国家标准 GB/T35803一2018 化妆品中禁用物质尿刊酸及其乙酯的测定高效液相色谱法 Determinationofprohibiteduroeanieacidanditsethylesterincosmeties- Highperformaneeliquidchromatography 2018-02-06发布 2018-09-01实施国家质量监督检验检疫总局发布国家标准化管理委员会国家标准
GB/T35803一2018 引言本标准的被测物质是我国《化妆品安全技术规范》规定的禁用物质禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质《化妆品安全技术规范》规定:若技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时,应进行安全性风险评估,确保在正常、合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害目前我国尚未规定这些物质的限量值,本标准的制定,仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法
GB/T35803一2018 化妆品中禁用物质尿刊酸及其乙酯的测定高效液相色谱法范围本标准规定了化妆品中禁用物质尿刊酸及其乙酯的高效液相色谱测定方法本标准适用于膏霜类,水剂类.唇膏类,散粉类,香波类化妆品中尿刊酸及其乙酯的测定本标准对尿刊酸及其乙酯检出限为2mg/kg,定量限为5mg/kg 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3 原理试样经溶剂超声提取后离心,上清液经氨吹定容过滤后,以高效液相色谱进行测定,外标法定量,液相色谱-质谱确认试剂和材料除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水 4.1甲醇;色谐纯 4.2四氢吠喃 43氯化钠 4.4四丁基嗅化铵 4.5尿刊酸标淮品;分子式c,HN.O.,cAs号104-98-3,纯度不小于98%,中文名称、英文名称、相对分子质量、结构式参见附录A中表A.1 4.6尿刊酸乙酯标准品;分子式C.,HN,O.,CAs号27538-35-8,纯度不小于97%,中文名称、英文名称、相对分子质量、结构式参见附录A中表A.1 4.710%甲醇水溶液;量取10mL甲醇(4.1)和90ml.水,混匀后备用 0.005mol/L四丁基澳化铵溶液;准确称取四丁基澳化铵(4.4)0.805g(精确至0.0001g).置于 4.8 500ml容量瓶中,用水溶解并定容至刻度 .9尿刊酸及其乙酯标准储备液;分别称取尿刊酸标准品(4.5)及尿刊酸乙酯标准品(4.6)各10mg(精确至0.0001g),分别置于10ml容量瓶中,用10%甲醇水溶液(4.7)溶解并定容至刻度,摇匀,配制成浓度为1000mg/L的标准储备液,于4保存,可使用三个月 4.10尿刊酸及其乙酯混合标准储备液;分别准确移取尿刊酸及其乙酯标准储备液(4.9)各1ml于 /L 0ml容量瓶中,用10%甲醇水溶液(4.7)稀释至刻度,该溶液中尿刊酸及其乙酯的浓度均为100mg/
GB/T35803一2018 5 仪器和设备 5.1高效液相色谱(HPLC)仪:配有紫外检测器或二极管阵列检测器 5.2液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)仪:配有电喷雾离子源(ESI) 5.3分析天平;感量为0.0001g和0.001g 5.4离心机:转速不低于8000r r”/min 5.5超声波清洗器 5.6氮吹仪 5.7具塞塑料离心管:10ml 5.8带刻度氮吹管;10ml 5.9微孔滤膜:0.45m,材质为聚四氟乙烯 6 分析步骤 6.1样品处理 6.1.1膏霜类水剂类、散粉类及香波类样品称取02g(精确至0.ol2)试样置于10ml具塞塑料离心管(5.7)巾,加人10ml甲脖(.1)摇匀,超声提取20min,8000r/min离心15min.将上清液转移至带刻度氮吹管(5.8)中，缓慢氮吹至 lmL.,加人9mL水,混匀,经0.454m微孔滤膜过滤,供高效液相色谱测定 6.1.2唇膏类样品称取0.2g(精确至0.001E)试样置于10ml具塞塑料离心管(5.7)中,加人0.5mL四氢映喃(4.2) 再加人9.5mL甲醇(4.1),摇匀,超声提取20min,8000r/min离心15min,将上清液转移至带刻度氮吹管(5.8)中,缓慢氮吹至1mL,加人9mL水,混匀,经0.45m微孔滤膜过滤,供高效液相色谱测定 6.2测定条件高效液相色谱参考条件如下色谱柱:xXTerraMsC.,5m,.250mm×4.6mm(内径),或相当者 a b 流速:l.0ml/mins 流动相:甲醇十0.005mol/儿L四丁基澳化铵溶液=30十70<体积比); c 检测波长:285nm: d 柱温:35C; e 进样量:10L f 6.3标准曲线的绘制用10%甲醇水溶液(4.7)将尿刊酸及其乙酯混合标准储备液(4.10)逐级稀释得到浓度为0.2mg/L、 0.5mg/儿L、1mg/儿L、2mg/L5mg/L10mg/L的混合标准工作溶液按6.2的测定条件浓度依次由低向高进样测定,以峰面积-浓度作图,绘制标准工作曲线尿刊酸及其乙酯标准品的色谱图参见附录B中图B1,尿刊酸及其乙酯标准品的紫外吸收光谱图参见附录B中图B.2
GB/35803一2018 6.4测定按6.2测定条件对待测样品进行测定,如果检出的尿刊酸及其乙酯的色谱峰的保留时间与标准品一致,并且在扣除背景后的样品色谱图中,该物质的紫外吸收光谱图与标准品一致,则可初步认定样品中存在尿刊酸及其乙酯,用外标法定量尿刊酸及其乙酯含量应在标准曲线之内,超出线性范围则应稀释后再进行分析必要时,阳性样品需用液相色谱-质谱进行确认试验(参见附录C) 6.5空白试验除不称取样品外,均按上述测定条件和步骤进行结果计算结果按式(I)计算,计算结果保留两位小数,计算结果应扣除空白值 c×V W= n 式中: 样品中尿刊酸及其乙酯的含量,单位为毫克每千克(mg/ke) W 从标准工作曲线上查出的试液中尿刊酸及其乙酯的浓度,单位为毫克每升(mg/L) 样液最终定容体积,单位为毫升(mL); 试样的质量,单位为克(g) 777 检出限和定量限本标准对尿刊酸及其乙酯的检出限为2mg/kg,定量限为5mg/kg 回收率和精密度在添加浓度5mg/kg一250mg/kg浓度范围内,测得回收率为80.1%103.8%,相对标准偏差为 1.2%6,.9% 10 允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%
GB/T35803一2018 附录 A 资料性附录) 尿刊酸及其乙酯的中文名称,英文名称,CAs号分子式,相对分子质量结构式尿刊酸及其乙酯的中文名称、英文名称,CAs号,分子式、相对分子质量、结构式见表A.1 表A.1尿刊酸及其乙酯的中文名称、英文名称.CAS号、分子式,相对分子质量、结构式相对分子中文名称英文名称 CAS号分子式结构式质量 HN 尿刊酸 IUrocanicacid 104-98-3 CHN.O. 138.12 oH Urcanicacid 尿刊酸乙酯 27538-35-8CHN.O 166.17 ethylester
GB/35803?2018 ?B ?? ??Ч????? ???Ч????B.1;????? ?B2 mAU 2.0 1.5 .0 0.5 0.0 /min ?: -; - ?B.1???Ч??? 3.5 3.0 2.5 2.0 l.5 l.0 0.5 0.0 0.5 200 220240260280300320340360380400 nm ? -; - ?B.2?????
GB/T35803一2018 录附 C 资料性附录) 确证试验 C.1液相色谱条件液相色谱测定的参考条件如下色谱柱:XBridgeC,3.5m,150mm×2.1nmm(内径),或相当者; a b) 流动相:0.1%甲酸溶液十乙睛=95十5体积比). 流速:0.3mL/min; c d 柱温:30C; 进样量:5L e C.2 质谱条件质谱测定的参考条件如下: 离子源;电喷雾离子源; a b 离子化模式:正离子模式:; c 毛细管电压:3kV d 萃取电压:2.9V; 离子源温度:150C; e fD 脱溶剂气温度:350C; 数据采集方式:多反应监测 g C.3 定性判定进行试样测定时,将样液适当稀释,按液相色谱-质谱条件测定样液和标准工作溶液,如果所选择的离子均出现,而且所选择的离子比与标准物质的相对丰度一致,允许偏差不超过表C.1规定的范围,则可判断样品中含有尿刊酸及其乙醋尿刊酸和尿刊酸乙酯的选择离子质量色谱图参见图c.1和图C.2 表C.1尿刊酸及其乙酯质谱分析参数定量离子对定性离子对锥孔电压碰撞能量相对离子丰度允许相对偏差化合物 /3 /2 e 6 尿刊酸 139.05/121.05 139.05/93.05 25 15，20 00，82 土20 18 尿刊酸乙酯 167/121 167/139 18，15 100，83 士20
GB/35803一2018 1.26 10o 139.05>121.05 50 2.0 3.0 0.5 1.0 1.5 2.5 1/min 1.26 100 139.05>93.05 50 0.5 2.0 2.5 3.0 /min 图C.1尿刊酸的选择离子质量色谱图
GB/T35803?2018 3.11 00 167>121 50 4.5 5.0 3.0 1/min 3.11 100 167>139 50 2.5 3.5 5.0 /min ?c.2???

化妆品中禁用物质尿刊酸及其乙酯的测定高效液相色谱法GB/T35803-2018

尿刊酸及其乙酯是一类常见的防腐剂，但长期使用可能会对身体产生危害。因此，我国针对化妆品中的成分进行严格监管，并将尿刊酸及其乙酯列为禁用物质之列。而为了更好地保障消费者的权益，国家制定了《化妆品中禁用物质尿刊酸及其乙酯的测定高效液相色谱法GB/T35803-2018》这份标准，旨在通过科学、高效的检测手段来确保化妆品的安全性。

方法原理

该方法采用高效液相色谱法（HPLC）进行检测，以甲醇-水溶液为流动相，在梯度洗脱下分离尿刊酸及其乙酯。通过紫外检测器检测，得到样品中尿刊酸及其乙酯的含量。

操作步骤

称取化妆品样品，加入适量甲醇溶解；
经超声波处理后滤过，取10μL进样；
HPLC分离：采用甲醇-水溶液为流动相，设置梯度洗脱条件；
检测：采用紫外检测器，检测波长为254nm。

标准要求

GB/T35803-2018对于化妆品中尿刊酸及其乙酯的含量限制作出了明确规定，其中：

尿刊酸含量不得大于0.2mg/kg；
尿刊酸乙酯含量不得大于1.0mg/kg。

意义与建议

该方法的实施，有助于加强对化妆品中尿刊酸及其乙酯的监管，保障消费者的权益。对于生产厂家而言，应加强对原材料和成品的质量控制，并严格按照国家标准进行检测。同时，消费者在选购化妆品时，也需注意查看产品成分并选择合格产品，共同维护化妆品市场的安全与健康发展。