保健食品中绿原酸的测定

保健食品中绿原酸的测定

国家标准 GB/T22250一2008 保健食品中绿原酸的测定 Determinationofchlorgenicacidinhealthfoods 2008-07-31发布 2008-11-01实施 卫生部 发布 家标准化管理委员会国家标准
GB/T22250一2008 前 言 本标准由卫生部提出并归口 本标准负责起草单位:疾病预防控制中心营养与食品安全所 本标准参加起草单位;河北省疾病预防控制中心、吉林省疾病预防控制中心 本标准主要起草人:杨大进、方从容、王竹天、韩会新、李青 本标准为首次发布
GB/T22250一2008 保健食品中绿原酸的测定 范围 本标准规定了保健食品中绿原酸的测定方法 本标准适用于以金银花、菊花、杜仲、山楂等一种或几种为主要原料的保健食品中绿原酸的测定 当取样量为2.0g时,定容体积为25ml.时,方法的检出限(LOD)为1.4×10g/kg,方法的定量 限(LoQ)为4.0X10'g/kg 方法的线性范围为2.0"g/ml一8O0"k/ml 原理 根据绿原酸易溶于甲醇乙醇等极性有机溶剂的理化特性，一般试样中的绿原酸用70%甲醇提取 如果试样为油性软胶囊,可用石油髅脱脂挥干后再用70%甲醇提取 提取液定容,过滤后进高效液相 色谱仪,经反相色谱分离后,由紫外检测器检测,根据保留时间和峰面积进行定性和定量 试剂和材料 3.1乙酸(CH,COOH):优级纯 3.2乙睛(CH,N)色谱纯 3.3甲醇(CH,oH);色谱纯 3.4石油酰;分析纯,沸程30C一60c 3.5水(H.o);为实验室一级用水,电导率(25C)为0.01ms/m. 3.6绿原酸标准品;纯度>99%. 3.7绿原酸标准储备液(2.00mg/mL)称取绿原酸标准品0.02g(精确至0.0001g)于10.0mL容量 瓶中,加流动相溶解并定容至刻度,混匀此标准储备液在4C冰箱中,可保存5d. 3.8绿原酸标准使用液(2004g/mL):准确量取1.00ml绿原酸标准储备液于10.0ml容量瓶中,用 流动相稀释至刻度.,混剑此标准使用液在4C冰箱中,可保存5 仪器和设备 高效液相色谱仪.附紫外检测器 4.1 4.2超声波清洗器 4.3离心机:4000r/min 分析步骤 5.1试样处理 5. .1.1一般试样:称取0.5其一2g粉碎均匀的试样(精确到0.001g)于25.0m容量瓶中,加人20mL 70%甲醇,超声波提取30min,用70%甲醉定容至刻度,混匀(如试样中绿原酸含量较高,可适当进行稀 释),过0.45m滤膜,滤液供液相色谱分析 油性试样,称取0.5只一2g均匀的试样(精确到0.001g)于25nml 离心试管中,加人15ml石 55 .1. 2 油髅,振摇1min后,以3000r/min离心10min,弃去溶剂后再重复一次 将试样中溶剂挥干后加人 70%甲醇,其余步骤同5.1.1 5.1.3液体试样;以3000r/min离心10min后如试样中绿原酸含量较高,可适当进行稀释),过 0.45 5m滤膜,滤液供液相色谱分析
GB/T22250一2008 5.2标准曲线的制备 分别吸取绿原酸标准使用液(3.8),用流动相稀释并在容量瓶中定容的浓度分别为2.00、10.0、 20.0,40.0,80.04g/ml标准系列 5.3液相色谱参考条件 5.3.1色谱柱:ODsC色谱柱,2501 mm×4.6mm,54m 5.3.2流动相:0.5%乙酸溶液十乙睛=9+1 5.3.3流速:1.0mL/mim. 5.3.4柱温:35C 5 .3.5检测波长;327 nm 5.3.6进样量10AL 5.3.7色谱分析:取标准溶液和试样溶液注人色谱柱中,以保留时间定性,以试样峰面积或峰高与标准 比较定量 结果计算 试样中绿原酸的含量按式(1)进行计算 c×V×1000 X= m又o00又1000 式中: 试样中的含量,单位为克每千克或克每升(g/kg或g/L) 由标准曲线求得进样液中绿原酸的浓度,单位为微克每毫升4g/mL); 试样定容体积,单位为毫升(mL): -试样质量或体积,单位为克或毫升(g或mL) n 计算结果保留三位有效数字 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10% 色谱图 在上述色谱条件下的色谱图见图1一图2 0.080 绿原酸 吸 0.07o 光 0.060 度 0.050 0.040 0.030 0.020 0.010 0.000 0.501.00 1.502.002.503.003.504.00 4.505.005.506.006.507.007.508.00 1/min 图1绿原酸标准色谱图
GB/T22250?2008 0.16 ? ? 0.14 0.12 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0.00 10.o012.0014.0016.o018.0020.o022.0024.0026.0028.0030.o0 2.00 6.00 8.00 1/min ?2???