牛和猪肌肉中安乃近代谢物残留量的测定液相色谱-紫外检测法和液相色谱-串联质谱法

牛和猪肌肉中安乃近代谢物残留量的测定液相色谱-紫外检测法和液相色谱-串联质谱法

国家标准 GB/T20747一2006 牛和猪肌肉中安乃近代谢物残留量 的测定液相色谱-紫外检测法和 液相色谱-串联质谱法 Metholforthedeterminationofmetaboliteresiduesofdipyroein b0wineandporcinemuscletissues LC-UVandLC-MS-MSmethod 2007-03-01实施 2006-12-31发布 国家质量监督检验检疫总局 发布 中 国国家标准化管委员会国家标准
GB/T20747一2006 前 言 本标准的附录A、附录B,附录C和附录D为资料性附录 本标准由秦皇岛出人境检验检疫局提出 本标准由国家质量监督检验检疫总局归口 本标准起草单位:秦皇岛出人境检验检疫局、深圳出人境检验检 疫局 本标准主要起草人:;庞国芳,谢丽琪,沈金灿、林燕奎、陈佩金、韩瑞阳 本标准系首次发布的国家标准
GB/T20747一2006 牛和猪肌肉中安乃近代谢物残留量 的测定液相色谱-紫外检测法和 液相色谱-串联质谱法 第一法液相色谱法 范围 本部分规定了牛和猪肌肉中安乃近代谢物4-甲酰氨基安替比林(4-formylaminoantipyrine)、4-甲基 氨基安替比林(4-methylaminoantipyrine)和4-氨基安替比林(4-aminoantipyrine)的液相色谱测定方法 本部分适用于牛和猪肌肉中4-甲酰氨基安替比林、4-甲基氨基安替比林和4-氨基安替比林残留量 的测定 本部分的方法检出限4-甲酰氨基安替比林为12.5g/kg,4-氨基安替比林为15.0g/kg,4甲基 氨基安替比林为20.0g/lkg 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款 凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分 GB/T6379.1测量方法与结果的准确度正确度与精密度第1部分;总则与定义 (GB/T6379.1一2004,ISO5725-1:l994,IDT) GB/T6379.2测量方法与结果的准确度(正确度与精密度第2部分;确定标准测量方法重复 性与再现性的基本方法(GB/T6379.2一2004,IsO5725-2;1994,IDT) GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GBT6682一1992,neqIso3896.1987 原理 肌肉中安乃近代谢物残留用硫酸钠溶液(pH=7)提取,过滤后经BondElutC固相萃取柱或相当 者净化,用甲醇洗脱,氮气吹干 残渣用甲醇十水溶解,供液相色谱仪测定 4-甲酰氨基安替比林用外 标法定量、4甲基氨基安替比林和4-氨基安替比林用内标法定量 试剂和材料 除另有说明外,所用试剂均为优级纯,水为GB/T6682规定的一级水 甲醇色谱纯 4.2乙睛;色谱纯 硫酸钠 4.4亚硫酸钠 4.5乙酸铵;色谱纯 4.6硫酸钠十亚硫酸钠提取溶液;准确称取14.20g无水硫酸钠和2.52g亚硫酸钠,用水溶解,并使 其体积达到约950mL.,然后用0.5mol/L的稀硫酸调节溶液的pH值至7.0,用水定容至1000mL 4.7淋洗液甲醇十水(5十95)
GB/T20747一2006 样品定容液甲醇水(1十9) .8 4 .9 4-甲基氨基安替比林、4-甲酰氨基安替比林和4-氨基安替比林标准物质;纯度>99% 4.10内标标准物质;4异丙基氨基安替比林(4-isoproylaminoantipyrine),纯度>99% 4.11标准储备溶液;100mg/L 准确称取适量的各种安乃近代谢物标准物质(4.9),用甲醇(4.1)配 制成浓度为10o mg/L的标准储备溶液,避光一18C保存,可使用3个月 4.12混合标准储备溶液:10.0mg/L 吸取每种适量标准储备溶液(4.1l),用甲醇稀释成10.0mg/L 的混合标准工作溶液,避光一18C保存,可使用1个月 4.13内标储备溶液:l00mg/L 准确称取适量的内标标准物质(4.10)用甲醇(4.1)配制成浓度为 100 mg/L内标储备溶液,避光一18C保存,可使用1个月 吸取适量的内标储备溶液(4.13),用甲醇稀释成2.0n 4.14内标工作溶液;2.0mg/IL mg/ml的内标 工作溶液,避光-18C保存,可使用1个月 混合标准工作溶液,分别移取不同量棍合标准储备游液(.12)于进样瓶中,再分别加人适量内标 4.15 工作辫液(4.14),用样品定容液(4.8)定容至1ml.使各被测组分的浓度均为0.o0"g/ml nnL0.504g/mLl.0g/mL.2.O4g/mL,内标物质浓度均为0.254g/mL /mL、0.10 1 0.0504g/ 4g 4.16BondElutC固相萃取柱或相当者,500mg.3mL 用前分别用5mL甲醇和5mL水处理,保 持柱体湿润 4.17滤膜:0.45 m 4.18玻璃滤纸 仪器 5.1液相色谱仪;配有紫外检测器 5.2固相萃取装置 5.3氮气浓缩仪 5.4液体混匀器 5.5 分析天平;感量0.1mg和0.01g 5.6 真空泵 S. 均质器 .8 移液器;10l100ul和100l~1000aL 5.9 聚丙烯离心管:50mL具塞 5 .10pH计;测量精度士0.02pH单位 .11低温离心机可制冷到4C 5. 5 12 玻璃离心管;15mL 试样的制备与保存 试样的制备 6. 取有代表性的牛或猪肌肉,制成实验室样品 试样分为两份,置于样品瓶中,密封,并做上标记 6. 2 试样保存 制备好的试样置于一18C冰柜中避光保存 测定步骤 提取 称取5g试样,精确至0.01g 将上述样品置于50mL聚丙烯离心管(5.9)中,加人0.25mL.浓度 为2.0mg/L的内标工作溶液(4.14),然后加人15 nm硫酸钠十亚硫酸钠提取溶液(4.6),均质1 min，
GB/T20747一2006 在10C以4000r/min离心5min 将上清液转移到另一个干净的50mL容量瓶中,残渣再分别加人 15ml,l0mL硫酸钠十亚硫酸钠提取溶液提取两次,离心后,合并上清液,并用硫酸钠十亚硫酸钠提取 溶液定容至50ml.,混合均匀,然后用玻璃滤纸过滤,待净化 7.2净化 取25mL提取液(7.1)放人c,固相翠取柱(4.16)中,以约1ml/min的流速使样液通过固相摹取 柱,待样液全部通过后,依次用5mL水和5m甲醇十水淋洗液(4.7)淋洗固相萃取柱,弃去全部流出 液,减压抽干固相萃取柱10min 最后用5mL甲醉洗脱,洗脱液收集于15mL玻璃离心管中,置于氮 气浓缩仪(5.3)上在55C吹至近干,用样品定容液(4.8)定容至1.0mL 定容液混匀后,过0.45m滤 膜,供液相色谱测定 7.3测定 7.3.1液相色谱条件 ,250mm×4.6mm或相当者; 色谱柱;InertsilODS-3色谱柱,5 a 4m b)柱温;30c 进样量.50山 C d流动相流速及梯度洗脱条件见表1; 检测波长265nm 表1梯度洗脱条件 时间/min 流速/ml/min) 水/% 甲醉/% 1.0 90 10 15 1.0 30 70 1" 1.0 95 90 10 18 l.0 90 10 23 l.0 7.3.2液相色谱测定 将混合标准工作溶液分别进样,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准工作曲线,用标准工作 曲线对样品进行定量,样品溶液中4-甲酰氨基安替比林、4-甲基氨基安替比林和4-氨基安替比林的响应 值均应在仪器测定的线性范围内 在上述色谱条件下,4-甲酰氨基安替比林的参考保留时间为 10.61min,4-氨基安替比林的参考保留时间为13.60min.4-甲基氨基安替比林的参考保留时间为 14.76min,内标化合物的参考保留时间为17.55min 安乃近代谢物标准物质的色谱图参见图A.1 4-甲酰氨基安替比林采用外标法定量;4-甲基氨基安替比林和4-氨基安替比林采用内标法进行定 量 本方法的添加回收率数据参见附录C 平行试验 按以上步骤,对同一试样进行平行试验测定 7.5回收率试验 吸取适量混合标准工作溶液和内标标准工作溶液,用样品定容液(4.8)稀释成所需浓度的标准工作 溶液 阴性样品中添加标准溶液,按7.2操作,测定后计算样品添加的回收率 结果计算 4甲酰氨基安替比林结果按式(1)计算 1000 X -× -X" 1000
GB/T20747一2006 式中 试样中被测组分残留量,单位为微克每千克(mg/kg) -从标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度,单位为纳克每毫升(4g/mL); -样品溶液最终定容体积,单位为毫升(mL) m 样品溶液所代表最终试样的质量,单位为克(g). 4甲基氨基安替比林和4-氨基安替比林结果按式(2)计算 宗H一 x x-c×是 Xx 一 式中 试样中被测物残留量,单位为毫克每千克(mg/kg) 基质标准工作溶液中被测物的浓度,单位为微克每毫升(ug/mL.); 试样溶液中被测物的色谱峰面积 基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积 试样游液中内标物的浓度,单位为微克每毫开(成/ml) 基质标准工作溶液中内标物的浓度,单位为微克每毫升(ug/ml)1 基质标准工作溶液中内标物的色谱峰面积; 试样溶液中内标物的色谱峰面积; 样液最终定容体积,单位为毫升(mL); 试样溶液所代表试样的质量,单位为克(g) m 注;计算结果应扣除空白值 精密度 本部分的精密度数据是按照GB/T6379.1和GB/T6379.2的规定确定的,重复性和再现性的值 以95%的可信度来计算 重复性 在重复性条件下,获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限r,被测物的含量范围及重 复性方程见表2 如果差值超过重复性限,应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定 再现性 在再现性条件下,获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限R,被测物的含量范围及再 现性方程见表2 表2含量范围及重复性和再现性方程 含量范围 化合物名称 重复性限, 再现性限R 4g/kR) 4-甲酰氨基安替比林 50400 gr=0,3888lg十0,0291 lgr=0,6817lgm一0,5782 猪 4 -氨基安替比林 50400 gr=0.6396lgm-0.5315 gr=0.3230lgm十0.0504 4甲基氨基安替比林 50400 lgr=0,72059lgm一0,6591 lgr=0.9613lgm-1.1357 4-甲酰氨基安替比林 50400 lgr=0,6288l -0.4526 0,5888 lgm lgr一 lgm一0,4063 4-氨基安替比林 50400 lgr=0.4486l -0.1035 lgr=0.5539lgm一0.3133 lgm 肉 4-甲基氨基安替比林 5040o lgr=0.4890lgm一0.1845 lgr=0.7899lgm-0.7499 注:;m为两次测定结果的算术平均值
GB/T20747一2006 第二法液相色谱-串联质谱法 10范围 本部分规定了牛和猪肌肉中安乃近代谢物4-甲酰氨基安替比林(4-formylaminoantipyrine)、4-乙酰 氨基安替比林(4acetylaminoantipyrine)、4-甲基氨基安替比林(4-methyl laminoantipyrine)和4-氨基安 替比林(4aminoantipyrine)的液相色谱-串联质谱测定方法 本部分适用于牛和猪肌肉中4-甲酰氨基安替比林、4-乙酰氨基安替比林、4-甲基氨基安替比林和4 氨基安替比林残留量的测定 本部分的方法检出限:4-甲酰氨基安替比林为1.84g/kg;4-氨基安替比林和4甲基氨基安替比林 为1.54g/kg;4-乙酰氨基安替比林为1.0g/kg 规范性引用文件 1 下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款 凡是注目期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然而,鼓励根据本部分达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分 GB/T6379.1测量方法与结果的准确度(正确度与精密度第1部分:总则与定义 GB/T6379.1一2004,ISO5725-l:1994,IDT GB/T6379.2测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分;确定标准测量方法重复 性与再现性的基本方法(GB/T6379.2-2004,Iso5725-2;1994,IDTy GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682一1992,neqIso3696:1987) 12原理 肌肉中安乃近代谢物残留用硫酸钠溶液(pH=7)提取,过滤后,经BondElutC固相萃取柱或相当 者净化后,用甲醇洗脱,氮气吹干 残渣用甲醇十水溶解,供液相色谱-串联质谐仪测定,内标法或外标 法定量 13试剂和材料 除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水 13.1甲醉;色谐纯 13.2乙晴;色谱纯 3.3硫酸纳 13.4亚硫酸钠 3.5醋酸铵,色谱纯 13.6硫酸钠十亚硫酸钠提取溶液;准确称取14.20g无水硫酸钠和2.52g亚硫酸钠,用水溶解,并使 其体积达到约950mL,然后用0.5mol/L的稀硫酸调节溶液的pH值至7.0,用水定容至1000mL 13.7淋洗液甲醇十水(1十19). 13.8样品定容液:甲醇十水(1十9) 13.94甲基氨基安替比林、4-乙酰氨基安替比林、4-甲酰氨基安替比林和4-氨基安替比林标准物质: 纯度>99% 13.10内标标准物质;4-异丙基氨基安替比林,纯度>99% 13.11标准储备溶液;100mg/L 准确称取适量的各种安乃近代谢物标准物质(13.9),用甲醉(13.1 配制成浓度为1001 mg/L的标准储备溶液,避光一18C保存,可使用3个月
GB/T20747一2006 13.12混合标准储备溶液:1.0mg/L 吸取每种适量标准储备溶液(13.11),用甲醇稀释成1.0mg/I 的混合标准工作溶液,避光-18C保存,可使用1个月 13.13内标储备溶液;准确称取适量的内标标准物质(13.10)用甲醇(13.1)配制成浓度为100g/L 标准储备溶液,避光-18C保存,可使用3个月 13.14内标工作溶液;0.20mg/L 吸取适量的内标储备溶液(13.13),用甲醇稀释成0.20mg/m的 内标标准工作溶液,避光一18C保存,可使用1个月 13.15基质混合标准工作溶液;吸取适量的混合标准储备溶液(13.12)和适量内标工作溶液(13.14). 用空白样品提取液配成浓度为1.0 g/儿和内标浓度为 g/I、40.0 4k'儿.5.0ue/L.l0,.0e/L.n" g mg/儿的质混合标准工作游液 当天配制 0.20 3.16IBondElutC固相萃取柱或相当者:500mg,3ml 用前分别用5ml 甲醇和5ml水处理,保 持柱体湿润 13.17滤膜:0.45Amm. 13.18玻璃滤纸 14仪器和设备 14.1液相色谱-串联质谱仪:配有电喷雾离子源(EsI) 4.2固相萃取装置. 14.3氮气浓缩仪 144旋涡混匀器 14.5分析天平;感量0.1mg和0.01 14.6真空系 14.7均质器 4. 移液器;10l100AL和100L1000l 14.9聚丙烯离心管;50ml,具塞 14.10pH计;测量精度士0.02 14.11低温离心机可制冷到4 14.12玻璃离心管;l5mL 15试样的制备与保存 15.1试样的制备 取有代表性的牛或猪肌肉组织,制成实验室样品 试样分为两份,置于样品瓶中,密封,并做上 标记 15.2试样保存 制备好的试样置于-18C冰柜中避光保存 16 测定步骤 16.1提取 称取5旦试样,精确至0.01g 将上述样品置于50mL聚丙烯离心管(14.9)中,加人0.25mL浓 nmgL的内标工作游被(1a.14),然后加人15mL硫酸钠十理碗酸钠提取溶液(13.6),均质 度为2.0n n,在10C以4000r/nin离心5min 将上请液转移到另一个干净的0mL容量瓶中,残法再分别 lmin， 加人15ml、10mlL硫酸钠十亚硫酸钠提取溶液提取两次,离心后,合并上清液,并用硫酸钠十亚硫酸钠 提取溶液定容至50mL,混合均匀,然后用玻璃滤纸过滤,待净化
GB/T20747一2006 6.2净化 取25mL提取液(16.1)放人C固相萃取柱(13.16)中,以约1mL/min的流速使样液通过固相萃 取柱,待样液全部通过后,依次用5mL水和5mL甲醇十水淋洗液(13.7)淋洗固相萃取柱,弃去全部流 出液,减压抽干固相萃取柱10min 最后用5m甲醇洗脱,洗脱液收集于15ml玻璃离心管中,置于 氮气浓缩仪(14.3)上在55C吹至近干,用样品定容液(13.8)定容至1.0mL 定容液混匀后,过 0.45am滤膜,供液相色谱-串联质谱测定 同时取阴性样品,按16.1和16.2步骤制备空白样品提取液,用于配制基质混合标准工作溶液 16.3平行试验 按以上步骤,对同一试样进行平行试验测定 16.4回收率试验 吸取适量混合标准储备溶液和内标标准工作溶液,添加到阴性样品中,按上述操作步骤,测定后计 算样品添加的回收率 6.5测定 6.5.1液相色谱条件 色谱柱:AtlantisdC色谱柱,3am,l50mm×2.1mm或相当者 a b)柱温;30c 进样量.20L. C d)流动相、流速及梯度洗脱条件见表3 表3流动相流速及梯度洗脱条件 5mmol/LNHAc溶液,pH4.5/(% 时间/minm 流速/mL/min 乙晴/% 90 10 0.30 10 0.30 20 80 12 0.30 95 13 90 10 0.30 18 0.30 90 10 16.5.2质谱条件 离子源电喷雾离子源， a b)扫描方式:正离子扫描; 检测方式:多反应监测(MRM); c 电喷雾电压;5000V; d 辅助气流速:7.0L/min 辅助气温度;450C; 聚焦电压:200V g 碰撞室出口电压:15V h 定性离子对、定量离子对,碰撞气能量及去簇电压见表4 表4安乃近代谢物测定的质谱参数 代谢物名称 定性离子对(m/2) 定量离子对(m/:) 碰撞气能量/八V 去簇电压/八V 232/104 21 36 甲酰氨基安替比林 232/104 232/83 30 36
GB/T20747一2006 表4(续 代谢物名称 定性离子对(m/: 定量离子对m/:) 碰撞气能量/八V 去簇电压/八V 19 35 204/159 4-氨基安替比林 204/159 204/11m 19 35 218/56 40 50 4-甲基氨基安替比林 218/56 23 218/97 50 20 32 246/228 园4乙酰氨基安替比林 246/228 35 246/104 32 4异丙氨 46 35 246/56 246/56 基安替比林(内标 35 246/125 35 16.5.3液相色谱-串联质谱测定 16.5.3.1定性测定 每种被测组分选择1个母离子,2个以上子离子,在相同实验条件下,样品中待测物质和内标物的 保留时间之比,也就是相对保留时间,与基质混合标准工作溶液中对应的相对保留时间偏差在士2.5% 之内;且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的基质混合标准工作溶液中对应的定性离子的 相对丰度进行比较,若偏差不超过表5规定的范围,则可判定为样品中存在对应的待测物 表5定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 50 >2050 >1020 10 允许的最大偏差 士20 士25 士30 士50 16.5.3.2定量测定 在仪器最佳工作条件下,对基质混合标准工作溶液进样,以峰面积为纵坐标,基质混合工作溶液浓 度为横坐标绘制标准工作曲线.用标准工作曲线对样品进行定量.样品溶液中待测物的响应值均应在仪 器测定的线性范围内 四种安乃近代谢物标准物质和内标物的多反应监测(MRM)色谱图参见图B.1 4-甲酰氨基安替比林和4-乙酰氨基安替比林采用外标法定量;4-甲基氨基安替比林和4-氨基安替比林 采用内标法进行定量 四种安乃近代谢物的添加浓度及其平均回收率的试验数据参见附录D. 16.6平行试验 按以上步骤,对同一试样进行平行试验测定 16.7回收率试验 吸取适量混合标准工作溶液和内标标准工作溶液,用空白基质溶液稀释成所需浓度的标准工作溶 液 阴性样品中添加标准溶液,按16.2操作,测定后计算样品添加的回收率 17结果计算 4-甲酰氨基安替比林和4-乙酰氨基安替比林结果按式(3)计算: 1000 x-xM 1000 式中 试样中被测组分残留量,单位为微克每千克(4g/kg); -从标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度,单位为纳克每毫升(ng/mL) 样品溶液最终定容体积,单位为毫升(mL); -样品溶液所代表最终试样的质量,单位为克(g) m
GB/T20747一2006 4-甲基氨基安替比林和4-氨基安替比林结果按式(4)计算 1000 x只x会 X=c.× O0 式中 -试样中被测物残留量,单位为微克每千克(4g/ke) 基质标准工作溶液中被测物的浓度,单位为纳克每毫升(ng/mlL); 试样溶液中被测物的色谱峰面积 基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积 试样溶液中内标物的浓度,单位为纳克每毫升(ng/mL); 基质标准工作溶液中内标物的浓度,单位为纳克每毫升(ng/mlL); 基质标准工作溶液中内标物的色谐峰面积 试样溶液中内标物的色谱峰面积 样液最终定容体积,单位为毫升(ml); -试样溶液所代表试样的质量,单位为克(g) 77 注;计算结果应扣除空白值 18 精密度 本部分的精密度数据是按照GB/T6379.1和GB/T6379.2的规定确定的,重复性和再现性的位 以95%的可信度来计算 18.1重复性 在重复性条件下,获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限r,被测物的含量范围及重 复性方程见表6 表6含量范围及重复性和再现性方程 含量范围/ 化合物名称 重复性限， 再现性限R 4g/kg) 4-甲酰氨基安替比林 5.0~40.0 lgr=0.3970lgm-0.6061 lgr=0.7675lg一0.9967 4-氨基安替比林 5.0~40.0 lgr=0.6830lgm-0.8383 lgr=0.8660lg一1.0902 猪 肉 4-甲基氨基安替比林 5,040.0 lgr=0.7378lgm-l.0216 lgr=1.0072lg 2633 4-乙酰氨基安替比林 5.040.0 lgr=0.6076lgm一0.8019 lgr=0,7973lgm一1.0027 =0.752 ？ 0.9779 4甲酰氨基安替比林 -0.7292lgm一0.9556 440.0 lgr一 lgr lgm 4-氨基安替比林 5.0一40.0 gr=0,8744lgm-1.1150 lgr=0.7567lgm一0.8847 牛 肉 4-甲基氨基安替比林 5.0一40.0 lgr=0.8780lgm-1.0902 lgr=1.1227lgm一1.3928 4-乙酰氨基安替比林 5.040.0 lgr=0,6867lgm一0,9478 lgr=0,9720lg-1.2690 注:为两次测定结果的算术平均值 如果差值超过重复性限,应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定 18. 2 再现性 在再现性条件下,获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限R,被测物的含量范围及再 现性方程见表6.
GB/T20747一2006 附 录 A 资料性附录 三种安乃近代谢物标准物质及内标物的液相色谱图 三种安乃近代谢物标准物质及内标物的液相色谱图,见图A.1 ,DADEs 265.8Ref=360.80(DP0702DIP-PK35,D) Norm 25 20 15 10 10 12 16 18 min 4-甲酰氨基安替比林,10.61nmin -4氨基安替比林,.13.60min, -4-甲基氨基安替比林，14.76min; -4异丙氨基安替比林(内标),17.55min. 图A.1三种安乃近代谢物标准物质及内标物的液相色谱图 1o
GB/T20747一2006 附 录 B 资料性附录 四种安乃近标准物质及内标物的多反应监测(MRM)色谱图 四种安乃近标准物质及内标物的多反应监测(MRM!)色谱图,见图B.1 1Oppb-232.0104.0(Cnknowm)232.0104.0aw-sanmple3of44fomdip-20060705, Area5.32e+004countsHeight4.94e+003cqpsRT6.27mim 6.27 t/min 10 12 10ppb-246.0104.0(Unknown)246.0/104.0amu-sample3of44fromdip-20060705.wift Area:4.39e+004countsIHeight6.55e+003cpsRT6.21min 5000 9.07 lmin 10 10ppb:204.0159.0(Cnkmowm)204.0159.0anmu-sampke3of44fromdip:20060705.wit Area:4.43e+004countslHleight:9.60e+003cpsRT:7.73min 7.73 5000 9.07 6.22 nin 12 Ioppb-218.056.0(Unkowm)2I8.056.0amusple3of44fomdip:20060705.wif Arca:5.73c+004countsHeight:1.16c+004cpsT7.93min 7.93 ！ 1.00c4 0.00 H/min 12 10ppb-246.0125.0(Unknowm)246.0125.0ammu-sample3of44fromip-:20060705.,wifm Area:8.04e+004countsHeight:I.62e+004cpsRT9.06mmin 9.06 1.0e4 0.00 lmmin 12 4甲酰氨基安替比林,6.27 min: 4-乙酰氨基安替比林,6.21min; 4氨基安替比林,7.73" min:; 4甲基氨基安替比林,7.93min 4-异丙氨基安替比林(内标)9.06min. 图B.1四种安乃近标准物质及内标物的多反应监测(MRM)色谱图 11
GB/T20747一2006 附 录 C 资料性附录 回收率(液相色谱法 猪肉中安乃近代谢物的添加浓度及其平均回收率,见表C.1 表c.1猪肉中安乃近代谢物的添加浓度及其平均回收率(n=10 安乃近代谢物名称 添加浓度/4g/kg 回收率/% 50.0 81.3 100 85.0 4-甲酰氨基安替比林 200 85.6 400 90.8 50.0 86.3 100 87.7 4-氨基安替比林 200 90.0 400 96.0 50.0 80.4 81.9 100 4-甲基氨基安替比林 200 87.5 400 86.0 牛肉中安乃近代谢物的添加浓度及其平均回收率,见表C.2 表c.2牛肉中安乃近代谢物的添加浓度及其平均回收率(n=10 安乃近代谢物名称 添加浓度/ug/kg 回收率/(% 50.0 86.6 100 84.2 4甲酷氨基安替比林 200 91.0 400 92.5 50.0 82.0 100 86.6 4-氨基安替比林 200 90.0 400 94.2 50.0 83.2 84.0 100 4-甲基氨基安替比林 200 84.0 400 90.6 12
GB/T20747一2006 附 录D 资料性附录 回收率(液相色谱-串联质谱法 猪肉中安乃近代谢物的添加浓度及其平均回收率,见表D.1 表D.1猪肉中安乃近代谢物的添加浓度及其平均回收率(n=10 添加浓度/ 回收率/% 安乃近代谢物名称 4g/kg) 5.0 91.2 10.0 94.0 4-甲酰氨基安替比林 20.0 92.0 40.0 92.o 5.0 82.0 10.0 87.5 -氨基安替比林 4- 96.5 20.0 40.0 97.8 5,0 80.4 7. 10.0 4-甲基氨基安替比林 20.0 5.0 40.0 75.7 5.0 90.2 88.2 10.0 4-乙酷氨基安替比林 20.0 85.0 40.0 88.8 牛肉中安乃近代谢物的添加浓度及其平均回收率,见表D.2 表D.2牛肉中安乃近代谢物的添加浓度及其平均回收率(n=10 安乃近代谢物名称 添加浓度/4g/kg 回收率/%) 5,0 81.6 10.0 85.5 4-甲酰氨基安替比林 20.0 89.0 40.0 89.1 5.0 96.2 97.6 10.0 4-氨基安替比林 20.0 101 40.0 104 86.4 5.0 10.0 80.7 4甲基氨基安替比林 20.0 78.5 6.4 40.0 5,0 86.4 10.0 88.1 4乙酷氨基安替比林 20.0 85.9 40.0 90.5 13