实验动物兔脑原虫检测方法

实验动物兔脑原虫检测方法

国家标准 GB/T18448.3一2001 代替GB/T14926.351994 实验动物兔脑原虫检测方法 -MethodforexaminationofEncephalitozooncunicul L.aboratory animal一 2001-08-29发布 2002-05-01实施 发布 宙豪赢金益，型国家标准

GB/T18448.3一2001 前 言 本标准由cB/T14926.35一1994(实验动物兔脑胞内原虫检验方法修订而成 本标准制除了原标准中不宜操作的"3.1.l活体动物的取样"的有关内容 将"脑胞内原虫"改为"脑 原虫” 本标准由科学技术部提出并归口 本标准起草单位:实验动物学会 本标准主要起草人;李冠民诸欣平,潘振业刘兆铭 本标准于1994年1月首次发布

国家标准 GB/T18448.32001 实验动物兔脑原虫检测方法 代替GB/T14926.35一1994 ozooncuniculn LaboratoryanimalMethodtorexaminationfEn aephaia 范围 本标准规定了兔脑原虫的取样,染色检测方法及结果判定,并描述了其形态特征 本标准适用于兔脑原虫的检测 2 原理 主要在腹腔巨噬细胞内增殖的脑原虫,通过涂片染色可直接用显微镜观察 3 材料和试剂 3.1载玻片 32甘油 33甲辞 3.4姬姆萨(Giemsa)染液;姬姆萨染剂粉 1g 纯甘油 50mL 甲醇 50mL 35姬姆萨稀释液15一20份PBS液与1份姬姆萨染液充分混合 3.6显徽镜 检测步骤 4.1取样 麻醉处死动物,立即打开腹腔,用吸管吸取少许腹腔液涂片,或用干净载玻片在动物腹腔脏器表面 轻压一下,制成压印片,编号 4.2固定和染色 min 除片或压印片晾干,用甲醇固定5min,中性缓冲液冲洗,脉干 姬姆萨稀释液染色15nin一20 中性缓冲液冲去多余染液,蒸傻水冲洗,晾干 也可取兔脑组织固定,常规石蜡切片,HE染色 结果判定 在光学显微镜高倍镜或油镜下对染好的涂片,压印片或组织切片进行仔细检查,在腹腔巨嘴细胞或 脑绸胞胞质内蠢找原虫子袍子,检查到袍子或滋养体都判为阳性 兔脑原虫的抱子为卵圈形或杆形,平均大小为1.5Hm一2.5pm,内有一核及少量空泡,囊壁厚,两 端或中间有少量空泡;一端有极体,由此发出极丝,沿内壁盘绕 极丝常自然伸出 该虫在宿主脑细胞或 腹腔巨噬细胞胞质内行抱子生殖,姬姆萨染色将袍子染成蓝色 检查中在巨噬细胞内常见的是假包囊 2002-05-01实施 国来质量监督检验检疫总局2001-08-29批准
GB/T18448.3一2001 直径约30pm),无类壁,上百个滋养体聚积在一起 结果报告 根据判定结果,作出报告

国 家标 准 实验动物兔脑原虫检测方法 GB/T18448.3一2001 标准出版社出版发行 北京西城区复兴门外三里河北街16号 邮政编码;l00045 http://www.spc.net.cn 电话;63787337、63787447 2005年7月第一版2005年7月电子版制作 书号:1550661-22867 版权专有侵权必究 GB开184483-20o 举报电话.(010)68533533