GB/T34782-2017
蜂胶中杨树胶的检测方法高效液相色谱法
Methodforthedeterminationofpoplartreeguminpropolis—Highperformanceliquidchromatography
- 中国标准分类号（CCS）B47
- 国际标准分类号（ICS）65.140
- 实施日期2018-05-01
- 文件格式PDF
- 文本页数10页
- 文件大小616.89KB
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蜂胶中杨树胶的检测方法高效液相色谱法
国家标准 GB/T34782一2017 蜂胶中杨树胶的检测方法 高效液相色谱法 Methodforthedeterminationofpoplartreeguminpropolis Highperformaneeliquidchromatography 2017-11-01发布 2018-05-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/34782一2017 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草
本标准由中华供销合作总社提出
本标准由全国蜂产品标准化工作组(SAC/SwG2)归口
本标准起草单位:浙江大学、蜂产品协会,农业部蜂产品质量监督检验测试中心(北京,江山福 赐德蜂业科技开发有限公司、厦门思健生物科技有限公司、上海沪郊蜂业联合社有限公司
本标准主要起草人;胡福良、张翠平、,郑火青、吕泽田,李熠、徐水荣,颜鉴翔、孙德官
GB/T34782一2017 引 言 本文件的发布机构提请注意,声明符合本文件时,可能涉及到第4一9章与以水杨苷和邻苯二酚为 指标鉴别杨树胶的原理及检测方法相关的专利(ZL201010180675.0和ZL201310721079.2)的使用
本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场
该专利持有人已向本文件的发布机构保证,他愿意同任何申请人在合理且无歧视的条款和条件下， 就专利授权许可进行谈判
该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案
相关信息可以通过以下 联系方式获得 专利持有人;浙江大学
地址:浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
请注意除上述专利外,本文件的某些内容仍可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别这些专利 的责任
GB/34782一2017 蜂胶中杨树胶的检测方法 高效液相色谱法 范围 本标准规定了蜂胶中是否含有杨树胶的高效液相色谱鉴别方法的原理,试剂、材料、仪器,设备和试 验方法
本标准适用于蜂胶及蜂胶乙醇提取物中杨树胶的检测
规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件
3.1 蜂胶propolis 工蜂采集树脂等植物分泌物与其上飘腺、蜡腺分泌物等混合形成的胶粘性物质
3.2 蜂胶乙醇提取物ethanolextractedpropolis 乙醇萃取蜂胶后得到的物质
3.3 杨树胶extractedpopulusbuds，leavesorbarks 杨属(Populus)植物的芽,叶子或树皮等组织经人工熬制加工,再经乙醇提取而成的提取物
3.4 杨树型蜂胶poplartypepropolis 杨属(Populus)为主要植物来源的蜂胶
原理 水杨苷和邻苯二酚广泛存在于杨属和柳属植物的芽、叶子和树皮中
当这些芽、叶子和树皮经过煎 煮之后,水杨苷和邻苯二酚依然存在
而蜂胶中并不存在水杨苷和邻苯二酚,因此可以作为蜂胶中是否 掺有杨树胶的鉴别指标
试样经75%乙醇提取后,用配有紫外检测器的高效液相色谱仪在213nm处检测水杨苷和邻苯二 酚的含量,从而判断蜂胶中是否含有杨树胶
GB/T34782一2017 5 试剂和材料 实验室用水应符合GB/T6682规定的一级水
除非另有规定,所有试剂均为分析纯
5.1甲醇;色谱纯
5.2乙睛;色谱纯
5.3乙醇
5.4磷酸
5.5水杨苷标准品;纯度>98%
5.6邻苯二酚标准品;纯度>99%. 5.7 0.5%磷酸(5.4)溶液:量取5ml磷酸,用水定容至1L
5.8标准贮备液;准确称取水杨苷(5.5)和邻紫二丽标谁品(5.)各10mg,分别用甲醉溶液(5.1)配制 成1.0mg/mL的标准溶液,于4C冰箱保存,保持期3个月
5.9标准工作液;分别吸取适量的水杨苷和邻苯二酚标准贮备液(5.8),用甲醇溶液(5.1)分别稀释成水 杨苷浓度为0.o05mg/mL.0.0lmg/'mL.002mg/mL.0.04mx/mL和0.0Gm/mL五个浓度,邻苯二 mL、,0.011 mL,0.02n 酚浓度为0.005mg/ mg/ml.0.04nmw/mL和0.06mg/ml五个浓度;现用现配. mg/ml 5.10滤膜:0.454m,有机系
仪器和设备 6.1高效液相色谱仪;配有紫外检测器
6.2粉碎机 6.3旋转蒸发仪
6.4超声波清洗器
样品的取样及预处理 从被检样品的不同部位均匀取样50g,冷冻,粉碎,混匀,作为备检样品
8 试验方法 8.1供试样品溶液的制备 称取2g蜂胶试样,用75%乙醉超声波提取30min,料液比为1;15(质量;体积),反复提取3次 合并滤液,离心过滤后旋转燕发浓缩,或者称取1g蜂胶乙醇提取物试样,然后用75%乙醇超声溶解定 容至50mL,取上清液,0.454nm滤膜过滤,供液相色谱测定
8.2色谱条件 色谱柱:SepaxHPC,柱长150mm,内径4.6mm,粒度5mm;或性能相当的色谱柱
流动相流速:lmL/min
梯度洗脱,洗脱程序参见附录A中表A.1
检测波长:2131 nm
柱温:30C
GB/34782一2017 进样量:5L 8.3测定 取5AL样品溶液(8.1),水杨苷和邻苯二酚标准工作液(5.9)分别进样分析
水杨苷标准品、邻苯二酚标准品、杨树型蜂胶、杨树胶的色谱图分别参见附录B中图B.1图B.4
8.4结果计算 试样中水杨苷或邻苯二酚含量(X)以毫克每克(mg/g)表示,按式(1)计算 c,×V×A X一 XA 式中: -水杨苷或邻苯二标准溶液的浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL); c
-试样最终定容体积,单位为毫升(mL) A 试样溶液对应的峰高或峰面积; 样品质量,单位为克(g); m A -水杨苷或邻苯二酚标准溶液对应的峰高或峰面积 将符合重复性要求的两个独立测定值的算术平均值作为测定结果(mg/g),保留两位有效数字
平 行试验相对偏差不得超过2.0%
8.5结果判定 本方法所检测的水杨苷和邻苯二酚为杨树胶中含有而蜂胶中不含有的物质
如果待测样品中检测 不到水杨苷,且邻辈二盼检测浓度在蜂股乙醉提取物中低于0.21 mg/g,或在蜂胶原料样品中低于 0.12mg/g,则该样品为未检出杨树胶的样品;如果待测样品中检测不到水杨苷,但蜂胶乙醇提取物样 品中邻紫二附检渊浓度大于0.2mg/g.或待测原料蜂胶样品中邻笨二丽检测浓度大F0.12mw/e,则 该样品判定为含有杨树胶的样品;如果待测样品中检测到水杨苷,则该样品判定为含有杨树胶的样品
检测限 本标准在进样量为5L时,蜂胶乙醉提取物中水杨苷的最低检测限为0.065mg/g,邻苯二酌的最 低检测限为0.063mg/g;蜂胶原料中水杨苷的最低检测限为0.032mg/g,邻苯二酚的最低检测限为 0.031mg/g
GB/T34782一2017 附 录 A 资料性附录) 高效液相色谱梯度洗脱程序 高效液相色谱梯度洗脱程序见表A.1
表A.1高效液相色谱法梯度洗脱程序 时间/min 流速/mL/min 乙晴/% 0.5%磷酸/% 95 95 20 100 20.l 30 l00 30.l 95 38 S的
GB/34782一2017 附录B 资料性附录 水杨苷标准品、邻苯二酚标准品、杨树型蜂胶、杨树胶的色谱图 水杨苷(标准品)色谱图见图B,1
mAU 40 30- 20 0- 10 12 14 16 18 min 说明 水杨苷
注:标液浓度0.04mg/ml,出峰时间12.219min. 图B.1水杨苷(标准品)色谱图
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高效液相色谱法GB/T34782-2017在蜂胶中杨树胶检测中的应用
蜂胶是由蜜蜂采集的花粉、树脂等混合物制成的一种天然产物。其中含有众多具有保健功能的成分，如杨树胶。
杨树胶是蜜蜂从杨树上采集而来的一种树脂，具有抗菌、消炎、止血等作用，广泛应用于医药、食品等行业。
为了确定蜂胶中杨树胶的含量，需要进行检测。目前比较常用的方法是高效液相色谱法。
高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分析技术，它利用样品在流动相中的分离性差异，在固定相上进行分离和检测。
GB/T34782-2017是一项规定了在蜂胶中检测杨树胶的标准，其中采用了高效液相色谱法进行检测。
使用高效液相色谱法检测蜂胶中的杨树胶需要先对样品进行制备和前处理，然后通过高效液相色谱仪进行分离和检测。
该方法具有检测速度快、准确性高、稳定性好等优点，可以有效地检测蜂胶中的杨树胶含量。
总之，高效液相色谱法GB/T34782-2017在蜂胶中杨树胶检测中具有良好的应用前景。
