化妆品中四十一种糖皮质激素的测定液相色谱/串联质谱法和薄层层析法

化妆品中四十一种糖皮质激素的测定液相色谱/串联质谱法和薄层层析法

国家标准 GB/T24800.2一2009 化妆品中四十一种糖皮质激素的测定 液相色谱/串联质谱法和薄层层析法 Determinationof41glcorticoids ncsmetesyIc-Ms-MsamdTLCmethud 2009-11-30发布 2010-05-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管蹬委员会国家标准
GB/T24800.2一2009 引 言 本标准中的被测物质是我国《化妆品卫生规范》规定的禁用物质,不得作为化妆品生产原料即组分 添加到化妆品中 如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时,则化妆品成品应符合《化妆品 卫生规范》对化妆品的一般要求,即在正常及合理的、可预见的使用条件下,不得对人体健康产生危害 目前我国尚未规定这些物质的限量值,本标准的制定,仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法
GB/T24800.2一2009 化妆品中四十一种糖皮质激素的测定 液相色谱/串联质谱法和薄层层析法 范围 本标准规定了化妆品中4l种糖皮质激素的液相色谱/串联质谱方法和薄层层析方法二种测定方法 本标准液相色谱/串联质谱测定方法适用于化妆品中糖皮质激素的定量测定,其检出限为 0.034g/g,定量限为0.14g/g 本标准薄层层析方法适用于化妆品中糖皮质激素的定性筛选 点样量为10mg时,其检出限为 504g/g;点样量为20mg时,其检出限可达25g/g 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准 GB/T6379.1测量方法与结果的准确度(正确度与精密度第1部分:总则与定义(GB/T6379.1 -2004,ISO5725-1;1994,IT) GB/T6379.2测量方法与结果的准确度(正确度与精密度第2部分;确定标准测量方法重复 性与再现性的基本方法(GB/T6379.22004,ISO5725-2;1994,IDT) GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682一2008,ISsO3696;1987,MOD 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 3.1 糖皮质激素gluocorticoids 糖皮质激素类药物属笛体类化合物,外用糖皮质激素的基本化学结构为氢化可的松结构 即含 17个碳原子的环戊婉并多氢菲母核,cC0和c13位上有甲基,C17位上有二碳侧链,c3位酮基和C4-c5 位双键 在此基础上,进行C1-C2位脱氢,C6-a位甲基化,C9-a位氟化.c11位郑基化等修饰后,构成一 类应用范围不同、效果强弱不同的糖皮质激素类药物 液相色谱-串联质谱法 原理 膏霜类化妆品用饱和叙化钠溶液分散,精油类化妆品用正已院分散,用乙脯从分散液中提取激素类 药物,用亚铁化钾和醋酸锌从提取液中沉淀大分子基质,经固相萃取小柱净化用反相高效液相色谱 串联质谱测定,外标法定量 4.2试剂与标准物质 甲醇:色谱纯 4.2.2 乙睛:色谱纯 4.2.3 乙酸;色谱纯 4.2.4正己婉:分析纯
GB/T24800.2一2009 4.2.5饱和氯化钠溶液 4.2.610%亚铁化钾溶液:称量115gKFe(CN)3H.o固体,用水溶解定容至1L 4.2.720%乙酸锌溶液;称量239gCH,OZn2H.o固体,用水溶解定容至1L 4.2.8Oasi、HLB固相萃取小柱'或相当者:60mg,3mL 4.2.9样品过滤器:有机膜,孔径0.2m 4.2.10标准物质:41种糖皮质激素标准物质的分子式、相对分子质量、CAs登录号列于表1,纯度不 小于99.0% 化学结构图参见附录A的图A.1 表141种糖皮质激素药物中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量 序号 中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子质量 FO Triamcinolone 124-94-7 394.1792 曲安西龙 CaHn 泼尼松龙 Prednisolone 50-24-8 CgH(O 360.1937 氢化可的松 Hydrocortisone 50-23-7 CHO 362.2093 CHO 358.1780 53-03-2 泼尼松 Prednisone 可的松 Cortisone 53-06-5 CaHaO 360.1937 甲基泼尼松龙 Methylprednisolone CaHO 83-43-2 374.2093 378-44-9 CHFO 392.1999 倍他米松 Betamethasone Ro. 地塞米松 DeXamethasone 50-02-2 392.1999 CH 氟米松 Flumethasone 2135-17-3 CaHF.O 410.1905 0 倍氯米松 Beclomethasone 4419-39-0 CHCIO 408.1704 76-25-5 434.2105 曲安奈德 Triamcinoloneacetonide caHFO 12 氟氢缩松 Fludroxycortide 1524-88-5 CaHFO 436.2261 13 曲安西龙双醋酸酯 Triameinolonediacetate 67-78-7 HFO 478.2003 14 Prednisolone21-acetate 52-21-1 402.2042 泼尼松龙醋酸酯 CHO ,Fo. 氟米龙 15 Fluoromethalone 376.2050 426-13-1 CHn 16 氢化可的松醋酸酯 Hydrocortisone21-acetate 50-03-3 CHO 404.2200 17 地夫可特 Dellazacort 441.2151 14484-47-0 CHNO 18 Fludrocortisone21-acetate 514-36-3 CHFO 422.2105 氟氢可的松醋酸酬 19 泼尼松醋酸酯 Prednisone21-acetate 125-10-0 CH.O 400.1886 20 可的松醋酸酯 Cortisone21-acetate 50-04-4 CHO 402.2042 21 53-36-1 CHO 416.2199 甲基泼尼松龙醋酸酯 Methylprednisolone21-acetate 22 倍他米松醋酸醋 987-24-6 Betamethasone21-acetate CaHFO 434.2105 23 布地奈德 Budesonide 51372-29-3 CHO 430.2355 24 氢化可的松丁酸酯 Hydrocortisone17-butyrate 13609-67-1 CH(O 432.2512 1177-87-3 FO 434.2105 地塞米松醋酸酯 25 DeXamethasone21=acetate C 1 OasisHLB固相萃取小柱是Waters公司产品的商品名称,给出这一信息是为了方便本标准的使用者 如果其 他等效产品具有相同的效果,则可使用这些等效产品
GB/T24800.2一2009 表1(续 序号 中文名称 英文名称 CAS登录号 相对分子质量 分子式 26 氟米龙醋酸 Fluorometholone17-acetate 3801-06-7 CHFO 418.2156 27 氢化可的松戊酸酣 Hvdrocortisone17-valerate 57524-89-7 CHO. 446.2668 28 Triancinoloneacetonideacetate 3870-07-3 CHFO 476.221 曲安奈德醋酸酯 29 氟轻松醋酸酯 Fluocinonide 356-12-7 CHFO 494.21l 30 二氟拉松双醋酸酯 Dflorasonediacetate 33564-31-7 CHF(O 494.21l1 2152-44-5 CHO 476.257 31 倍他米松戊酸脉 Betamethasone17-valerate 32 泼尼卡配 73771-04-7 C;HO 488,241 Prednicarbate 33 哈西奈德 Haeinonide 3093-35-4 CgHCIFO 454.1922 .Co 阿氯米松双丙酸醋 520.2228 34 Alelomethasonedipropionate 66734-13-2 CH 35 51022-69-6 CHFO 502.2367 安西奈德 Amcinonide 36 氯倍他索丙酸酯 Clobetasol17-propionate 25122-46-7 CHCIFO 466.1922 氟替卡松丙酸醋 37 Fluticasonepropionate 80474-l4-2 CHFOS 500.1844 83919-23-7" 520.1419 莫米他松糠酸酯 c;HCl,o. 38 Mometasonefuroate 39 倍他米松双丙酸醋 5593-20-4 CHFO 504.2523 Betamethasonedipropionate 40 倍氯米松双丙酸酯 Beclometasonedipropionate 5534-09-8 CH;CIO 520.2228 41 氯倍他松丁酸 CH.CIFO 25122-57-0 Clobetasone17-butyrate 478.1922 4. .2.11标准贮备液(1mg/mL);准确称取标准物质(4.2.l0)各10.0mg,用甲醇分别溶解定容至 10.0mL,于一18C下冷冻保存 标准混合工作溶液;分别取(4.2.11)标准贮备液1.0ml混合,用甲醉定容于50mL.制成浓 4.2.12 度为20"g/ml的标准混合储备溶液，于一18C下冷冻保存 临用时用40%乙晴水溶液稀释成 ,0.20 0.05"g/mL..0.10g/mL、 04g/'mL.0.404g/mL.0.80闪g/mL系列浓度的标准混合工作溶液,用 于制作标准曲线 4.3仪器 4.3.1高效液相色谐-串联质诸检测器(EsI源》. ;0.01 4.3.2分析天平:感量0.1mg; mg 4 3. .3 漩涡混合器 4.3.4离心机:转速5000r/min,容量10mL;50mL 试样制备 提取 4.4.1.1膏霜类化妆品 称取0.2g样品(精确至0.01g)于10mL.具塞塑料离心管中,加人3ml饱和氯化钠溶液(4.2.5). 于漩涡混合器上混合使样品分散,准确加人2ml乙晴,充分涡旋提取2nmin,5000r/min离心10min， 吸出上层清液于另一50mL具塞塑料离心管中,下层氯化钠溶液用2ml乙睛重复提取步骤一次,合并 二次乙腊提取液,往提取液中准确加人40mL高纯水,混匀,加人亚铁氮化钾溶液(4.2.6)0.2ml,混 匀,加人乙酸锌溶液(4.2.7)0.2mL,混匀,5000r/min离心l0min,清液待进行固相萃取小柱净化
GB/T24800.2一2009 4.4.1.2精油类化妆品 称取0.5g样品(精确至0.01g)于20ml尖底具塞塑料离心管中,加人正己烧4ml,于漩涡混合 器上混合至样品分散,准确加人50%乙晴水溶液4ml,充分漩涡提取2min,5000r/min离心10min, 吸取下层提取液至一50ml具塞塑料离心管中,上层正己婉用4ml50%乙睛水溶液重复上述提取步 骤一次,合并二次50%乙睛提取液,往提取液中准确加人36mL高纯水,混合,加人亚铁氧化钾溶液 4.2.6)0.1mL.混匀.加人乙酸锌溶液(4.2.7)0.1mL混匀.5000r/min离心10min.清液待进行固 相萃取小柱净化 4.4.1.3爽肤水类,洗面奶类、面膜类等化妆品 按4.4.1.1的方法处理 4.4.2净化 OasisHLB固相萃取小柱(4.2.8)接上固相萃取装置,小柱上端紧密连接一20ml50ml垫有滤 纸的磨口漏斗,小柱预先依次用5ml甲醇、10ml水进行活化 将待净化的样品清液(4.4.1)倒人漏 斗,经滤纸过滤后流经小柱,待样品溶液自然流尽后,用10%的乙晴水溶液10ml清洗小柱,待清洗液 自然流尽后,取下漏斗,用吸球吹出小柱中的残留液 在柱出口处接一10mL.具塞玻璃离心管,用 4mL.甲醇淋洗小柱,待甲醇自然流尽后,用吸球吹出小柱中残留液 取下离心管,准确加人4.0ml高 纯水,混合,经0.2Am样品滤器过滤后作为测定液 也可将接收的4mL甲醇用氮气吹干,根据需要的 浓度用50%的甲醇水溶液重新溶解定容后测定 4.5测定 4.5.1液相色谱参考条件 以下为液相色谱参考条件: a 色谱柱:SBCs,50mm×2.1mm(内径),l.8Am,或相当者; b)柱温:室温; 液相色谱流动相及参考分离条件见表2; c d)进样体积:5AL 表2液相色谱流动相及参考分离条件 时间/min 流速/ml/min 流动相A(水,含0.1%乙酸 流动相B乙睛,含0.1%乙酸) 32 0.3 68 0.3 68 32 12 5 75 14 0,3 25 75 14.1 0.3 68 32 32 16 0.3 68 4.5.2质谱参考条件 以下为质谱参考条件 电离方式电喷雾电离,Es(十). a) 离子喷雾电压:4kV b c雾化气:氮气,38Psi; D 干燥气:氮气,流速;12L/min,温度;350C; 碰撞气;氮气 e f 检测方式:多反应监测(MRM). 41种糖皮质激素药物的质谱测定参数见表3
GB/T24800.2?2009 341????? ? ? ? ?(??? ? 395.2 140 0,86 394.1792 225.1(14 357.1(8) 1.39 360,1937 361.2(110 146.9(2o) 343.1(6) 1.38 362.2093 363.2(130 121.0(24) 105.1(50) ? 1.47 358.178o 359.2(110 147.0(24 341.1(6) ? 1.53 360.1937 361.2(150 163.1(20 121.030 ? 2.01 374.2093 375.2(l10 357.16) 161.l(20) 355.0(4) 146.8(24 2.26 392.1999 393.2(130 393 .2(130) 55. 0(4 2.42 392.1999 146.8(24 2.36 410.1905 4l1.2(120 253.0(1o 121.1(34 3.15 408.1704 409.2(110 391.1(6) 146.9(30) 10 11 ε 434.2105 435.2(110) 396,9(1o) 3.81 338.9(10 12 3.55 436.2261 437.2(160) 120.8(40) 180.9(30) 13 ? 4.60 478.2003 479.2(140 321.0(10 440.9(4) 14 4.79 402.2042 403.2(l10 146.8(24 384.9(6) 15 376.2050 377.2(1l0 278.9(10 4.35 320,9(8) 16 4.66 404.220o 405.2(150 309,l(12 120.8(34) ??? 17 5.35 441.215l 442.2(180) 123.9(50) 141.9(36 ? 18 ?? 4.95 422.2105 423.2(160 238.9(22 120.9(36 19 ? 5.64 400.1886 401.2(120 295.0(8) 146.8(24 20 ?? 5.75 402.2042 403.2(160 162.8(24 343.0(16 21 ? 6.42 416.2199 417.2(110 399.2(6) 253.2(18) ? 435.2(11o) 22 66 434.2105 309,0(8 .50 337.0(8) 23 7.88 430.2355 431.2(110 413.1(6 146.9(30 ε 24 7.23 432,2512 433.2(140 120.8(24 345.0(8) ??? 25 ? 6,95 434.2105 435.2(110 309.08) 337.0(8) 26 7.45 18.2156 419.2(1l0 279.0(10 321.0(8 27 ?? 446.2668 8.56 447.3(140 120.8(30 345.2(8 28 ε? 8.60 476.2210 477.2(l10 320.8(12 338.9(10) 29 ? 8.48 494.2116 495.2(120 120.8(40 337.0(12) 30 8.47 494.2116 495.2(120 316.8(8 278.8(1o) ? 31 9.45 476.2574 477.3(11o) 354.9(4 278.8(14 32 ? 10.28 488.2410 489.2(120) 114.8(12) 380.9(6) 33 ε 9,66 454.1922 455.2(160 121.0(40 104.9(48) 34 ? 10.32 520,2228 521.2(130 301.0(10 279.0(1o 35 ε 10.29 502.2367 503.2(l10 321.0(14 338.9(10
GB/T24800.2一2009 表3(续 号 序 药物名称 出峰时间 相对分子质量 母离子锥孔电压 子离子碰撞能量 1922 氯倍他索丙酸 467.2(11o) 36 10.26 466， 354.9(8 372.9(6) 37 10.25 500,1844 501.2(110 292.9(1o 312.9(8) 氧替卡松丙酸醋 38 10,65 520.1419 521.1(120 503,0(4 263.0(24 莫米他松糠酸脱 39 倍他米松双丙酸醋 10.68 504.2523 505.2(110 278.9(12 318,9(10) 40 倍氯米松双丙酸酯 1l.43 520.2228 521.2(120 319.0(10 503.0(4 41 氯倍他松丁酸酯 ll.71 478.1922 479.2(150 278.9(14 342.8(12) 4.5.3测定结果 4.5.3.1 定性结果 在相同实验条件下测定标准溶液和样品溶液,如果样品溶液中检出的色谱峰的保留时间与标准溶 液中的某种组分峰的保留时间一致,并且所选择的两对子离子的质荷比一致,样品定性离子相对丰度与 浓度相当标准工作溶液的定性离子的相对丰度进行比较时,相对偏差不超过表4规定的范围,则可判定 样品中存在该组分 41种糖皮质激素标准物质提取离子(定量)质谐图参见附录B的图B.1 4.5.3.2定量结果 相同实验条件下测定标准溶液和样品溶液,制作标准曲线,样品中糖皮质激素的含量用外标法定 量,按式(l)计算含量 R=c;×V/mn 式中 -样品中某种组分含量,单位为微克每克(g/g) R 由标准曲线得出的样液中某种组分的浓度,单位为微克每毫升G 1g/ml); 48 样液定容体积,单位为毫升(mL); 样品质量,单位为克(g) 4.6精密度 本标准的精密度数据是拨照GB/T6379.1和GB/T6379.2的规定确定的,重复性和再现性的值 以95%的可信度来计算 膏霜类和精油类化妆品重复性和再现性标准差的值参见附录c的表c.1 表4定性确定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% >50 >20一50 >10一2o <10o 允许的相对偏差/% 士20 士25 士30 土50 薄层层析法 5.1原理 化妆品中的糖皮质激素药物经提取、净化、浓缩后,点于高效硅胶板上,经展开、显色后与标准品的 RI值及显色特征进行比较,判断样品中是否存在糖皮质激素 试剂与材料 5 2 除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682中规定的一级水 与4.2相同的试剂与材 料不再列出 5.2.1乙酸乙酯 5.2.2正已烧 3 5.2. 无水乙醇
GB/T24800.2一2009 5.2.4甲醉 5 .2.5浓硫酸 5.2.6无水乙酸 5.2.7茴香醛anisaldehyde);对甲氧基苯甲醛,CAs井[123-11-5] 5.2.8四氮哗蓝(luetetrazolium):CAS井[1871-22-3] 5.2.9氢氧化钠 5.2.1012%NaOH甲醉溶液;12gNaOH溶于100mL的甲醉中 5.2.11标准混合工作溶液:分别取(4.2.11)标准贮备液各0.5mL,按表5分组分别混合至10m容 量瓶中,用甲醇定容,浓度为504g/mL 5.2.12薄层层析板;高效硅胶板F254s?,l00mm×100mm,涂层厚度0.20mm,使用前在110C烘 箱中活化1h,置于干燥器中放冷至室温,备用 5.2.13展开剂:乙酸乙酯十正己炕(11+10,体积比 5.2.14显色剂1:在冰水浴中依次向90mL的无水乙醇(5.2.3)中加人5mL浓硫酸(5.2.5)和1mL 无水乙酸(5.2.6),待混合均匀冷却后再向其中加人5mL的茴香醛(5.2.7),混合均匀,待用 5.2.15显色剂2称取20mg的四氮幽蓝(5.2.8)溶于10ml 甲醇(5.2.4)溶液,再加人10mL12% NaOH甲醇溶液(5.2.10),现用现配 5.3仪器 5.3.1薄层色谱展开槽 5.3.2微量注射器;20L 5.3.3玻璃喷雾器 5.3.4电吹风 5.3.5紫外灯:254nm. 5.3.6其他仪器同4.3 5.4试样制备 5.4.1非精油类化妆品 称取0.2！样品(精确至0.01g)于10ml 具塞塑料离心管中,加人3mL 饱和氧化钠溶液 (4.2.5),于涡旋混合器上混合至样品分散,准确加人2ml乙睛,充分涡旋提取2min,5000r/min离 心10min,吸出上层清液于另一50mL具塞塑料离心管中,下层氯化钠溶液用2mL乙睛重复提取步骤 -次,合并二次乙睛提取液,往提取液中准确加人40mL高纯水,混匀,加人亚铁氮化钾溶液(4.2.6) 0.2ml混匀,加人乙酸锌溶液(4.2.7)0.2ml混匀,5000r/min离心l0min,清液待进行固相萃取小 柱净化 OasisHLB固相萃取小柱(4.2.8)接上固相萃取装置,小柱上端紧密连接一20ml一50ml垫有 滤纸的磨口漏斗,小柱预先依次用5ml甲醇、10ml水进行活化 将待净化的样品溶液倒人漏斗经 滤纸过滤后流经小柱,待样品溶液自然流尽后,用10%的乙睛水溶液10mL清洗小柱,待清洗液自然流 尽后,取下漏斗,用吸球吹出小柱中的残留溶液 在柱出口处接一l0ml具塞玻璃离心管,用4ml甲 醇淋洗小柱,待甲醇自然流尽后,用吸球吹出柱中残留甲醉醇 用氮气将洗脱液吹至近干后准确加人 0.lmL甲醇,混匀后用于点板 5.4.2精油类化妆品 称取0.5g样品于10ml具塞塑料离心管中,加人0.5ml正己婉(5.2.2)混合均匀,准确加人 5000r/min离心5nin,甲醇层溶液直接用于点板 0.5ml.甲醇(5.2.4),于漩涡混合器上充分提取2 min， 21 本标准使用的高效硅胶板F254s是MERCK公司的产品,商品编号为1.15696 给出这一信息是为了方便本 标准的使用者 如果其他等效产品具有相同的效果,则可使用这些等效产品
GB/T24800.2一2009 5.5薄层层析 5.5.1预展 用微量注射器在距离薄层色谱板下端1.0cm的位置点上10.0l20.0AL的点样液,同时在水 平位置上点上标准溶液(5.2.ll)作为对照 同时点两张层析板 把薄层层析板放人装有甲醇的展开槽 中,按倾斜上行法展开0.6cm~1.0cm,从展开槽中取出薄层板,用电吹风将展开剂吹干,放置到干燥 器中冷至室温,备用 5.5.2展开及显色 将(5.5.1)项中预展后的薄层层析板放人预先用展开剂(5.2.13)蒸汽饱和10min后的展开槽中 按倾斜上行法展开,当展开剂前沿到达薄层板顶端时,从展开槽中取出薄层板,用电吹风将展开剂完全 吹干后,置于紫外灯(5.3.5)下观察,用铅笔记录可疑点 然后将显色剂1(5.2.14)均匀喷雾在其中的 -张层析板上,用电吹风把展开剂吹干后放人100ll0C的恒温干燥箱中烘7min~10mi使之显 色,取出后立即目视观察显色结果 再将显色剂2(5.2.15)均匀的喷雾在另一张层析板上,立即直接目 视观察显色结果 1种糖皮质激素的参考R值、四氮陛蓝和首香醛参考显色特征见表5 组种糖皮质激素标准物质(5组)及实测样品的参考薄层色谱图参见附录D的图D.1 注;显色结果需马上目视观察 结果判定 在紫外灯下观察,若试样无与标准品R值相同的斑点,即可判定该样品中未检出41种糖皮质 激素; 若试样中存在与标准品R值相同的斑点,且经四氮哗蓝和茴香醛显色后具有与标准品相同特征、 即可判定该样品含有何种糖皮质激素; 若试样中存在与标准品相同RI值的斑点,但经四氮哗蓝和茴香醛显色后与标准品显色特征有异 则需通过液相色谱/串联质谱法(第4章)进行确认 表541种糖皮质激素的分组、Rf值、四氮陛蓝及茴香醛的显色特征 Rf 分组 标准物质 四氮幽蓝显色 酋香醛显色 泼尼松 紫色 黛紫 0.09 0.18 曲安奈德 紫色 棕绿 0.23 黛紫 氢化可的松丁酸酯 紫色 0.27 紫色 黛紫 第I组氢化可的松戊酸酯 二氟拉松双醋酸酯 紫色 藏青 0.34 0.45 氟轻松醋酸酯 紫色 棕绿 0.55 泼尼卡酯 紫色 铜绿 .05 泼尼松龙 紫色 铜绿 0. 倍他米松 0.14 紫色 铜绿 0.26 倍他米松戊酸酯 铜绿 紫色 氟米龙 不显色 橙色 0.34 第I组 倍他米松醋酸酯 紫色 铜绿 0.43 0.57 倍他米松双丙酸酯 紫色 铜绿 哈西奈德 驼色 驼色 0.63 0.73 氟替卡松丙酸前 紫色 铜绿
GB/T24800.2?2009 5( ? Rf ?? ?? ? 0.02 ? ? ? ? 0.06 ? 0.14 ? ? ε 0,27 ? ? ? ? 0.28 ? ? ??? 0.29 ? 0.43 ? ?? ε 0.44 ? ? ?? 0.56 ? ? ? 0.10 0.16 ? ? ? 0.21 ? ? ? 0.25 0.31 ? N ? ε? 0.44 ? ? ? ? 0.48 0.63 ? ? ? ?? 0.69 ? ? 0.05 ? ? ?? ? 0.10 0.19 ? ? 0.20 ? ? V ? 0.27 ? 0,32 ?? ? 0.45 ? ??? ? 0.62 ? ?
GB/T24800.2一2009 附 录A 资料性附录 41种糖皮质激素的英文名称,分子式、相对分子质量.CAs登录号及化学结构图 OH Prenisoicne0248 ydxxt6ane937 Tindinolre124纠7 53_032 CH.O361937 35.170o ,地o派nme c;Ma双x3 CnHo: oH H0 nOH aOH H OH 曲安西龙 泼尼松龙 泼尼松 氢化可的松 5065 Mypnsloee432 Deameone9.2 Beameha50rne37844g 157 O37428653 C.Os oH cad",o欺"物0 Ca为,欺1物 N0 可的松 甲基泼尼松龙 倍他米松 地塞米松 hwsone2135_17_3 Bedha50ne4419390 1524.鹅s F0xy0ce Tdrsre就onie传25 41.190s CFo，4362261 c-片,coa1e C片闷,似218 OH 氟松 倍尔来松 氟氢缩松 曲安奈德 Tiancskreae甩 Fluoromehaione426_13" Horse21-E关的 Petste2-祝t兑1 CH.，们320m1 CH,ro，376.20s ea".O4似20 CMyo4位32 HO. 安西龙双醋酸 泼尼松龙酷酸m 米龙 氛化可的松酸加 Flssocosoie21cee54363 Peisone21放e125100 0_04" c,A,ro,216 c;'.O，4001860 c;Hwo,422R CHNO. 地夫可特 可的松酬酸脂 泼尼松醋酸丽 东氢可的松酸N 图A.141种糖皮质激素的英文名称、分子式相对分子质量、 CAS登录号及化学结构图 10
GB/T24800.2?2009 ute Btamet521-9246 1n_673 BdS00 1t?" Bues0niee5137223 110 cH.o4t6.21sn CaHFo4342105 CO4302355 ?? ε ? ? nctire17yre136o. ne17-vele575289 CHFO;418216 42665 CHFo4732210 cС423t2 CHuA ?? ???N A ???N i BMma7E Daoraonedactate335631 Pwdnicatle737710M Ca"4218 Ca'A21s p"no4x410 cMgro,472574 ? ?N ?N Arhrredpcoc742 mcincn51026 Hion3H amea7pp1o 022367 G,,c2 CHRO C;/H.CFO,41822 ep".oAFo,12 ??N ?? ε Bce8 00474_142 espi550304 dlpnt56940 tule839192? CHFo,ssa1046 CH,Fo4223 ecos302270 5221419 CPog 濨? ?? ? ? Cobeas0e17yale2512257_0 oaN,cro4?8 ?? ?A.1 1l
GB/T24800.2一2009 附 录 B 资料性附录 41种糖皮质激素标准物质提取离子(定量)质谱图 sR(479 clobetasone R5L.I>3L9.心 R(5211 0.O -R52. DetaemaSOe hVdrOCOtiSOne fluOrOmehOlOn Detametha5One21-aCetatO 图B.141种糖皮质激素标准物质提取离子(定量)质谱图 12
GB/T24800.2一2009 c 附 录 资料性附录 膏霜类、精油类化妆品中糖皮质激素测定的重复性和再现性标准差 表C.1膏霜类、精油类化妆品中糖皮质激素含量重复性和再现性标准差 膏霜类 精油类 含量范围 编号 称 4g/g重复性标准差(s,再现性标准差SR重复性标准差(S,再现性标准差(SR S =0.0345 SR=0.1952m S,=0,056l" SR=0,056lm 曲安西龙 0.55.0 0.0997 -0.057o 十0.0040 +0.0040 S =0.1123nn =0.2338n S,==0.0236n Se SR=0.0567m 氢化可的松 0.55.0 -0.0497 -0.1167 +0.0061 -0.0057 S，=0.13601 S=0.27501 S =0.0577n SR=0.l1103m 泼尼松龙 0.55.0 -0.0768 -0,1538 -0.0022 一0.0145 S =0.1157n S=0.2505 =0.0321n SR=0.0573m 泼尼松 0.55.0 -0.0254 十0.0179 十0.0003 +0.0002 S =0.0476n S=0.2307 S.=0.0205n S=0,0327m 可的松 0.55.0 -0.0015 -0.0793 十0.0103 +0.0158 S，=0.1256 S=0.19701 S =0.0257n S=0,0187m 甲基泼尼松龙 0.55.0 -0.0806 -0.0887 十0.0125 +0.0099 S =0.0217 SR=0.0479mn S,=0,034l" SR=0,0358m 倍他米松 0.55.0 0.0200 十0.0314 十0.0056 +0.0066 S.=0.0217n SR=0.0479mn S,=0.0432m SR=0.0524m 地塞米松 0.55.0 0.0200 十0.0314 -0.0012 +0.0011 S，=0.04451 SR=0,1763m S,=0.0432m SR=0.0524m 氧米松 0.55.0 +0.0110 -0.0371 -0.0012 +0.0011 S =0.0872n S.=0.0332n SR=0,094lm SR=0.0728m 倍氧米松 10 0.5一5.0 -0,0610 十0.0231 十0.0061 -0.0032 S，=0.0472 S.=0.0279n SR=0.1375m SR=0.0436m 氧氢缩松 1l 0.55.0 +0.0361 -0.0109 十0.0044 +0.0016 S，=0.0292 S =0.0474n SR=0.0910m S=0,0614m 倍他米松醋酸酯 12 0.55.0 +0.0239 -0.0015 -0.0036 -0.0031 S，=0.0292 S.=0.0475 SR=0.091Om SR=0.0604m 地塞米松醋酸酯 13 0.55.0 +0.0239 -0.0o15 -0.0034 -0.0035 S,=0.0572m SR=0.0995mn S,=0.0215m SR=0.0514m 14 曲安奈德 0.55.0 0.0409 十0.0179 十0.0053 -0.0038 S,=0.0695m S,=0,0159"n SR=0,0312m SR=0,l1696m 氟米龙 15 0.55.0 -0,0067 -0.0250 十0,0045 十0.0015 S =0.0900n S.=0.0274n SR=0.1464m SR=0.060lm 16 曲安西龙双醋酸脱 0.5一5.0 -0,0067 十0.0057 十0,0043 0.0092 S，=0.0425 S=0.2453n S =0.0480n SR=0.0764m 氢化可的松醋酸酯 0.55.0 +0.0384 -0.0155 十0.0022 -0.0081 13
GB/T24800.2一2009 表C.1续) 背霜类 精油类 含量范围 称 编号 pg/g)重复性标准差(s,再现性标准差(Sw重复性标准差(s,再现性标准差(S =0.0303m S=0.2234m s,=0.0257m S=0.0487m 泼尼松龙醋酸酯 18 0.55.0 十0.0596 -0.0450 十0.0051 -0.0054 S S,=0.0465m SR=0.2158m S,=0.0379m =0.0532m" 氟氢可的松醋酸醋 19 0.55.0 十0.0558 -0.0282 十0.0009 -0.0028 S =0.0564m SR=0.1592mn =0.0378m =0.0404m" 20 地夫可特 0.55.o 十0.0039 一0.00 -0.0341 十0.0016 S=0.0527m S =0.0818n =0.2438n =0.0350n 泼尼松醋酸酯 0.5~5.0 2 0.0282 0.1152 十0.0008 -0.0018 S,=0.0219m SR=0.1517m s,=0.0189m S =0.0240m" 22 可的松醋酸酯 0.55.0 十0.0461 -0.0193 -0.0001 -0.0002 =0.0557m S=0.1402mn S, =0.030lm S=0.0490m 23 甲基泼尼松龙醋酸酯0.55.0 十0.0090 +0.0354 +0.0054 +0.0004 S=0.045了mn S，=0.0262 S=0.1292 =0.0346n 24 氢化可的松丁酸醋 0,55.0 +0.0463 -0.0294 -0.0041 -0.0035 S,=0.025lm S=0.0996m S,=0.0357m SR=0.0556m 氟米龙醋酸酯 25 0.55.0 十0.0667 十0.0032 -0.0052 -0,0042 S,=0.0267m S=0.1056mn S,=0.0356m S=0.0516n 26 布地奈德 0.55.o 十0.0604 十0.0222 十0.0004 十0.0012 S =0.0313n S=0.1464n =0.0353n S=0.0566 27 0.5~5.o 二氧拉松双醋酸配 0.0339 -0.0128 十0.0027 -0.0001 S -0.0208m SR=0.1044mn =0.0388m =0.0495m 28 氟轻松醋酸酯 0.5一5.0 十0.0546 十0.0148 十0.0006 -0,003 -0.0267m SR=0.0537m1 =0.0434m S=0.0626m 29 氢化可的松戊酸酯 0.55.0 +0.0682 十0.0714 -0.0082 -0.0040 =0.0212 S=0.0828nn =0.0345nn S=0.0624n 30 曲安奈德醋酸酯 0.55.0 0.0510 十0.0096 -0.0002 -0.0006 =0.0564m S=0.0744mm S, =0.020lm S =0.0417mn 31 倍他米松戊酸醋 0.5~5.0 十0.0053 十0.0285 十0.0009 -0.0052 s,=0.0135m S=0.1190m =0.0369m S=0.0492m 32 哈西奈德 0.55.0 +0.0689 十0.0233 -0.000" +0.0023 S，=0.0253 S=0.0996m =0.0204 S=0.0356m 0.5~5.o 氧倍他索丙酸酯 33 +0.0718 十0.0102 十0.004 -0.0006 -0.0890mn S =0.0870m -0.0254m S =0.0509mn 34 泼尼卡醋 0.5一5.0 -0.035l 十0.0l95 十0.0008 -0.0l02 =0.0887m S=0.093lmn S,=0.035lm S=0.0527m 35 安西奈德 0.55.0 -0.0434 十0.0274 十0.0019 -0.0021 S,=0.0243m SR=0.0896m S,=0.0305m S=0.0507m 氧替卡松丙酸醋 36 0.55.0 +0.0355 +0.0111 十0.0050 -0.0017 14
GB/T24800.2一2009 表C.1续) 背霜类 精油类 含量范围 称 编号 pg/g)重复性标准差(s,)再现性标准差(S重复性标准差(s,再现性标准差(S s,=0.0236mn S;=0.0877m S,=0.0289m S=0.0493m 37 阿氯米松双丙酸醋 0.5~5.0 +0.0432 十0.0010 十0,0046 -0.0023 =0.0297m S;=0.0714mm S,=0.0312mn S=0.062lm 38 倍他米松双丙酸醋 0.55.0 +0.0325 十0.0207 十0,0002 -0.0062 -0.0264m SR=0.0930m =0.0320m =0.0412m 39 倍氯米松双丙酸酯 0.55.0 +0.0256 -0.0035 十0.0014 -0.0006 -0.0185m SR=0.0848m1 =0.032lm =0.0413m 莫米他松橄酸酯 0.55.0 +0.0376 十0.0045 十0.0015 -0.0008 =0.0505m Sk=0.0987m =0.0269m =0.039lm 氯倍他松丁酸酯 0.55.0 +0.0112 +0.0078 -0.0042 -0.0043 注，m为两次测定结果的算术平均值
GB/T24800.2一2009 附 D 录 资料性附录 41种糖皮质激素标准物质(5组)及实测样品的薄层色谱图 2 l VV a)紫外灯下的薄层层析板 b)四氮幽蓝显色的薄层层析板 e)茴香醛显色的薄层层析板 注1:I、I、川、、V为糖皮质激素标准物质 注21,2,3为实测样品 图D.141种糖皮质激素标准物质(5组)及实测样品的薄层色谱图