食品中无机砷的测定液相色谱电感耦合等离子体质谱法

食品中无机砷的测定液相色谱电感耦合等离子体质谱法

国家标准 GB/T23372一2009 食品中无机碑的测定 液相色谱-电感耦合等离子体质谱法 Determinationofinorganie-arsenieinfoods一 Liquidchromatography-induetivecouplelplasmamassspeectrometer 2009-03-16发布 2009-05-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管蹬委员会国家标准
GB/T23372一2009 前 言 本标准的附录A为资料性附录 本标准由标准化研究院提出并归口 本标准起草单位;国家食品质量安全监督检验中心 本标准主要起草人:林立、陈玉红、陈光、杨彦丽、周谱非、王浩、杨红梅
GB/T23372一2009 食品中无机碑的测定 液相色谱-电感耦合等离子体质谱法 范围 本标准规定了液相色谱和电感耦合等离子体质谱测定食品中无机呻[亚酸根As()和呻酸根 As(V]的方法 本标准适用于食品中无机呻的测定 本标准的方法检出限为As()0.002mg/kg,As(V)0.004mg/kg 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准 GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法(ISO3696:1987,MOD) 原理 样品中无机呻经提取、净化后,用液相色谱仪对呻的各种形态进行分离,并直接导人电感耦合等离 子体质谱仪测定,与标准样品进行比较,外标法定量 试剂 除非另有说明,在分析中所使用试剂均为优级纯,用水为GB/T6682-2008中规定的一级水 4.13%(体积分数)乙酸溶液;取3.0mL乙酸置于适量水中,再稀释至100mL 4.20.15%(体积分数)乙酸溶液;取0.15ml乙酸置于适量水中,再稀释至100mL 4.330%双氧水 无水乙醇 流动相(A相 2mmol/磷酸二氢钠:准确称取0.3120g磷酸二氢钠用水定容至1000mL 4.5.210mmol/L无水乙酸钠;准确称取0.8203g无水乙酸钠用水定容至1000ml 4.5.30.2mmol/1乙二胺四乙酸二钠;准确称取0.0746g乙二胺四乙酸二钠用水定容至1000ml 3mmol/L硝酸钾;准确称取0.3030g硝酸钾用水定容至1000ml 4.5.54%氢氧化钠水溶液;称取氢氧化钠4g用水定容至100nml 标准储备液;呻酸根、亚呻酸根、呻甜菜碱、一甲基呻、二甲基呻(以下简称五种呻),每种标准储备 液的浓度为54g/mL,贮存于4C冰箱中,有效期3个月 五种呻标准工作液:吸取五种呻的标准储备液(4.6)2.0ml到10ml的容量瓶中,配得混合标准 工作液浓度为1.0mg/L 分别吸取混合标准工作液0.0,0.1,0.2,0.5、1.0ml.于一组100ml的容量瓶 mL 中,用0.15%的乙酸溶液(4.2)定容至刻度,得到单元素浓度分别为0.0,0.001,0.002,0.005,0.0104g 的混合标准溶液 使用时现配 4.8滤膜;0.45Am,水相 ,3 ml 该柱使用前采用5mL甲醉和 4.9聚二乙烯基苯聚合物反相填料(或等效的脱脂柱):250mg
GB/T23372一2009 10mL水活化,保持萃取柱处于湿润状态 4.10石墨化炭黑小柱;500mg,6ml 该柱使用前采用10mL 甲醇和20ml水活化,保持萃取柱处 于湿润状态 仪器 5.1液相色谱仪(LC):二元梯度泵 5.2电感稠合等离子体质谱仪(CPMS). 5.3pH计 5.4分析天平;感量0.o1g和0.0001g 5.5粉醉机 5.6涡旋混合器 5.7恒温水浴锅 5.8超声波清洗器 5.9高速冷冻离心机;转速不小于8000r/min. 分析步骤 提取和净化 6 植物性固体样品 6 试样用粉碎机粉碎 准确称取样品1g一4g(精确至0.0lg)(海带、紫菜等海产品类植物样品1迟" 谷物类样品2g,蔬菜类样品4g),加人38mL水,涡旋混匀后,超声萃取40min,加人3%乙酸溶液 (4.12ml混匀沉淀蛋白,于4C冰箱中静置5nmin后,取上清液过0.45wm过滤膜(4.8)于1.5ml 离心管中,以8000r/nmin转速于4C离心10min,吸取上清液注人液相色谱仪进行分析 蔬菜等色素 较深的样品要过石墨化炭黑小柱(4.10)去除颜色 海带、紫菜等样品萃取后,可在过滤前的溶液中加人 0.2mL双氧水(4.3),将As(皿)氧化为As(V) 同时制备试剂空白溶液 6.1.2动物性固体样品 试样用粉碎机粉碎 准确称取贝类及虾蟹类等海产品、乳粉,畜禽肉类样品2g(精确到0.01g),加 人38ml水,涡旋混匀后,超声萃取40min,加人3%乙酸溶液(4.1)2ml混匀沉淀蛋白,于4C冰箱中 静置5min后,取上清液过0.45m过滤膜(4.8)于1.5m离心管中,以8000r/min转速于4C离心 10nmin,吸取上清液注人液相色谱仪进行分析 油脂含量高的样品过聚二乙烯基苯聚合物反相填料的 样品前处理柱(4.9)去除油脂 同时制备试剂空白溶液 6.1.3液体样品 取5.0m白酒类样品在80C下挥干酒精,用水定容至10m 比色管中,直接上机进行检测 啤 酒和乳制品等液体样品称取10g,加人水称重至38g精确到0.01g,涡旋混匀后,超声萃取20min, 加人2.0g(精确到0.01g)3%乙酸溶液(4.1)混匀沉淀蛋白,于4C冰箱中静置5min后,取上清液过 0.45Am过滤膜(4.8)于1.5mL离心管中,以8000r/min转速在4C下离心10nmin,吸取上清液注人 液相色谱仪进行分析 乳制品过聚二乙烯基苯聚合物反相填料的样品前处理柱(4.9)去除油脂 同时 制备试剂空白溶液 6 液相色谱分离条件 ×4 6.2.1色谱柱参数:阴离子保护柱lonPacAG19(50mm mm)或相当者;阴离子分析柱lonPacAs19 250mm×4 mm)或相当者 6 流动相:A相组成(10mmol/L 无水乙酸钠,3mmol/L 硝酸钾,2mmol/L 磷酸二氢钠 0 mmo ol/L乙二胺四乙酸铁钠,4%氢氧化钠水溶液调pH=10.7) B相组成(无水乙醇
GB/T23372一2009 A十B99+1) 6.2.3流速:1.0mL/min. 进样量;5l一50L(视样品中无机呻含量而定)》 6.3电感糯合等离子体质谱参考条件 积分时间0.5 功率:1550w 雾化器;同心雾化器,自动提升 载气流量:0.60L/min1.20L/min. 辅助气流量:与载气流量的总和保持在1.0L/" min~1.2L/min之间 采样深度;9.5mn 采集质量数:呻75 灵敏度;中质量数>300Meps/mg/L) 进样管内径:0.2mm 载气:氯气,纯度>99.999% 色谱柱与ICP-MS相联的管线距离不超过0.5m 测定 取样品处理液和标准工作液各5,L(或相同体积)分别注人液相色谐仪进行分离,电感稠合等离子 体质谱仪进行检测 以其标准溶液峰的保留时间定性,以其峰面积求出样液中被测物质的含量,供计 算 五种呻标准样品色谱图参见附录A 结果计算 食品中无机呻含量(mg/kg)的计算见式(1): 雪 X= 一A)×V×1000/m×1000] 式中: 试样中无机元素[As(皿)和As(V)的总和]的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); 测定用试样液中无机呻[As(皿)或As(V]的含量,单位为毫克每升mg/L); 试剂空白液中无机呻[As(I)或As(V]的含量,单位为毫克每升(mg/L); 试样处理液的总体积,单位为毫升(mL); 试样质量,单位为克(g) 77 计算结果保留三位有效数字 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%
GB/T23372一2009 附录 A 资料性附录 五种碑标准样品色谱图 AsB Cps 13oo 12000 DMA 11000 10000 9000 Asm 8000 7000 MMA 6000 5000 4000 AsV 3000 2000 1000 1.0o 2.00 3.o0 4.0o 5.oo 6.007.00 8.0o 9.0010.00 min 图A.1碑甜菜碱(AsB)、二甲基呻(DMA、亚呻酸根(As爪 -甲基碑(MIMIA,神酸根(AsV)五种神标准样品色谱图