芒果叶中芒果苷的测定高效液相色谱法

芒果叶中芒果苷的测定高效液相色谱法

国家标准 GB/T40832一2021 芒果叶中芒果苷的测定 高效液相色谱法 Determinationofmangiferininmangoleaves- Highperformaneeliquidchromatography 2021-10-11发布 2022-05-01实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标涯花管理委员会国家标准
GB/T40832一2021 前 言 本文件按照GB/T1.1一2020<标准化工作导则第1部分;标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 本文件由标准化研究院提出并归口 本文件起草单位;热带农业科学院分析测试中心深圳市品牌建设促进中心、重庆两江创享医 药检验认证科技有限公司、标准化研究院、食药环检验研究院(山东)集团有限公司、中山内得农业 科技有限公司、大连依利特分析仪器有限公司,华测检测认证集团股份有限公司、江苏康华信息科技有 限公司、中关村国际医药检验认证科技有限公司 本文件主要起草人;阳辛凤,席兴军、兰韬、杨志花、何涛、孙学文、韩丙军,赵方方,张月、孙宇、郭晓杰、 唐涛、王盼、王芳、施珊玲、张苏、杨福兴、周旋、李忍、刘治平
GB/T40832一2021 芒果叶中芒果苷的测定 高效液相色谱法 范围 本文件描述了芒果叶中芒果苷含量的高效液相色谱法测定方法 本文件适用于芒果叶中芒果苷含量的测定 对含有芒果苷产品的含量检测可参照使用 本文件检出限为0.75mg/g,定量限为2.50mg/g 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义 原理 样品中加人70%甲醇溶液，经超声辅助提取,高效液相色谱法分离及在258nm下测定,根据保留 时间定性,外标法定量 5 试剂与材料 除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水应符合GB/T6682中一级水的要求 5.1试剂 5.1.1甲醉(CH,OH,CAs号:67-56-1);色谱纯 5.1.2乙腊(CH.CN,CAS号:75-05-8);色谱纯 5.1.3甲酸(HcooH,CAs号:64-18-6);色谱纯 5.2溶液配制 5.2.170%体积分数)甲醇溶液;量取700mL甲醇,加300mL超纯水,混匀 5.2.2流动相A:0.1%甲酸溶液,1L超纯水中加人1mL 甲酸,充分混匀 5.3标准品 芒果昔(CHOi,CAs号;4773-96-0);纯度>98%
GB/T40832一2021 5.4标准溶液配置 5.4.1芒果苷标准储备溶液(2004g/mL);称取10mg(精确至0.0001g)芒果苷,置于50mL容量瓶 中,加甲醇超声溶解并定容至刻度线,配制成200g/mL的标准储备溶液,一18C冰箱避光保存,有效 期3个月 5.4.2芒果苷中间浓度标准溶液:准确移取0.5mL芒果苷标准储备溶液于10mL容量瓶中,用甲醇稀 释至定容刻度线,摇匀,得到芒果苷中间浓度标准溶液(质量浓度104g/mL. 5.4.3芒果昔系列标准工作溶液;分别准确移取0.1mL,0.2mL、0.5mL、1mL、2mL芒果背中间浓度 标准溶液于不同的10mL容量瓶中,用70%甲醇溶液稀释、定容,摇匀,得到芒果苷系列标准工作溶液 质量浓度分别为0.14g/mL,0.24g/ml,0.5"g/ml、l.04g/mL,2.04g/mL) 5.5材料 5.5.1离心管:100ml(螺旋盖). 5.5.2三角瓶:250ml磨口塞) 5.5.3容量瓶;10mL,.50mL,100ml,250ml 5.5.4刻度玻璃移液管;0.1mL、0.2ml、0.5ml、1ml 5.5.5聚四氟乙烯(PTFE)微孔滤膜(孔径0.22m,直径13mm)或者相当者 仪器和设备 6.1高效液相色谱仪;配紫外(UV)检测器或二极管阵列检测器(DAD或PDA) 6.2电子天平;感量0.0001g和0.01g 6.3超声波振荡仪;功率不低于250w,或相当的设备 6.4组织捣碎机 6.5高速组织匀浆机 试样制备与保存 新鲜芒果叶片充分打碎、混匀,置于洁净容器中,密封并做好标记,于一18C冰箱避光保存 8 测定步骤 8.1提取 芒果叶试样解冻,称取lg精确至0.01g),置于100ml离心管中,加人提取溶剂70%甲醉溶液 60mL,18000r/min高速匀浆1nmin,将样品转移到250ml.具塞磨口三角瓶中,另取60ml提取溶剂 洗涤离心管和刀头,并将溶剂转移至三角瓶中 将三角瓶瓶塞盖上,室温下超声提取30min,取出,静 置,使分层 将上清液转人250mL容量瓶中 三角瓶中再加人70%甲醉溶液100ml,超声30min,对 样品进行二次提取,提取液合并至250mL容量瓶,用70%甲醇溶液定容,摇匀,得到芒果叶样品提 取液 吸取样品提取液1.0mL,放人100mL容量瓶中,用70%甲醉溶液定容,摇匀 取适量体积样品溶 液,0,22m滤膜过滤,滤液待上机分析
GB/T40832一2021 8.2测定 8.2.1高效液相色谱参考条件 高效液相色谱参考条件如下 色谱柱.c18反向柱,250mm×4.6mm,5m,或相当者 a b 流动相:乙睛;甲酸水溶液(0.1%)=1585(体积比); 流速:1.0mL c /min; d 检测波长:258nms 进样体积;10L e 柱温;25C f 8.2.2标准曲线绘制 分别取适量的芒果苷系列标准工作溶液(0.1g/mL2.0g/mL),按照8.2.1列出的条件进行液 相色谱分析测定 以标准溶液质量浓度为横坐标,对应的峰面积为纵坐标,建立标准工作曲线 芒果苷 标准溶液色谱图参见附录A中的图A.1 8.2.3测定 将试样辩液按照8.2.1列出的条件进行液相色谱分析测定,根据标准样品的保留时间定性 试样 溶液中芒果苷的响应值应在标准曲线线性范围内,超过线性范围则应稀释后再进行分析,外标法定量 结果计算 g.1结果计算 试样中目标物的含量按式(1)计算 X= ×V×" m000 式中: -试样中芒果苷的质量分数,单位为毫克每克(mg/g); 样品溶液中芒果苷的质量浓度,单位为微克每毫升(4g/mL) 样品溶液定容体积,单位为毫升(mL); 稀释倍数; 试样质量,单位为克(g); m 1000 换算系数 9.2结果表示 测定结果以平行测定的算术平均值表示.保留四位有效数字 10重复性 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%
GB/T40832?2021 ? A ?????? ???????A.1 10.000 9.000 8.000 7.000 6.000 5.000 4.000 3.000 2.000 1.000 0.000 -l.000 -2.000 O.000.501.001.502.002.503.003.504.004.505.005.506.006.507.007.508.008.509.009.5010.00 /min ?A.11g/m??????

芒果叶中芒果苷的测定高效液相色谱法GB/T40832-2021

芒果是一种被广泛种植和消费的水果，其叶片富含多种活性成分，其中芒果苷是一种重要的生物活性成分。芒果苷具有多种药理活性，如抗氧化、抗癌、降血压等作用。因此，研究芒果叶中芒果苷的含量，对于深入了解芒果叶的生物学特性和开发潜力具有重要意义。

GB/T40832-2021标准规定了一种用于测定芒果叶中芒果苷含量的高效液相色谱法。该方法采用甲醇提取样品中的芒果苷，以C18反相色谱柱进行分离，并通过紫外检测器进行检测和定量。

该方法具有快速、准确、灵敏度高等优点，能够同时测定样品中芒果苷的多种同分异构体，对于芒果苷的测定具有很好的选择性和灵敏度。同时，该方法还具有简单、操作便捷、适用范围广等优点，可用于芒果叶中芒果苷含量的测定。

总之，本文介绍了一种基于GB/T40832-2021标准的高效液相色谱法，可用于快速、准确地测定芒果叶中芒果苷的含量。这一方法为深入研究芒果叶的生物学特性和开发芒果叶相关产品提供了有力支持。

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