检测器或紫外检测器 5.2常压微波辅助萃取仪;配100ml提取罐 5.3分析天平;感量0.01g,0.0001 g 5.4布氏漏斗
GB/T38169一2019 6 测定步骤 6.1样品制备 按GB/T30891的规定执行 6.2提取 称取2.00g鲜样或2.00g干样置于100ml提取罐中,加人40ml.85%乙醉醇溶液,将提取罐放人 常压微波辅助萃取仪中 微波提取温度设定为70C,时间为25min、功率为800w 提取结束后取出 提取罐,冷却至室温,抽滤,将滤液转人100ml容量瓶中 滤渣加人40mL85%乙醉溶液,重复上述步 骤提取一次,合并提取液用适量85%乙醇溶液清洗残渣,合并滤液于容量瓶中,用85%乙醇溶液定容 至刻度,混匀,吸取1mL溶液过0.22Mm微孔滤膜,待测 6.3测定 6.3.1高效液相色谱参考条件 高效液相色谱参考条件如下 色谱柱:C柱,250mm×4.6mm(内径),54m; a b) 流动相甲醇-水(80:20,体积比); 流速:l.0ml/mins c 检测波长:315nm; d 柱温:30C; e 进样体积104L f 6.3.2标准曲线绘制 准确移取适量蕨藻红素储备溶液,用85%乙醇溶液稀释成质量浓度分别为0.25mg/L0.50mg/L、 1.00mg/L、5.00mg/L,10.00mg/1,50.00mg/L和100.00mg/L.的系列标准工作溶液,供高效液相色 谱测定 以测得峰面积为纵坐标,对应的标准溶液质量浓度为横坐标,绘制标准曲线 求回归方程和相 关系数 6.3.3色谱测定与确证 将标准工作溶液和待测溶液分别注人高效液相色谐中,以保留时间定性,以待测液峰面积代人标准 曲线中定量,样品中蕨藻红素质量浓度应在标准工作曲线质量浓度范围内 蕨藻红素标准溶液色谱图 参见附录A 6.4空白实验 除不加试样外,采用完全相同的分析步骤、试剂和用量,进行平行操作 结果计算 按照式(1)计算 p,AV X1一 A,m
GB/38169一2019 式中: X 样品中蕨藻红素的质量分数,单位为毫克每千克(mg/kg); 标准溶液中蕨藻红素的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L); p 样液中蕨藻红素的峰面积数值; V 试样最终定容体积,单位为毫升(ml); A 标准溶液中蕨藻红素的峰面积数值; -称取试样的质量,单位为克(g) n 计算结果应扣除空白值,测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留至小数点后1位 重复性 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%
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高效液相色谱法测定蕨藻红素含量GB/T38169-2019

蕨藻红素是一种天然色素，广泛用于食品、医药等领域。为了确保食品质量和安全，需要对蕨藻红素进行含量测定。GB/T38169-2019是我国制定的关于蕨藻红素含量测定的标准方法，其中规定使用高效液相色谱法进行分析。

高效液相色谱法是一种快速、灵敏、准确的分析技术，已经被广泛应用于食品及其他行业。在蕨藻红素含量测定中，采用高效液相色谱法可以有效地提高测定精度和准确性。

在使用高效液相色谱法测定蕨藻红素含量时，需要先准备样品。将待测样品经过处理后，得到蕨藻红素的提取液。然后，将提取液注入高效液相色谱仪中，根据色谱柱的不同特性和操作条件，分离出各种色素成分。通过检测每个色素峰的面积或峰高，可以计算出蕨藻红素的含量。

使用高效液相色谱法测定蕨藻红素含量，具有操作简便、结果稳定可靠等优点。同时，该方法还可以应用于其他天然色素的含量测定。

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