GB/T29763-2013
化学品稀有鮈鲫急性毒性试验
Chemicals-RareMinnow(Gobiocyprisrarus)acutetoxicitytest
- 中国标准分类号（CCS）A80
- 国际标准分类号（ICS）11.100
- 实施日期2014-03-20
- 文件格式PDF
- 文本页数9页
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化学品稀有鮈鲫急性毒性试验
国家标准 GB/T29763一2013 化学品稀有鲍鲫急性毒性试验 Chemiclls一RareMinow(Gobioeyprisrarus)acutetostietytest 2013-09-18发布 2014-03-20实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/T29763一2013 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会(SAC/TC251)提出并归口
本标准起草单位:上海市检测中心,环境保护部化学品登记中心、科学院水生生物研究所、 检验检疫科学研究院、环境保护部南京环境科学研究所、沈阳化工研究院有限公司安全评价中心
本标淮主要起草人;殷浩文、张京债,赵华清,沈英娃、刘纯新、聂晶磊,王剑伟、陈会明,李膝、石利利、 刘济宁,王蕾、蔡磊明,赵玉艳
GB/T29763一2013 化学品稀有鲍鲫急性毒性试验 范围 本标准规定了稀有饷鲫化学品急性毒性试验的方法,包括静态试验、半静态试验和流水式试验三种 方式,受试物所需信息、原理、设备与材料,试验系统,试验程序、质量控制和结果报告 本标准适用于测试稀有饷鲫的化学品急性毒性
规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T27861 化学品鱼类急性毒性试验 术语和定义 GB/T27861界定的术语和定义适用于本文件
受试物所需信息 受试物所需信息包括: 水中溶解度; a) b 燕气压; e结构式 d 纯度; e 在水中和光照条件下的稳定性; pKa值; g水溶液中的定量分析方法 正辛醇-水的分配系数(P) h 快速生物降解试验结果
5 原理 1 55. 用于测定受试物短期暴露对稀有饷卿可能产生的影响,以评价受试物的短期毒性 将稀有鲍螂暴露于含不同浓度受试物的水溶液,以96h为试验周期,在24h、48h.72h和96h时 5.2 记录受试鱼的死亡率,确定50%稀有剑鲫死亡时的受试物浓度,用LC表示
设备与材料 仪器设备 仪器设备包括:
GB/T29763一2013 溶解氧测定仪(1%); a b 水硬度计(1mg/L); 温度控制系统(0.1C); d pH计(0.lpH); 分析天平(0.0001g) 惰性材料制成的水族箱或水槽',规格一致,体积适宜 适用于流水式的连续分配和稀释系统(如,计量泵、稀释仪等
g 6.2材料与试剂 标准稀释水用到的试剂包括: a)氯化钙 b 硫酸镁; e)碳酸氢钠; d) 氯化钾
所有试剂应是分析纯,用电导率小于或等于10s/em的蒸僧水或去离子水配制
试验系统 试验方式的选择 7.1.1在试验之前,应根据受试物在水中的化学稳定性确定合适的试验方式,从而选定需用的容器和 装置？ 7.1.2试验期间,受试物在水溶液中的浓度维持在初始实测浓度的士20%内,可采用静态试验方式
当水溶液中受试物不稳定时,即浓度变化超过士20%时,应采用半静态试验方式或流水式试验系统以维 持受试物的浓度
7.2稀有鲍鲫 7.2.1选择 试验鱼种为稀有鲍鲫(Gobiocyprisrarus). ,全长范围为30mm士10mm
应在养鱼场和实验室条 件(pH为6.0~8.5;温度为21C25C;光照为每天12h16h;溶解氧浓度不低于空气饱和值的 80%)下驯化和饲养
应保证一次试验用鱼为同一批号,规格一致、来源可靠、健康且无明显的畸形 7.2.2暂养和驯养 7.2.2.1稀有饷卿用于试验之前,应在实验室至少暂养12d
暂养条件可与驯养条件一致
7.2. 临试验前,应在符合下列条件的环境中至少驯养7d
2. 2 a水:与试验用水水质相同; b 光照:每天12h~16h; e温度:21C25C; d)溶解氧浓度;不低于空气饱和值的80%; 喂养;每周3次或每天投食,至试验开始前24h为止 1 根据样品理化特性,选择材料合适的试验容器
如,玻璃等
2 根据试验方式和负荷量进行选择
GB/T29763一2013 7.2.2.3驯养开始48h后,记录死亡率,并按下列条件处理 7d内死亡率小于5%,可用于试验
a b7d内死亡率在5%一10%之间,继续驯养7d,如果死亡不再发生,该批试验鱼可用于试验
e)7d内死亡率大于10%,舍弃整组鱼
7.3试验用水 /L 应用标准稀释水(参见附录A,曝气除氯的自来水或高质量的天然水
水的总硬度为10" mg 250 mg/L(以CaCO计),pH为6.08.5
7.4受试物的制备 7. 4.1将受试物溶解于试验用水中配制成受试物贮备液,通过稀释贮备液配制成一定浓度的试验 溶液
7. .2 难溶物质的贮备液可以通过超声分散或其他适合的物理方法配制,必要时可以使用对鱼毒性低 4 的有机溶剂、乳化剂和分散剂
使用这些物质时应加设溶剂对照试验组,且所有试验容器中的溶剂浓度 应相同,并不应超过100mg/几或100AL/L 7.4.3应在加人前调节受试物贮备液的pH,使其接近试验用水的pH
调节贮备液的pH时不应使受 试物浓度明显改变,不应发生化学反应或沉淀
宜使用HCl和NaOH来调节
7.4.4如果加人受试物后水的pH有明显变化(超出6.08.5),则重新配制试验溶液
试验程序 暴露条件 a)持续时间:96h. b 承载量;静态和半静态试验系统每升水中鱼的总湿重不超过1.0g,流水式试验系统承载量可 适当提高
光照:每天12h16h
温度;21C一25C且试验期间温度变化不超过2C d e)溶解氧浓度;不应低于空气饱和值的60%
曝气时不应使受试物浓度明显变化
f喂食:禁食
干扰;避免可能影响鱼行为的干扰
g 8.2预试验 8.2.1用以确定正式试验所需浓度范围,可选择较大范围的浓度系列,如1000mg/L、100mg/L 10mg/1、1mg/L0.1mg/儿L
每个浓度组放人的稀有剑鲫不少于3尾.不设平行组
试验时间为96h
每日记录各容器内的死鱼数,并及时取出死鱼
8.2.2如果一次预试验结果无法确定正式试验所需的浓度范围,应调整浓度范围再次进行预试验 8.3正式试验 8.3.1根据预试验,在包括使稀有饷鲫全部死亡的最低浓度和96h稀有饷卿全部存活的最高浓度之 间至少应设置5个浓度组,并以几何级数"排布
浓度间隔系数应小于或等于2.2
同时设一个空白对 照组
如使用了溶剂,应增设溶剂对照组,且所有试验容器中的溶剂浓度应相同
每一浓度组和对照组 应至少使用7尾稀有甸卿
3 即等比数列
GB/T29763一2013 8.3.2试验溶液调节至试验温度后,从驯养鱼群中随机取出鱼并随机迅速放人各试验容器中
转移期 间处理不当的鱼均应弃除
同一试验,所有试验用鱼应在30min内分组完毕
8.3.3试验期间,不应对试验液强烈曝气,溶解氧含量应高于空气饱和值的60%
试验期间禁止 喂食
8.3.4至少在24h,48h,72h和96h后检查受试鱼的状况
如果某尾鱼没有任何肉眼可见的运动 如,鳗的扇动),且碰触尾柄后无反应,即可判断该鱼已死亡
观察并记录死鱼数目后,将死鱼从容器中 取出
应在试验开始后3h或6h观察各试验组鱼的状况,并记录试验鱼的异常现象(如,鱼体侧翻,失 去平衡,游泳能力和呼吸功能减弱,色素沉积等). 8.3.5每天至少测定一次所有试验容器中的pH,溶解氧浓度和温度
试验开始和结束时也要测定
8.3.6在试验开始前,应建立有效的受试物在水中的化学分析方法
试验期间,应按以下要求测定受 试物在水中的浓度
a)静态试验方式应至少在试验开始和结束时,测定试验容器中试验溶液的受试物浓度 半静态试验方式应至少在试验开始、每一次更新前后和试验结束时,测定试验容器中试验溶 b 液的受试物浓度， 流水式试验方式应至少在试验开始、试验中期和试验结束时,测定母液和试验容器中试验溶液 的受试物浓度
8.4限度试验 采用本标准时,为证明LC是否大于100mg/L(有效成分浓度)或大于试验体系下受试物饱和溶 液浓度,可进行受试物浓度为100mg/L(有效成分浓度)或试验体系下受试物饱和溶液的限度试验
限 度试验应至少使用7尾稀有饷卿,与对照组使用的鱼数目相等
如使用了溶剂,应增设溶剂对照组,且 所有试验容器中的溶剂浓度应相同
如果试验鱼发生死亡,则应按本标准的试验程序进行完整的试验
应记录所观察到的亚致死效应(如,鱼体侧翻、失去平衡,游泳能力和呼吸功能减弱,色素沉积等)
质量控制 有效的试验应满足下列条件: 试验结束时,对照组鱼死亡率不应超过10%;如果每组鱼不到10尾,则对照组死亡不应超过 a 1尾 b)试验期间,试验液的溶解氧浓度应不低于空气饱和值的60% 试验期间,尽可能维持恒定条件,如有必要,应使用半静态或流水式试验方式; c 试验期间,试验溶液中受试物浓度不应低于配制浓度的80%
如低于配制浓度的80%,应以 d 实测浓度来表示试验结果
10 数据与报告 10.1 结果处理 10.1.1 同时绘制试验浓度对 采用合适的统计方法;计算出一定暴露时间的Lc,值及5%的置信眼
死亡率的曲线
10.1.2如果试验数据不适于用标准方法计算LC0,可用不引起死亡的最高浓度和引起100%死亡的 最低浓度估算LC,即这两个浓度的几何平均值
当进行限度试验时,应报告限度试验使用的浓度,并说明Lca大于限度试验所采取的浓度 10.1.3
GB/T29763一2013 10.1.4试验期间,如受试物实测浓度维持在配制浓度的士20%,可用配制浓度表示结果
如受试物实 测浓度无法维持在配制浓度的士20%或受试物LC.值在危害评估分级'边界值附近(如,1mg/L 10 mg/L、 ,100mg/L),应用实测浓度表示结果 10.2试验报告 试验报告应至少包括下述内容: 受试物 物理性质及相关理化特性、基础信息见第4章)等
b)稀有鲍卿 规格、来源健康状况、驯养情况等
试验条件 试验过程;静态、半静态或流水式、曝气、承载量等 水质特征;溶解氧.,H值,温度,硬度等 每24h试验溶液中的溶解氧浓度.pH值、温度(半静态试验中应在更新前和更新后分别测 pH值,温度)7 定溶解氧浓度、 制备贮备液和试验溶液的方法; 试验溶液中受试物的浓度信息 试验浓度用鱼的数目
每 试验结果 试验期间,无死亡发生的最高浓度 试验期间,导致100%死亡的最低浓度; 每个观察时间各个浓度的累计死亡率; 如有可能,每个观察时间的L.C,及其95%的置信限
试验结束后的浓度-死亡率曲线图 确定L.C值的统计学方法; 对照组的死亡率; 试验期间,可能会影响试验结果的因素; 鱼中毒的异常反应
结果讨论 4 HJ/T154一2004新化学物质危害评估导则
GB/T29763一2013 附 录A 资料性附录 标准稀释水的配制 A.1标准稀释水贮备液的配制 氧化钙溶液;将11.76CaCl2H.0溶解于水中,稀释至1L
a 硫酸镁溶液;将4.93gMgSO7H,O溶解于水中,稀释至1
b e)碳酸氢钠溶液;将2.59gNaHHcO溶解于水中,稀释至1
d)氯化钾溶液;将0.23gKCl溶解于水中,稀释至1L
A.2标准稀释水的配制 将以上四种溶液各25ml加以混合并用水稀释至1L
溶液中钙离子和镁离子的总和是 2.5mmol/L
钙离子和镁离子的浓度比例为4:1,钠离子和钾离子摩尔浓度比例为10:1
溶液中的 酸容量常数Ks，为0.8mmol/L 稀释用水应经曝气直到氧饱和为止,然后储存2d备用,在使用前可不再曝气
GB/T29763一2013 参 考 文 献 ofsubstancestoa [1]IsO7641-1water qualityDeterminationoftheacutelethal toxicity reshwaterfish Part1Static rerioHamilton-BuehananTeleostei,Cyprinidae> [Brachydanio method,1996. oftheaeelethaltoxieityfsubhstance 1sO7641-2Waterquality一Determination tOa freshwaterfish[BrachydlaniorerioHamilton-BuchananTeleostei,Cyprinidae1 Part2:Semi-static method,1996. [3ISO7641-3WatergualityDeterminationoftheacutelethaltoxicityofsubstancestoa rerioHamilton-BuchananTeleostei,Cyprinidae]一Part3:Flow freshwaterfish[Brachydanio throughmethod,1996. 国家环境保护总局(化学品测试方法x2001)03鱼类急性毒性试验 [4们 [5 OECDSERIESONTESTINGANDASSESSMENTNumber10REPO)RTOFTHE OECDWORKSHOPONSTATISTICALANALYSISOFAQUATICTOXICITYDATA,1998. [6]WorkingDocumentGuidanceDocumentonAquaticEcotoxicologyinthecontextofthe Directive91/414/EEC,2002. [[7]OECDSERIESONTESTINGANDASSESSMENTNumber23GUIDANCE D0cUMENTONAQUATIcTOXICITYTESTINGoFDIFFIcULTsUBSsTANCEsAND MIXTURES,2000.
化学品稀有鮈鲫急性毒性试验GB/T29763-2013
一、化学品稀有鮈鲫急性毒性试验概述
化学品稀有鮈鲫急性毒性试验是用来评价化学品在短期内对稀有鮈鲫的毒性作用的试验方法。该试验可以评估化学品的毒性水平，为其在环境中的使用提供参考。
二、化学品稀有鮈鲫急性毒性试验的相关参数
根据GB/T29763-2013标准，进行化学品稀有鮈鲫急性毒性试验时，需要记录以下参数：
- 实验室温度和湿度
- 水质参数：如水温、pH值、溶解氧等
- 实验鱼种的来源和养殖条件
- 化学品浓度的选择：根据试验的目的和要求，选择不同的浓度进行试验。
三、化学品稀有鮈鲫急性毒性试验的步骤
进行化学品稀有鮈鲫急性毒性试验时，需要按照以下步骤进行：
- 选用健康、无外伤的适龄实验鱼，保证体重分布均匀。
- 将实验鱼放入含有不同浓度化学品的水中，观察其行为、呼吸、死亡等现象。
- 记录实验过程中的参数，并计算出LC50值：即在一定时间内导致50%实验鱼死亡的化学品浓度。
四、注意事项
进行化学品稀有鮈鲫急性毒性试验时，还需要注意以下几个问题：
- 实验室环境应符合相关要求，如温度、湿度、光照等方面的控制。
- 实验鱼的来源应符合相关规定，避免使用野生鱼类。
- 化学品的浓度选择应根据实际需要进行调整，不得超过规定的浓度范围。
- 试验过程中应仔细记录各项参数，确保实验结果准确可靠。
总之，化学品稀有鮈鲫急性毒性试验是评估化学品毒性水平的重要手段，GB/T29763-2013标准对其进行了详细的规定。在进行试验时，需要注意相关规范要求和注意事项，确保实验结果的准确性和可靠性。
