GB/T30931-2014
化妆品中苯扎氯铵含量的测定高效液相色谱法
DeterminationofBenzalkoniumChlorideincosmetics―Highperformanceliquidchromatography
- 中国标准分类号（CCS）Y42
- 国际标准分类号（ICS）71.100.70
- 实施日期2014-11-01
- 文件格式PDF
- 文本页数10页
- 文件大小340.48KB
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化妆品中苯扎氯铵含量的测定高效液相色谱法
国家标准 GB/T30931一2014 化妆品中苯扎氯铵含量的测定 高效液相色谱法 Determinationofbenzalkoniuchorideincosetics Highperformanceliquidehromatography 2014-07-08发布 2014-11-01实施 国家质量监督检监检疫总局 发布 国家标准花管理委员会国家标准
GB/T30931一2014 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草
本标准由轻工业联合会提出
本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口
本标淮起草单位;国家化妆品质量监督检验中心(北京)北京市海淀区产晶质量监督检验所,上海 市日用化学工业研究所
本标准主要起草人刘艳琴,王浩,史海良、杨红梅、郭启雷,潘红艳,李琼、武晓剑、沈敏、钱茵
GB/T30931一2014 化妆品中苯扎氯铵含量的测定 高效液相色谱法 范围 本标准规定了化妆品中苯扎氧铵的高效液相色谱测定方法
本标准适用于膏霜、香波,水剂类等化妆品中苯扎氯铵的测定 本标准方法检出限为30mg/kg,定量限为100mg/kg 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 原理 样品经含0.5%甲酸的甲醇溶液超声提取,旋转燕发富集提取液后，经sCx色谱柱分离,利用二极 管阵列检测器对其进行准确分析,外标法定量,液相色谱-质谱确证
试剂和材料 除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水 4.1甲醇;色谱纯
4.2甲酸;色谱纯
4.3乙晴;色谱纯
4.4乙酸铵
4.5三乙胶
4.6氯化钠 7 冰醋酸
4.850%甲醇水溶液;量取500mL甲醇(4.1)与500mL.水混合
4.90.5%甲酸的甲醉溶液;移取5mL甲酸(4.2)至1000mL容量瓶中,甲醇(4.1)定容
标准样品,苯扎氯锁(n-C,lHC,HnNCl,n-C,HaC,lH,NCl.nCwH-C,H,NCI)标淮样品纯 4.10 度不小于99%
苯扎氯胺标准样品信息参见附录A
4.11标准溶液 4.11.13种苯扎氯铵(n-CeH给-C,HNCl,n-CH-C,HNC1、n-CHs-C,HNCI)标准储备液;各 称取0.5g(精确至0.0001g)n-CH:-C,H.NCI,n-CHg-C,HNCl,n-CH-C,HNCl标准样品 4.10),分别置于100mL容量瓶中,用50%甲醇水溶液(4.8)溶解定容
扎氯锁(nCaHC,H,Ncl.CHC,H,Ncl.aCHC,H,Nc)混合标准工作游液 4.11.2
GB/T30931一2014 分别准确吸取3种标准储备溶液(4.11.1)0.0mL、0.1mL、0.5mL、1.0mL5.0mL、10.0m置于 50mL容量瓶中,用含0.5%甲酸的甲醇溶液(4.9)定容,得到浓度分别为0.00mg/mL,0.01mg/ml、 0.05mg/mL,0.10mg/ml,0.50mg/ml1.00g/ml.的混合标准工作溶液
乙酸铵溶液;称取3.08g乙酸铵(4.4)置于烧杯中,加水溶解并定容至1000mL,加1ml三乙胶 4.12 4.5),用冰醋酸(4.7)调节至pH=4.0,过0.45Am滤膜(4.13),待用 4.13滤膜;0.45Am,有机相
仪器与设备 高效液相色谐仪;配二极管阵列检测器
5.1 5.2串联质谱仪:配有电喷雾离子源
5.3分析天平;感量分别为0.0001g和0.001g 5.4超声波清洗器
5.5旋转燕发仪 5.6具塞比色管:l0ml和25ml
分析步骤 6.1样品制备 6.1.1膏霜、香波类样品 称取0.5g样品精确至0.001g"置于25mL比色管中,用含0.5%甲酸的甲醉溶液(4.9)定容 超 声波提取20min ,经滤纸过滤[如有浑浊或乳化现象,加人约0,2g的氯化钠(4.6)],吸取15ml滤液至 100mL蒸发瓶内,并将其接至旋转器上,于45C水浴中减压蒸僧至干,用3m含0.5%甲酸的甲醇溶 液(4.9)溶解,过0.45um滤膜(4.13),滤液供液相色谱仪分析
6.1.2水剂类样品 称取10样品,精确至0ool
,置于10mL比色管中,用含0.53%甲脱的甲醉溶液(49)定容至刻 度,超声波提取10min,经滤纸过滤,过0.45Am滤膜(4.13),滤液供液相色谱仪分析 6.2测定 6.2.1液相色谱条件 液相色谱测定参考条件如下 a)色谱柱:SCX色谱柱5Am,250mm×4.6mm(i.d.),或性能相当者; D 柱温:25C; e)检测波长:260nm d进样量;20AL; 流动相 e 溶剂A:;乙睛(4.3),溶剂B;乙酸铵溶液(4.12)
液相色谱梯度洗脱条件见表1
GB/T30931一2014 表1液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 乙酸铵溶液/% 乙腊/% 100 15 80 20 22 80 20 22.1 100 6.2.2标准工作曲线绘制 /mL、 分别移取20l浓度为0.00mg/ /ml,0.05mg/ml,0.l0mg/ml,0.50mg/ /ml.0.o1mg/" /mL的混合标准工作溶液(4.11.2),按液相色谱条件(6.2.1)进行测定,以色谱蜂的峰面积为纵 1.00mg 3种苯扎氯铵同系物标淮样品色谱图参见 坐标,对应的溶液浓度为横坐标作图,绘制标准工作曲线
附录B的图B.1
6.2.3定量分析 按液相色谱条件(G.2.1)对待测样液进行测定,外标法定量
待测样液中被测物的响应值应在标淮 工作曲线的线性范围之内
含量高的样品可取适量样品溶液用含0.5%甲酸的甲醇溶液(4.9)稀释后进 行测定 6.3 空白试验 除不称取样品外,均按上述测定条件和步骤进行
结果计算 样品中3种苯扎氯铵含量的计算 7.1 样品中3种苯扎氯铵含量按式(1)计算 ×V×k G X n 式中: 样品中每种苯扎氯铵的含量(即xea.Xe,Xe),单位为毫克每千克(mg/kg) X -样品测定液中每种苯扎氧铵的浓度,单位为微克每毫升(4g/mL); c 样品定容体积,单位为毫升(mL); 乘积因子,对于水剂类化妆品,k=1;对于膏霜,香波类化妆品,k=0.2. 样品的质量,单位为克(g).
1 计算结果应扣除空白值,计算结果保留至小数点后两位
7.2样品中3种苯扎氧铵总量的计算 样品中了种桨扎孤钱总量按式(2)计算 X=Xc十X十Xc 式中: X -样品中3种苯扎氧铵的总含量,单位为毫克每千克(mg/kg);
GB/T30931一2014 样品中n-CH-C,HaNCI的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); Xc12 Xce -样品中n-CH-C,HNCl的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); X 样品中n-CH-C,HNCl的含量,单位为毫克每千克(mg/kg) XcI6 计算结果保留到小数点后两位
定性确证 测定过程中如果有阳性结果,应根据保留时间和紫外光谱图初步确证,对于仍有疑问的可采用液相 色谱-质谱法进一步确证
液相色谱-质谱法测定条件参见附录C
检出限和定量限 本方法检出限为30m/kg,定量限为100mg/ke g
10 回收率与精密度 在添加浓度100mg/kg1000mg/kg范围内,回收率在95.4%104.5%之间,相对标准偏差小 于10%
11允许差 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%
GB/T30931一2014 附 录A 资料性附录 苯扎氯胺标准样品信息 表A.13种苯扎氧铵的中文名称,英文名称,cAs登录号分子式、相对分子质量 序号 中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子质量 Benzyldimethyldodecylam 十二基二甲基芹基氯化铵 139-07-1 CHCIN 339.99 moniumchloride Benzydimethyltetradecy 十四烧基二甲基节基氧化铵 139-08-2 CHgCIN 368,05 lammoniumchloride Benzyldimethylhexadeeyl 十六烧基二甲基节基氯化铁 caH.cIN 122-18-9 396,10 ammoniumchloride 图A.1十二炕基二甲基芒基氯化铵 C 图A.2十四炕基二甲基茉基氯化铵 图A.3十六烧基二甲基节基氧化铵
GB/T30931一2014 B 附 录 资料性附录 标准样品色谱图 mAw 40H 5 声 20- 着 -20 5 1.5 2.5 1min 说明 C-BAc(19.01nmin): C4-BAC(19.34min); Cg-BAc(19.76min)
图B.13种苯扎氯铵混合标准样品色谱图
GB/T30931一2014 附录 C 资料性附录) 液相色谱-质谱法参考条件 C.1液相色谱条件 液相色谱参考条件如下 色谱柱:C柱;3.5um,50mm×2.1mm(i.d.),或性能相当者 a b)流动相溶剂A;甲醇,溶剂B:0.1%甲酸水溶液
液相色谱梯度洗脱条件见表c.1 流速;0.25mL/min c) d进样量;2L; 柱温;25C
表c.,1液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 甲醇/% 0.1%甲酸水溶液/% 50 50 95 95 10 50 50 10.l1 C.2质谱条件 质谱多考条件如下 a)电离方式;电喷雾电离,正离子模式; b监测方式,多反应监测(MRM) e)雾化气压力;275.8kPa; d)干燥气温度:340C; 干燥气流速:8L/min: e 倍增电压;0V f 定量离子对、定性离子对、碎裂电压和碰撞能量见表c.2
g 表c.23种苯扎氧铵的定量离子对、定性离子对,碎裂电压和碰撞能量 名称 定量离子对 定性离子对 碎裂电压/V 碰撞能量/V 91.1/304.2; cwBAc 60 35/20 91,1/304,2 212.1/304.2 91.1/332.2; ciBAC 91.1/332.2 60 30/20 240.2/332.2 91.1/360,2 ce-BAC 60 30/20 91.1/360.2 268.3/360.2
GB/T30931一2014 c.3定性确证 被测组分选择1个母离子,2个以上子离子,在相同实验条件下,样品中待测物质的保留时间与标 准溶液中对应的保留时间偏差在士2.5%之内;且样品中被测组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标 准溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较,偏差不超过表C.3规定的范围,则可判定为样品中存在 对应的待测物
3种苯扎氯铵混合标准样品的选择离子质量色谱图见图C.1 表C.3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 >5o >205o >1020 相对离子丰度/% 10 允许的最大偏差/% 士20 士25 士30 士50 coumts x10 x10 x10 x10 i0 12 13 5 i6 18 i9 20 t/min 说明: 3种苯扎氧铵混合标准样品的总离子流图 C-BAC的多反应监测质量色谱图; Cu-BAC的多反应监测质量色谱图 C6-BAC的多反应监测质量色谱图
图c.13种苯扎氯铵混合标准样品Lc-Ms/NIs多反应监测质量色谱图
高效液相色谱法测定化妆品中苯扎氯铵含量
苯扎氯铵是一种常用的抗菌剂，广泛应用于化妆品和个人护理产品中。然而，苯扎氯铵在一定条件下会对皮肤和眼睛造成刺激和伤害。因此，化妆品中苯扎氯铵的含量必须得到有效控制。
传统的含量测定方法主要包括滴定法和比色法。这些方法存在着操作复杂、准确度低等缺点。相比之下，高效液相色谱法具有分离准确、灵敏度高、操作简便等优点，已经成为了化妆品中苯扎氯铵含量测定的首选方法。
GB/T30931-2014是中国国家标准化管理委员会颁布的关于高效液相色谱法测定化妆品中苯扎氯铵含量的标准。该标准规定了样品制备、色谱条件、检测方法和结果计算等方面的具体要求。
在具体操作中，化妆品样品需要先进行提取和纯化处理，然后通过高效液相色谱仪对苯扎氯铵进行分离和检测。根据检测结果，可以准确计算出样品中苯扎氯铵的含量。
需要指出的是，在使用高效液相色谱法测定化妆品中苯扎氯铵含量时，必须注意适当控制实验条件，避免外界因素对结果的干扰。另外，为确保测定结果的可靠性，建议在实验中同时进行多次测量，并取平均值作为最终结果。
总之，高效液相色谱法是一种快速、准确的化妆品中苯扎氯铵含量测定方法，已经得到广泛应用。但需要注意的是，在具体操作中必须遵守相关标准和规范，以确保测定结果的可靠性。
