国家标准 GB/T29586一2013 苹果绵蚜检疫鉴定方法 DeteetionandidentifieatonofBriosomalanigerwn(Hasmamn) 2013-07-19发布 2013-12-06实施国家质量监督检监检疫总局发布国家标准花管理委员会国家标准
GB/T29586一2013 前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口本标淮起草单位;河南出人境检验检疫局,农业科学院郑州果树研究所、焦作林业科学研究所本标准主要起草人;赵忠懿、乔晓亮、陈汉杰,宗靖,赵自成、韩英、张金勇、董英谦
GB/T29586一2013 苹果绵蚜检疫鉴定方法范围本标准规定了苹果绵蚜Eriosomalanigerum(Hausmann)的检疫鉴定,以有翅孤雌蚜和无翅孤雌蚜的形态学特征作为依据,明确了样品采集、标本制作、检疫鉴定、标本保存的方法本标准适用于苹果,苹果属苗木及其他植物材料携带苹果绵蚜的检疫鉴定术语和定义下列术语和定义适用于本文件 2.1 体长bodylength 从额的前缘到尾片顶端的长度 2.2 体宽bodywidth 腹部最宽的宽度 2.3 femmale 孤雌蚜viiprms 在蚜虫生活周期中的孤雌生殖时期产生,包括有翅孤雌蚜和无翅孤雌蚜在有寄主转换的种类中，有翅孤雌蚜可在原生寄主和次生寄主之间转移 2.4 感觉圈sensorium" 蚜虫触角上着生的感触器官,其形状有圆形、椭圆形或环形等在其触角端节(第六节)鞭部与基部交界处和倒第2节各有一个感觉圈,称为初生感觉圈,其他称为次生感觉圈. 5 2. 尾片 cauda 腹部末节背片的延长,由第九腹节特化而成,形状多异,其上有微刺组成的瓦纹,常有数根到数十根或长或短的毛 2.6 尾板amalplate 尾片之下为肛门,其下为腹部末节的腹片,称为尾板生殖片gonapophyses 位于生殖孔的前方,生殖片(或生殖板)一般有前毛2根,后毛大都超过10根 2.8 腹管siphuneulus 位于腹部背面第5节或第6节或两节之间,是体壁上伸出的一个管子,有多种形状,基部同体壁相连
GB/T29586一2013 2.9 蜡腺waxgland 虫体背部真皮细胞间常散布有可分泌蜡粉、蜡丝的腺体 2.10 蜡片waplhate 蚜虫腺体分泌在体表形成的片状物苹果绵蚜基本信息中文名:苹果绵蚜中文别名:白色蚜虫,赤蚜、绵蚜学名;Erioomalanigerum(Hasmann) 属同翅目Homoptera,蚜总科Aphidoidea,痿绵蚜科Pemphigidae,绵蚜亚科Eriosomatinae,绵蚜属Eriosoma 苹果绵蚜可随调运苹果、苹果属植物苗木、植株,接穗以及果筐果箱等包装物进行远距离传播扩散苹果绵蚜的其他基本信息参见附录A 方法原理根据苹果绵蚜有翅孤雌蚜和无翅孤雌蚜的形态学特征,采集虫体完整或形态学特征完好的蚜虫,用体视显微镜和生物显微镜观察蚜虫的外形、触角、喙、腹部、足等,根据形态特征进行判定仪器、用具及试剂 5.1仪器体视显微镜、生物显微镜 5.2用具测微尺、,放大镜、昆虫针、,解剖针、小毛笔、剪刀、锻子、枝剪,指形管、样品袋、培养皿、标签、载玻片、盖玻片、磨口瓶 5.3试剂 75%酒精、无水酒精、二甲苯、加拿大树胶、氢氧化钾、品红、丁香油检测鉴定现场检测在检疫现场检查苗木,接穗、果实及果筐,果箱等包装物是否有虫体;,观察苹果属苗木,砧木.接穗和根部是否膨大成瘤、破裂,或苹果的尊洼及梗洼部分是否有为害症状,根据为害症状检查芽接处、嫩梢基部、嫩芽、叶腋、伤口愈合处,粗皮裂缝、顶芽、卷叶虫为害部位和其他有缝隙隐蔽处、,果实梗洼和尊褂以及根部,找到虫体进行采集(参见附录B) 要求鉴定用样品完整,形态学特征完好
GB/T29586一2013 现场检疫发现的虫体直接用小毛笔刷人盛有75%酒精的小瓶或指形管中,并在小瓶或指形管上贴上标签现场发现为害症状的,也可取被害苹果或用枝剪剪下膨大成瘤枝条等放人样品袋中封好,在样品袋上贴上标签,带回实验室收集虫体标本 6.2标本制作按附录C规定的方法进行制作鉴定方法将蚜虫标本分别放在体视显微镜和生物显微镜下,观察其外形,触角、喙,腹部,足等形态特征形态特征 6.4.1绵蚜属Eriosoma的形态特征额瘤不显,复眼有眼瘤,突出有翅孤雌蚜触角6节,触角节明显长于N十V十,次生感觉圈环状前翅翅穗大,中脉一次分支无翅孤雌蚜(第二寄主)有四排蜡片成蚜足有驸节2节腹管环状尾片圆小,尾板圆大 6.4.2苹果绵蚜无翅孤雌蚜的形态特征(参见附录D 6.4.2.1外形活体黄褐色至红褐色,体背有大体卵圆形,体长1.70 mm2.10mmm n,体宽0.93mm1.30mm 量白色长蜡毛玻片标本淡色,头部顶端稍骨化,无斑纹,由3个小眼组成复眼触角、足、尾片及生殖板灰黑色,腹管黑色体表光滑,头顶部有圆突纹,中额呈弧形 6.4.2.2触角触角粗短,有微瓦纹;全长0.31mm,为体长0.16倍,节长0.07mm,节I长度比例:50,54. 100,53,78,78十15;各节有短毛2根一4根,节毛长为该节直径0.39倍 6.4.2.3 喙喙粗,端部达后足基节,节十V长为基宽1.90倍,为后足跚节I1.70倍,有次生刚毛6根一 8根,端部短毛4根 6.4.2.4腹部腹部背片有微瓦纹气门不规则圆形,关闭,气门片突起,骨化黑褐色体背蜡腺明显，呈花瓣形,每蜡片含5个15个蜡胞腹部背片I一W各有中,侧、缘蜡片1对,W有中蜡片1对;腹部背片 I毛数;12根,18根,16根,18根,12根,8根,6根,4根,各排列一行,各毛长稍长于触角节I直径腹管半环形,围绕腹管有短毛11根16根尾片馒状,小于尾板,有微刺突瓦纹,有1对短刚毛尾板未蹦圆形.,有短刚毛38根" 48根生殖突骨化有毛12根16根 6.4.2.5 足足短粗,光滑毛少,后足股节长0.21nmm,长为该节直径3.50倍,为触角全长0.68倍;后足胫节长 0.26mm， ,为体长0.14倍,毛长为该节直径0.90倍;蹭节I毛序:3,3,2
GB/T29586一2013 6.4.3苹果绵蚜有翅孤雌蚜的形态特征(参见附录D、附录E 6.4.3.1外形体椭圆形,体长2.30" mm一2.50mm,体宽0.90mm~0.97mm ,活体头部、胸部黑色,腹部橄榄绿色,全身被白粉,腹部有白色长蜡丝玻片标本头部,胸部黑色,腹部淡色;触角、腹管、尾片、尾板和足各节均黑色 6.4.3.2触角触角G节,全长0.75mm,为体长0.31倍,有小刺突横纹,节M长0.35mm,节I一I长度比例 13,l4,100,30,30,19十5;节川有短毛7根一10根,其他各节有毛3根或4根,节果毛长为该节直径 1/6;节V、有圆形原生感觉圈各1个,节l~各有环形次生感觉圈17个~18个,3个一5个,3个或 4个,2个 6.4.3.3喙喙端部不达后足基节,节十V尖细,长为基宽2.20倍,为后足跚节1.40倍 6.4.3.4腹部腹部背片I\均有深色中,侧、缘小蜡片,节有1对中蜡片腹部背面毛稍长于腹面毛节间斑不显前翅中脉2分叉腹管环形,黑色,环基稍骨化,端径与尾片约等长,围绕腹管有短毛11根~ 15根尾片有短硬毛1对尾板有毛32根一34根 6.4.3.5 足后足股节长0.41mm,为触角节1.20倍;后足胫节长0.70mm,为体长0.29倍,毛长为该节直径0.68倍其他特征与无翅孤雌蚜相似(绵蚜属的有翅孤雌蚜分种检索表参见附录E) 结果判定以无翅孤雌蚜或有翅孤雌蚜的形态特征为鉴定依据,符合6.4.2或6.4.3的可以判定为苹果绵蚜 Eriosomalanigerum(Hausmann) 以寄主,为害症状、传播方式,生物学特性为参考标本保存 8.1浸泡标本保存将鉴定出的苹果绵蚜虫体放在盛有75%酒精的小瓶或指形管里,用橡皮塞盖好并加以标识,注明编号、中文名称,学名、科别、产地、货物名称,进出口日期,经手人签字后妥善保存6个月以上 8. 2 玻片标本保存将鉴定出的苹果绵蚜玻片标本加以标识,注明编号、中文名称、学名、科别产地、货物名称,进出口日期,经手人签字后放在标本盒里妥善保存6个月以上
GB/T29586一2013 附录A 资料性附录苹果绵蚜其他信息 A.1分布 A.1.1国外分布苹果绵蚜原产于北美东部,后传播到世界70余个国家和地区亚洲;阿拉伯,巴基斯坦、朝鲜、黎巴嫩、缅甸、孟加拉国、尼泊尔、日本,塞浦路斯、沙特阿拉伯、斯里兰卡、土耳其、锡金、叙利亚、伊拉克、伊朗、以色列,印度、约旦欧洲;阿尔巴尼亚、爱尔兰、安道尔,奥地利、保加利亚、比利时、波兰、丹麦、德国、俄罗斯、法国,芬兰、荷兰、捷克、罗马尼亚、马耳他、摩尔多瓦、挪威,葡萄牙,前南斯拉夫,瑞典、瑞士,斯洛伐克、乌克兰、西班牙、,希腊、匈牙利、意大利英国非洲;阿尔及尼亚,埃及、埃塞俄比亚、安哥拉、津巴布韦、肯尼亚、利比亚、留尼汪、马达加斯加,摩洛哥、南非、突尼斯;大洋洲:澳大利亚、新西兰北美洲;加拿大、美国、墨西哥南美洲:阿根廷,巴西、秘鲁,玻利维亚、厄瓜多尔、哥伦比亚,委内瑞拉,智利、乌拉 A.1.2国内分布我国在河北、河南、湖北、江苏、辽宁、宁夏、天津山东、陕西.山西,西藏和云南等省区局部也有发生 A.2多型和多态现象苹果绵蚜的生活周期为全周期型,有多型和多态现象有卵、干母、孤雌蚜(有翅孤雌蚜和无翅孤雌蚜),雌性蚜、雄性蚜、若蚜等型,有的型有多态现象 A.3寄主苹果Maluspumila,山荆子M.baccata、花红M.asiatica、海棠果M.pruniolia等多种苹果属果树也有报道为害山楂Crataegusinnatifida,梨属Pyrusspp.和枸子属Cotoneaserspp.植物在美国以美洲榆Unmusamericana为原生寄主 A.4危害 -般在管理粗放、树干病虫害严重以及修剪不当、树体通风透光差的果园发生较重,主要危害枝干和根在枝干上主要群集在伤口(病虫伤口、剪锯口),老皮裂缝、新梢叶腋,短果枝、果柄和果实的梗洼、尊洼处在根部主要危害裸露的或浅土中的根,或地下10cm一90cm深处的根系,最深可达2m以下诱发根瘤在美洲,该虫对植物根部的危害大于对地上部分的危害
GB/T29586一2013 枝干或根被害后,初期形成平滑而圆的瘤状突起,严重时肿瘤累累,受害侧根不能再生须根并逐渐腐烂有些肿瘤破裂后造成大小深浅不同的伤口更利于苹果绵蚜继续为害,并且容易诱发苹果腐烂病和苹果透翅蛾等病虫害的发生叶柄被害后变成黑褐色,叶片因光合作用受损而提前脱落果实梗洼、尊洼处受害时,果柄变为黑褐色,果实发育不良,果个小,着色差,并易脱落植株被害后,既损失大量养分,又影响养分和水分的吸收和输导,树势生长衰弱,缩短树龄,花芽分化少,结果少,产量、质量显著降低,抗寒、抗旱能力下降,造成很大的经济损失
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GB/T29586一2013 c 附录规范性附录苹果绵蚜标本制作 C.1浸泡标本制作现场收集到盛有75%酒精的小瓶或指形管里的标本,带回到室内后,立即把浸泡标本的小瓶或指形管的盖子换成棉花塞,然后将小瓶或指形管放在开水杯中水浴1次2次,开水凉后再换上橡皮塞有待进行检疫鉴定 C.2玻片标本制作采用加拿大胶封闭法:取75%酒精水浴加热处理后的苹果绵蚜虫体标本,用“0”号昆虫针在蚜虫胸部腹面刺穿1孔2孔,再用10%氢氧化钾液水浴加热3min10min或浸泡12h,再用小毛笔压一下,用小钩勾出残余内容物,在蒸僧水中清洗一,两次再用品红染色(或用5%酸性复红液染色30 min一 60min) ),然后用水和酒精先后清洗多余的颜色再移人无水酒精二甲苯混合液(1;1),用小毛笔除去污物制片时,把清洁的载玻片摆正,在中央滴数滴丁香油,用小锻夹放4只蚜虫标本,整理好姿势,用吸水纸吸干擦去丁香油,再加滴加拿大胶数滴,使扩散到与盖玻片面积等大,再用毁子夹住清洁的盖玻片，从蚜虫的后部方向先接触液面,然后向前徐徐盖下然后放到40C50C恒温箱内烘烤2d3d就可干透有待进行检疫鉴定
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GB/T29586一2013 附录 E 资料性附录绵蚜属(EirosomaLeach)分种检索表有翅孤雌蚜触角节V和无次生感觉圈触角节V和有次生感觉圈或至少节V有1个 2 触角全长短于1.00mm;喙节N+V为后附节I的1.00倍左右;尾板有毛31根一37根安绵蚜Eirosomaanncl harlottee 触角长1.12mm~1.23mm;喙节N十V为后附节I的0.79倍一0.86倍;尾板有毛12根~ 28根 3 喙节N+V有次生毛12根;附节I毛序3,3,3;触角节VI长于N;生殖板毛32根土贵绵蚜E.togrogumn 喙节N十V有次生毛4根一6根;酣节I毛序3,3,2;触角节V十短于N;生殖板毛14根 20根 ...* 喙节N+V长0.11mm,为后附节I的0.86;触角节V长于V,甚短于I十I;腹部背片缺蜡腺" 尾板毛12根一14根;生殖板毛至少20根盛冈绵蚜E.moriokenxe 喙节十V长0.13mm,为后附节I的0.79倍;触角节约等于或I十I;腹部背片W有蜡胞群; 山榆绵蚜E. 尾板毛18根一28根;生殖板毛14根16根 uli 触角节V、均有次生感觉圈 5. 触角节无次生感觉圈,节V有1个或2个触角节川-依次有次生感觉圈22个24个,5个,5 个，1个或2个;喙节十V为后附节I1.10 倍,有次生毛10根12根;头部背面有蜡腺1对;附节毛序3,3,3 榆绵蚜E.dilanwgiomn 触角节I-依次有次生感觉圈17或18个,3个5个,3或4个,2个;喙节N十V为后附节I1. 70 倍,有次生毛6根~8根;腹部背片I各有中、侧、缘蜡片1对,有中蜡片1对;跳节I毛序;3 3,2 苹果绵蚜E.lan" igerum 触角节I依次有次生感觉圈27 一32个一8个,1个,0个;触角长于1.00mm 7. 乌苏绵蚜E.usuensis 触角节I次生感觉圈数别样,触角远短于1.00 mm 8 触角节V十V等于或长于I,IV依次有次生感觉圈11个13个,2个,0个1个,0个杨氏绵蚜E.usuensi. 触角节V十V至多为的0.80,一次生感觉圈别样 9 触角节V次生感觉圈0个~2个,端部为基部0.32倍,原生感觉圈无睫;背片有毛10对;尾板毛 24根,生殖板毛18根短角绵蚜E.antennieurfum 触角节V次生感觉圈0个或1个,端部为基部0.40倍以上,原生感觉圈有睫;背片有毛4对7 对;尾板、生殖板毛数别样尾板有毛12根14根,生殖板毛13根;触角节I长度比例:15,15,100,22,24,l9十8 l0 多室绵蚜B.muliloculari 尾板毛与生殖毛数及触角节I长度别样 11 腹部背片有毛5对7对;尾板毛16根20根,生殖板毛15根17根;触角节I长度比例 10
GB/T29586一2013 15,14,100,32,34,2411 蜡绵蚜E.cerumn" 腹部背片有毛3对4对;尾板毛10根,生殖板毛16根18根;触角节I长度比例:16,15, 100,31,40,28十12 日本绵蚜E.jaonicum1 注引自《动物志>(昆虫纲第十四卷同翅目)

苹果绵蚜检疫鉴定方法GB/T29586-2013

一、苹果绵蚜简介

苹果绵蚜是一种危害苹果树的重要害虫，属于蚜科昆虫，成年体长仅有约1.5毫米左右，身体呈椭圆形。其特点是在苹果树上产生大量白色粘液，导致苹果叶片黄化、卷曲、变形，极大地影响了苹果树的正常生长和果实品质。

由于苹果绵蚜的危害较为严重，因此需要进行检疫鉴定，以便尽早发现并控制其传播。

二、苹果绵蚜检疫鉴定方法

苹果绵蚜的检疫鉴定方法主要包括外观鉴定和分子鉴定两种。

（一）外观鉴定

外观鉴定主要是通过观察苹果绵蚜的形态特征来进行识别。具体步骤如下：

取样：从疑似感染苹果绵蚜的样品中，随机采取10-20只苹果绵蚜作为检测样本。
外观观察：用显微镜或肉眼观察苹果绵蚜的外部形态特征，如体长、颜色、触角形态等。
判断鉴定：根据实际情况，结合国家标准GB/T29586-2013对苹果绵蚜的规定，进行判断鉴定。

（二）分子鉴定

分子鉴定主要是通过PCR技术来鉴定苹果绵蚜。具体步骤如下：

DNA提取：将苹果绵蚜样品进行DNA提取。
PCR扩增：使用专门的PCR引物对DNA进行扩增。
检测分析：将PCR扩增产物进行电泳分析，判断是否存在苹果绵蚜的DNA。

三、GB/T29586-2013对苹果绵蚜的规定

GB/T29586-2013是我国针对苹果绵蚜制定的国家标准，主要对苹果绵蚜的外观特征、分类学、检疫规定等方面进行了详细规定。其中部分规定如下：

苹果绵蚜属于昆虫纲蚜科。
苹果绵蚜成年体长约1.5mm左右，身体呈椭圆形，体表有白色粉末状物质覆盖。
苹果绵蚜危害严重，需采取有效措施进行防治，包括物理防治、化学防治等多种方法。

四、结语

苹果绵蚜是一种常见的害虫，对苹果树的生长和果实品质造成了很大的影响。因此，对于苹果绵蚜的检疫鉴定工作十分必要，可以有效控制其传播。同时，也应该加强对苹果绵蚜的防治工作，尽可能减少其危害。