食品中丙酸钠、丙酸钙的测定高效液相色谱法

食品中丙酸钠、丙酸钙的测定高效液相色谱法

国家标准 GB/T23382一2009 食品中丙酸钠、丙酸钙的测定 高效液相色谱法 Determinationofsodiupropionateandealciumpropionateinfoods一 Hlighperformanceliquidchromatographymethod 2009-04-08发布 2009-05-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管蹬委员会国家标准
GB/T23382一2009 前 言 本标准的附录A为资料性附录 本标准由标准化研究院提出并归口 本标准由国家农副加工产品及白酒质量监督检验中心(山西省食品质量监督检验中心)负责起草 本标准主要起草人:梁宝爱、刘军、张素娟、冯晓斌,武向勇、赵娅鸿、孙丽萍,胡晓江、刘宪萍
GB/T23382一2009 食品中丙酸钠、丙酸钙的测定 高效液相色谱法 范围 本标准规定了食品中丙酸钠、丙酸钙高效液相色谱的测定方法 本标准适用于豆类制品、生湿面制品、面包、糕点、醋、酱油等食品中丙酸钠,丙酸钙的含量测定 本标准的方法检出限;0.03g/kg,方法定量限:0.10g/kg 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准 GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法(Is03696:1987,MOD) 原理 样品中丙酸钠钙)酸化后转化为丙酸,经超声波水浴提取或水蒸气燕僧,收集后调pH值,经高效 液相色谱测定,外标法定量 试剂与材料 除另有规定外,试剂均为分析纯 4.1色谱用水应符合GB/T6682一2008规定的一级水,其他用水符合GB/T6682-2008规定的三 级水 4.2磷酸 4.3磷酸氢二铵 4.4 硅油 4.5磷酸溶液(1mol/L);在50mL中加人53.5nmL磷酸,混匀后,加水定容至1000mL 4.6磷酸氧二铵溶液(1.5g/L);称取磷酸氢二铵1.5g,加水溶解定容至1000mL 4.7丙酸钠钙)或丙酸标准品;纯度99% 4.8标准储备液(10mg/ml);准确称取丙酸钠1.30g或丙酸钙1.26g或丙酸1g(精确至0.000lg) 用水定容至100mL.配制成丙酸含量为10mg/mL的标准储备液 于4C冰箱内贮存,有效期3个月 4.9微孔滤膜;0.45m,水相 4.10pH试纸 仪器和设备 高效液相色谱(HPIC)仪;配有紫外检测器或二极管阵列检测器 5.2天平;感量0.0001只和0.01g 5.3超声波水浴 5.4离心机转速不低于4000r/min. 5.5组织捣碎机
GB/T23382一2009 5.6具塞塑料离心管;50ml 5.7水蒸气蒸僧装置;500mL 5.8pH计 分析步骤 6.1样品制备 固体样品经组织捣碎机捣碎混匀后备用;液体样品摇匀后备用 6.2试样处理 蒸憎法:准确称取25g(精确至0.01g)试样(6.l),置于500mL蒸馏瓶中,加人100ml水,再 用50ml水冲洗容器,转移到蒸馏瓶中,加lmol/L磷酸溶液(4.5)20ml,2滴一3滴硅油,进行水蒸气 蒸僧,将250ml容量瓶置于冰浴中作为吸收液装置,待蒸至约240ml 时取出在室温下放置 30min,用1mol/L磷酸溶液(4.5)调pH值至3左右,加水定容至刻度,摇匀经0.45Am微孔滤膜过 滤后,待液相色谱测定 直接浸提法(适用于面包、糕点)准确称取5g(精确至0.01g)试样(G.1)至100ml烧杯中,加 水20mL,加人1mol/L磷酸溶液(4.5)0.5mL,混匀,经超声浸提10nmin后用1mol/L磷酸溶液 (4.5)调pH值至3左右转移试样至50mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀 将试样全部转移至 50mL具塞塑料岗心管中,以不低于400r/mn岗心10mmm.取上请液,经0.45pm微孔滤膜过滤后 待液相色谱测定 6.3测定 6.3.1高效液相色谱条件 色谱柱:C柱,4.6mm×250nmm,5m或等效色谱柱 a) 流动相,l.5g儿磷酸复二绞游液(4.6),用1mol儿磷酸溶液(4.5)调pH值至2.73.5使 b 用时配制);经0.45m微孔滤膜过滤 c)流速:1.0mL/min d 柱温;25C 进样量;20L e) f 波长:214nmm g)色谱柱清洗参考条件;实验结束后,用10%甲醇清洗1h,再用100%甲醇清洗1h 6.3.2标准曲线绘制 6.3.2.1蒸法;准确吸取标准储备液(4.8)0.5,1.0,2.5、5.0,7.5、10.0,12.5ml置于500ml蒸 瓶中,其他操作同6.2.1样品前处理,其丙酸标准溶液的最终浓度分别为0.02、0.04、0.1、0.2,0.3 0.4,0.5mg/mL,经0.45m微孔滤膜过滤,浓度由低到高进样,以浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标， 绘制标准曲线 6. .3.2.2直接浸提法;准确吸取5.0mL标准储备液(4.8)于50ml容量瓶中,用水稀释至刻度,配制 成浓度为1.0mg/mL标准工作液 再准确吸取标准工作液0.25、0.5、1.0,2.0,3.0、4.0,5.0mL至 l0t ml容量瓶中,分别加人lmolL磷酸裕液(4.5)0.2 2ml,用水定容至10ml混匀 其丙酸标准溶 液的最终浓度分别为0.025,0.05,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5mg/mL,经0.45Am微孔滤膜过滤,浓度由低 到高进样,以浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线 在上述色谱条件下,根据保留时间定性,外标峰面积法定量 高效液相色谱图参见图A.1 6.3. 3 定量测定 待测样液中丙酸响应值应在标准曲线线性范围内,超出浓度线性范围则应稀释后再进样分析 6 结果计算 样品中丙酸钠(钙)含量(以丙酸计)按式(l)进行计算
GB/T23382一2009 exY1 = 1 X m×1000 式中 样品中丙酸钠钙)含量(以丙酸计),单位为克每千克(g/kg);如以丙酸钠计乘以1.2967,以 丙酸钙计乘以1.2569; 由标准曲线得出的样液中丙酸的浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL); -样液最后定容体积,单位为毫升(mL) 样品质量,单位为克(g); m1 稀释倍数 计算结果保留三位有效数字 允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10% 回收率 蒸僧法:在添加浓度0.25g/kg5.0g/kg范围内,回收率在90.0%~1l0.0%之间,相对标准偏差 小于5%. 直接浸提法;在添加浓度0.25g/kg~5.0g/kg范围内,回收率在80.0%110.0%之间,相对标准 偏差小于5%.
GB/T23382一2009 附录A 资料性附录 丙酸标准物质的液相色谱图 波长=214nm mAU 0 丙酸 min 10 图A.1丙酸标准物质的液相色谱图