GB/T31270.10-2014
化学农药环境安全评价试验准则第10部分：蜜蜂急性毒性试验
Testguidelinesonenvironmentalsafetyassessmentforchemicalpesticides―Part10:Honeybeeacutetoxicitytest
- 中国标准分类号（CCS）B13
- 国际标准分类号（ICS）65.100
- 实施日期2015-03-11
- 文件格式PDF
- 文本页数8页
- 文件大小323.03KB
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化学农药环境安全评价试验准则第10部分：蜜蜂急性毒性试验
国家标准 GB/T31270.11一2014 化学农药环境安全评价试验准则 第11部分家蚕急性毒性试验 Iesguidelinesonevirmmentalsafetyassesmemtforchemieal pestieides一Part11:Silkwormacutetoxieitytest 2014-10-10发布 2015-03-11实施 国家质量监督检监检疫总局 发布 国家标准花管理委员会国家标准
GB/I31270.11一2014 前 言 GB/T31270(化学农药环境安全评价试验准则》分为21个部分 -第1部分:土壤降解试验; 第2部分;水解试验; 第3部分:光解试验; 第4部分;土壤吸附/解吸试验 第5部分 :土壤淋溶试验; 第6部分:挥发性试验; 第 7部分;生物富集试验; 部分;水-沉积物系统降解试验; 第 鸟类急性毒性试验; 第 10部分:蜜蜂急性毒性试验 部分:家蚕急性毒性试验; 部分:鱼类急性毒性试验; 第 部分;蚤类急性活动抑制试验 部分:藻类生长抑制试验; 15部分;蚯蚓急性毒性试验; 第 16部分;土壤微生物毒性试验; 第 部分天敌赤眼蜂急性毒性试验， 第 17 第 18部分;天敌两栖类急性毒性试验; 第19部分:非靶标植物影响试验， 第20部分;家畜短期饲喂毒性试验 第21部分;大型甲壳类生物毒性试验 本部分是GB/T31270的第11部分
本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草
请注意本文件的某些内容可能涉及专利
本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任
本部分由农业部提出并归口 本部分负责起草单位;农业部农药检定所、环保部南京环境科学研究所 本部分主要起草人;张燕,姜辉、杨亚哲、周军英,王开运,刘勇、王会利、张晶
GB/I31270.11一2014 化学农药环境安全评价试验准则 第11部分:家蚕急性毒性试验 范围 GB/T31270的本部分规定了浸叶法和熏蒸法测定化学农药对家蚕急性毒性试验的材料、条件、操 作、质量控制、数据处理试验报告等的基本要求
本部分适用于为化学农药登记而进行的家蚕浸叶法毒性试验和熏蒸法毒性试验,其他类型的农药 可参照使用 本部分不适用于易挥发和难溶解的化学农药
术语和定义 下列术语和定义适用于本文件
2.1 半致死浓度medianlethalconcentration 在浸叶法毒性试验中,引起50%供试生物死亡时的供试物浓度,用Lca表示
注:单位为mgai;./L 2.,2 供试物 testsubstance 试验中需要测试的物质
2.3 化学农药ehemiealpestieide 利用化学物质人工合成的农药
其中有些以天然产品中的活性物质为母体,进行仿制、结构改造， 创新而成,为仿生合成农药
同义词;有机合成农药synthetie orgamicpesticde. [NY/T1667.1一2008,定义2.3.1 technicalaterial 原药 在制造过程中得到的有效成分及杂质组成的最终产品,不能含有可见的外来物质和任何添加物,必 要时可加人少量的稳定剂
[NY/T1667.2一2008,定义2.5.1] 2.5 制剂formlatioprduet 由农药原药(或母药)和助剂制成使用状态稳定的产品
NY/T1667.22008,定义2.4] 2.6 有效成分aetiveingredient;a.i. 农药产品中具有生物活性的特定化学结构成分 [NY/T1667.2一2008,定义3.1]
GB/I31270.11一2014 参比物质 referencesubstanceS 在测试中为证实或否定供试物的某种特性或判断测试系统有效性而使用的化学物质或混合物
试验概述 3.1 方法概述 家蚕急性毒性试验包括浸叶法毒性试验方法和熏蒸法毒性试验方法,根据农药登记管理法规及其 他规定选择相关方法进行试验
3.2浸叶法毒性试验 采用不同浓度的药液浸溃桑叶,脉晾干后饲喂家蚕
整个试验期间饲喂处理桑叶,观察24h、48h、 72h,96h后受试家蚕的中毒症状及死亡情况,试验结束后对数据进行统计分析,并计算半致死浓度 LC值
3.3熏蒸法毒性试验 针对卫生用药模拟室内施药条件进行的试验,应在满足试验要求的熏蒸试验装置或熏蒸室内进行
熏燕试验装置或熏蒸室应在满足试验要求的前提下,按照推荐用药量设计相关参数
供试物在试验装 置或熏蒸室中定量燃烧或电加热),从熏蒸开始,按0.5h、2h、4h,6h,8h观察记录熏蒸试验装置内家 蚕的毒性反应症状,8h后将试验装置内的家蚕取出,在家蚕常规饲养条件下继续观察24h及48的 家蚕死亡情况
试验方法 4.1材料和条件 4.1.1供试生物 试验用家蚕(Bombyrmori)品种选用菁松×皓月,春蕾×镇珠,苏菊×明虎,或其他有代表性的品 系
以二龄起蚕为毒性试验材料
4.1.2供试物 供试物应使用农药纯品、原药或制剂
难溶于水的可用少量对家蚕毒性小的有机溶剂、乳化剂或分 散剂助溶,其用量不得超过0.1mLg)/L
4.1.3主要仪器设备 主要仪器设备如下 人工气候室; 电子天平 -培养皿; 熏蒸箱等
4.1.4试验条件 蚁蚕饲养和试验温度为(25士2)C,相对湿度为70%85%
GB/I31270.11一2014 4.2试验操作 4.2.1浸叶法 4.2.1.1预试验 按正式试验的条件,以较大的间距设置3个5个浓度组,通过预试验求出家蚕最高全存活浓度和 最低全致死浓度
4.2.1.2正式试验 根据预试验确定的浓度范围按一定比例间距(几何级差应控制在2.2以内)设置5个7个浓度组， 每组20头蚕,并设空白对照,加溶剂助溶的还需设溶剂对照
对照组和每一浓度组均设3个重复
在 培养皿内饲养二龄起蚕,用不同浓度的药液完全浸溃桑叶10s,晾干后供蚕食用
整个试验期间饲喂处 理桑叶,观察并记录24h、48h、72h和96h试验用家蚕的中毒症状及死亡情况
试验结束后对数据进 行数理统计,计算半致死浓度LC值及95%置信限
若供试物为昆虫生长调节剂,且试验72h一96h之间家蚕的死亡率增加10%以上,应延长观察时 间,直至24h内死亡率增加小于10%
4.2.1.3限度试验 设置上限浓度2000mga.i.L,即在供试物达2000mgai./L时仍未见家蚕死亡,则无需继续 进行试验
若供试物溶解度小于2000mga.i.L,则采用其最大溶解度作为上限浓度
4.2.2熏蒸法 熏蒸试验可在熏燕箱或其他可满足试验要求的试验装置内进行
供试物在试验装置内定量燃烧 或电热片加热),从熏蒸开始,按0.5h、,2h、4h、6h、8h观察记录熏蒸试验装置内家蚕的毒性反应症 状,8h后,将熏蒸试验装置内的家蚕取出,在家蚕常规饲养条件下继续观察24h及48h的家蚕死亡情 况
每个处理组设置9个重复,同时设置空白对照(设3个重复)
观察记录家蚕摄食情况(减少或拒 食)、不适症状(逃避、昂头、晃头甩头、扭曲挣扎、吐水等)及死亡情况等
4.3数据处理 4.3.1统计分析方法的选择 可采用寇民法、直线内插法或概率单位图解法计算每一观察时间(24h.48h、.72h,396h)的家蚕浸 叶法毒性的半致死浓度LC0,也可采用数据统计软件进行分析和计算
4.3.2寇氏法 用寇氏法可求出家蚕在24h,48h,72h和96h的LC值及95%置信限
LC的计算见式(1): loglC=X一i(习P一0.5) 式中 最高浓度的对数; 相邻浓度比值的对数; 习P 各组死亡率的总和(以小数表示). 95%置信限的计算见式(2):
GB/I31270.11一2014 95%置信限=logLC0士1.96slogLC 标准误的计算见式(3): 应 slogLC=i 式中: -1个组的死亡率; -1一p; 各浓度组家蚕的数量
4.3.3直线内插法 采用线性刻度坐标,绘制死亡百分率对试验物质浓度的曲线,求出50%死亡时的Lc值 4.3.4概率单位图解法 用半对数纸,以浓度对数为横坐标,死亡百分率对应的概率单位为纵坐标绘图
将各实测值在图上 用目测法画一条相关直线,从直线中读出致死50%的浓度对数,估算出Lc值
4.4 质量控制 质量控制条件包括 -对照组死亡率不超过10%; -实验室内应定期(蚕卵每批一次,同批蚕卵至少每两个月一次)进行参比物质试验,推荐参比物 质为乐果
试验报告 试验报告应包括下列内容: 供试物的信息,包括供试农药的通用名化学名称、结构式,CAs号、纯度,基本理化性质,来 源等 供试生物的名称,来源、大小及饲养情况 试验条件,包括试验温度、试验方法等 试验药液的浓度,24h、48h、72h及96h的1.C值(浸叶法)或8h、24h、48h的死亡率(熏燕 法)和95%置信限,并给出所采用的计算方法; 对照组家蚕是否出现死亡及异常反应; 观察到的毒性效应,如受试家蚕的任何不正常的行为,中毒症状等; 对家蚕的毒性等级划分参见附录A
GB/I31270.11一2014 附 录A 资料性附录 农药对家蚕毒性等级划分 按农药对家蚕急性浸叶法的毒性半致死浓度LCa(96h),将农药对家蚕的急性毒性分为四级,见 表A.1
表A.1农药对家蚕的毒性等级划分 毒性等级 L.Cn96h)/mga.i./L) 剧毒 LCa<0.5 高毒 0.5
GB/I31270.11一2014 参 考 文 献 [1]NY/T1667.1一2008农药登记管理术语第1部分:基本术语 [2]Y/T1667.2一2008农药登记管理术语第2部分产品化学 3幻 OECD(1998a).Guideline213:Honeybees，acuteoraltoxicitytest，OECDGuidelinesfor heTestingfehemieals [打 O)ECD(1998b).Guideline214:Honeybees，acutecontacttoxicitytest，OECDGuidelines fortheTestingofchemicals. [5]oECD(1992).Guidelines.203;Fish，acute toxieitytest，OECDGuidelinesortheTestin ing ofChemicals []蔡道基.农药环境毒理学研究
北京;环境科学出版社.1999. []NY/T15A.14一208农药室内生物测定试验准则杀虫剂第1部分，浸叶法 []GB/T13917.10一2009农药登记用卫生杀虫剂室内药效试验及评价第10部分;模拟 现场
GB/T31270.10-2014蜜蜂急性毒性试验：化学农药环境安全评价试验准则第10部分
随着农业生产的不断发展，化学农药的使用越来越广泛。但是，农药的使用也会对环境造成一定程度的污染和危害，特别是对蜜蜂这种重要的传粉昆虫可能造成严重影响。因此，在化学农药的安全评价过程中，蜜蜂急性毒性试验是非常重要的一项内容。GB/T31270.10-2014标准规定了蜜蜂急性毒性试验的具体内容和方法。
试验内容
蜜蜂急性毒性试验主要是针对化学农药对蜜蜂的毒性作用进行评估。试验内容包括了在一定浓度范围内，观察蜜蜂在一定时间内的存活情况、飞行能力和行为特征等。根据试验结果，可以评估出该农药对于蜜蜂的急性毒性程度。
试验方法
GB/T31270.10-2014标准中规定了两种蜜蜂急性毒性试验方法：
1. 小蜜蜂急性毒性试验方法
此方法适用于小蜜蜂这类社会性蜜蜂的急性毒性试验。具体操作时，将不同浓度的农药溶液涂在玻璃板或塑料片上，然后让蜜蜂在其上行走，并观察蜜蜂的死亡情况。根据试验结果计算得出LC50值，即半数致死浓度。
2. 大蜜蜂急性毒性试验方法
此方法适用于大蜜蜂这类孤居性蜜蜂的急性毒性试验。具体操作时，将不同浓度的农药溶液喷洒在蜜蜂的饲料和植物上，并观察蜜蜂的死亡情况。根据试验结果计算得出LC50值。
环保意义
蜜蜂是重要的传粉昆虫，对于农业生产的发展和维护生态平衡具有重要作用。化学农药的使用可能会对蜜蜂群体造成严重影响，因此开展蜜蜂急性毒性试验对于保护蜜蜂和维护生态环境具有重要意义。
同时，开展蜜蜂急性毒性试验也有助于指导化学农药的使用和管理，减少其对环境的影响。因此，在进行化学农药环境安全评价时，必须要进行蜜蜂急性毒性试验，并根据试验结果制定相应的措施，确保化学农药在使用过程中不会对蜜蜂和其他生态环境造成损害。
总之，GB/T31270.10-2014标准中关于蜜蜂急性毒性试验的规定，为化学农药环境安全评价提供了重要依据。开展蜜蜂急性毒性试验并根据试验结果采取相应的措施，有助于保护生态环境、维护生态平衡，促进可持续发展。
