小麦粉中溴酸盐的测定离子色谱法

小麦粉中溴酸盐的测定离子色谱法

国家标准 GB/T20188一2006 小麦粉中溴酸盐的测定离子色谱法 Determinationofbromateinwheatflour Ionchromatographymethod 2006-06-01实施 2006-05-10发布 国家质量监督检验检疫总局 发布 中 国国家标准化管委员会国家标准
GB/T20188一2006 小麦粉中澳酸盐的测定离子色谱法 范围 本标准规定了采用离子色谱测定小麦粉和小麦粉品质改良剂中澳酸盐的原理、试剂和材料、仪器、 样品制备、离子色谐测定、计算及精密度 本标准适用于小麦粉和小麦粉品质改良剂中澳酸盐的测定 本标准检出限为0.5mg/kg(以BrO计. 原理 用纯水提取样品中溴酸根离子(BrO),经Ag/H柱除去样品提取液中干扰氯离子(CI,超滤法 除去样品提取液中水溶性大分子,采用离子交换色谱-电导检测器测定,外标法定量 试剂和材料 3.1硫酸溶液c(HSO))=50g/L 3.2硝酸银溶液c(AgNO,))=50g/L 3.3氯化钠溶液c(NaCl)=0.5%(质量分数). 3.4强酸型阳离子交换树脂(H型);732"强酸型阳离子交换树脂(总交换容量>4.5mmol/g)用水浸 泡,用5倍体积去离子水洗涤3次,用1倍体积甲醉洗涤、再用5倍10倍体积高纯水分数次洗涤,至 清洗水无色澄清后,尽量倾出清洗水,加人2倍体积的硫酸溶液(3.1),用玻璃棒搅拌1h,使树脂转为 H型,先用去离子水洗至接近中性,然后用高纯水洗,至清洗水的pH值约为6,将树脂转人广口瓶中覆 盖高纯水备用 注:可采用商品化的H型阳离子交换树脂柱OnGuardlH柱(1.0ce),或同等性能的其他柱子 3.5强酸型阳离子交换树脂(Ag型)取一定量处理好的H型阳离子交换树脂(3.4),加人2倍体积的 硝酸银溶液(3.2),用玻璃棒搅拌1h，使树脂转成Ag型,先用5倍体积去离子水分数次洗涤,然后用 5倍10倍体积的高纯水分数次洗涤树脂,用0.5%氯化钠溶液检验清洗水,直至不出现白色浑浊为 止,将树脂转人广口瓶中覆盖高纯水备用 注:可采用商品化的Ag型阳离子交换树脂柱OnGuardIAg柱(1.0ce),或同等性能的其他柱子 3.6层析柱:0.8cm(内径)×10cm(高层析管 3.7BrO标准储备溶液(1000ug/mL):准确称取KBrO基准试剂相对分子质量167.00,含量 >99.9%)a.1310g,用高纯水溶解并定窄至100 0m,配成含BrO10004g/mL标准储备液,置于棕 色瓶中4C下保存,可稳定2个月 3.8BrO标准稀释液(1004g/mL)吸取BrO标准储备液10.0ml,用高纯水定容至100mL BrO浓度为1004g/ml 3.9BrO标准工作曲线溶液;分别取BrO标准稀释液(3.8)0ml,0.5ml、1.0ml、1.5m 2.0ml2.5ml,3.0ml,用高纯水定容至50mL,该标准工作曲线浓度为:0g/mL、1.04g/mL 若采用200L大体积进样时,标准工 2.Og/mL3.Og/ml、4.04g/ml,5.0"g/ml,6.04g/ml 作曲线溶液需进行适当稀释
GB/T20188一2006 3.10相关阴离子标准储备溶液;配制与小麦粉基底相关的阴离子储备液(见表1) 注，可选项,该储备溶液供配制阴离子标准混合工作溶液时使用 表1相关离子标准储备液的配制 序号 KNo NaNo NaSo NaF KB NaCI 名称 称量/ 0.221 0163 l0.149 0.165 0.150 0.148 定容体积/ml 100 阴离子浓度/g/ml) 1000 1o 序号 甲酸钠 乙酸钠 磷酸氢二钠 草酸 柠檬酸 名称 HCOXONa2HOCHCOXONn NaeHPO12H(OCHO2HO CHOH 称量/g 0.231 0,139 0.373 0.143 lo.111 定容体积/ml. 100 阴离子浓度/ug/mL. 1000 3.11相关阴离子标准混合工作溶液;配制与小麦粉基底相关的阴离子标准混合工作溶液(见表2) 注;可选项,该标准溶液供调整柱分离条件和观察柱清洗条件时使用 表2相关离子标准混合工作液的浓度 序号 10 1 12 柠檬 离子种类 F CI sO BrO NO NO Br |HPO乙酸根甲酸根草酸根 酸根 吸取储备液 0.6 2.0 2.5 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 1.0 2.0 3.0 ml 定容/n /ml 100 阴离子浓度 20 25 20 20 20 20 20 20 10 20 30 4g/ml 3.12石油酥:分析纯,沸程(3060)C 除另有说明外,所用试剂为分析纯,所用高纯水质量为18.2Mn cm 仪器 离子色谱仪;配电导检测器 4.2超声波清洗器 4.3振荡器 4.4离心机:4000r/min(50mL离心管);10000r/min(1.5mL离心管.
GB/T20188一2006 4.50.2Am水性样品过滤器 超滤器截留相对分子质量10000(Mwco10.0o0),样品杯容量0.5mL,进样量为200L时使 4.6 用容量为4mL样品杯 注，可采用nmilliporemieroconYM-10型、AmiconUltra-4型及同等性能的超滤器 4.7分析天平:感量0.1 mg 4.8移液器;0.1ml1ml 样品制备 5.1提取 5.1.1小麦粉 准确称取10g(精确至0.1g)小麦粉于250mL具塞三角瓶中,加人100.0mL高纯水,迅速摇匀后 置振荡器上振荡20min(或在间歇搅拌下于超声波中提取20min),静置，转移20mL上层液于50ml 离心管中,3000r/min离心20nmin,上清液备用 5.1.2含油脂较多的试样 准确称取10(精确至0.1g)于100mL烧杯中加人30mLX3次石油醒(3.12)洗去油脂,倾去石 油雕,样品经室温干燥后按5.1.1中“加人100.0ml高纯水,上清液备用”操作 包子粉、面包粉等小麦粉品质改良剂 根据BrO含量的不同准确称取(0.21)g(精确至0.001g),用高纯水溶解并定容至50.0mL,经 0.2m的水性样品滤膜过滤后直接进行色谱测定 5.2净化 Ag/H柱去除样品提取液中的c将日型树脂(a.4小)慢慢倒人关闭了出水口的层析柱(G.b7 5.2.1 中,用玻璃棒搅动树脂赶出气泡,并使树脂均匀地自然沉降,装人2mL树脂后(约3cm高),再慢慢装 人2mLAg型树脂(3.5),不要冲击已沉降的H型树脂,尽量保持两层树脂界面清晰,待Ag型树脂完 全沉降后,打开出水口,控制流速为2mL/min,加10mL高纯水冲洗,待柱中的水自然流尽后,立即将 5.1.1中准备好的样品溶液沿柱内壁加人,不要冲击树脂表面,弃去前5mL流出液,收集其后2mL流 出液进行下一步净化 若使用商品化的(OnGuardIAg/H)脱C柱时,按产品说明书操作 对含 量在1gke以下的小麦粉,也可省略此条操作" C 5.2.2超滤法去除样品提取液中的水溶性大分子将5.2.1中收集液经0.2Am的水性样品滤膜过滤 后注人4.6中超滤器样品杯中,于10000r/nmin下离心30nmin进行超滤,超滤液直接进行色谱分析 按5.15.2规定的条件进行空白小麦粉实验 离子色谱测定 6.1梯度色谱条件 色谱柱;DIONExIonPacAs194mm×250mm带IonPacAG194mm×50mm" 保 护柱 6.1.2流动相,DoExG50自动淋洗液发生器,OH型 抑制器;DONExAsRs4mm阴离子抑制器;外加水抑制模式,抑制电流100mA 1.4检测器;电导检测器,检测池温度:30C 6. .1儿.5进样址;-根招样液中B含量选择进样2Dl-200,L.
GB/T20188一2006 6.1.6淋洗液OH浓度;见表3 表3淋洗液OHH浓度表 时间/min 流速/tmL/min OH浓度/mmol/L) 梯度曲线/curve) 15 30 25 30 40 42 40 46 48 注1:可采用其他型号同等性能的OH型阴离子交换分析柱,(OH淋洗液也可手工配制使用高纯的质量浓度为 50%的浓氢氧化钠溶液,配制成含OH为100mmolL的淋洗液),按表3梯度略作调整，使3.11阴离子标 准混合工作溶液分离中BrO和c的分离度在3以上 注2:方法中所列仪器及配置仅供参考,同等性能仪器及配置均可使用 6.2等度色谱条件 n×250mm(带shodexcsI90G4mmmx50mm 6.2. 色谱柱:shodexICSI-524E4" 保护柱 mm 6.2.2流动相3.6mmol/1Na,CO.,流速;0.7mL/min. 抑制器;自动再生抑制器(具有去除cO功能 6.2.4检测器;电导检测器,检测池温度;室温 6.2.5进样量;根据样液中BrO含量选择进样20Al200l 注1:可采用其他型号同等性能的cO型阴离子交换分析柱,使3.11阴离子标准混合工作溶液分离中BrO 和 C的分离度在1.5以上 注2:方法中所列仪器及配置仅供参考,同等性能仪器及配置均可使用 6.3测定 使用3.11中与小麦粉本底相关的阴离子标准混合工作溶液调整柱分离条件并观察柱清洗情况,保 证BrO和CI的分离度达到要求,注人空白小麦粉提取液,确认在BrO出峰处没有小麦粉本底干扰 峰时,才可进行校准曲线和样品的测定,使用外标法定量 标准混合工作溶液和小麦粉样品的分离色谱 图参见附录A 计算 7.1按公式(1)计算样品中BrO的含量(e). c=Y×V/mn 式中 -试样中BrO的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); 由标准曲线得到样品溶液中BrO的含量,单位为毫克每毫升(ug/mL); -样品溶液定容体积,单位为毫升(mL);
GB/T20188一2006 -样品质量,单位为克(g) m 计算结果保留2位有效数字 若结果以KBrO计时,乘以系数1.31 7.2计算结果小于本标准检出限0.5mg/kg(以BrO计)时,视为未检出 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%
GB/T20188一2006 附 录 资料性附录 小麦粉中溴酸盐测定的相关色谱图 12.0 e 10.0- 8.0 6.0 4.0 5 5 2.0 m -1.0 .o0 5.0 10.0 20.0 5.0 30.0 35.0 40.0 45.o 50.0 0.0 图A.112种阴离子和有机酸在DoNExIonPaeAs19柱上的梯度分离 56.2 Ss8 50.0 40.0 白 30.0 m.00经的 L3.0 20.0 10.0 im 0.0 45.o 0.0 15.0 20.0 25.0 35.0 0.0 50.0 图A.2空白小麦粉在DIoNEXIonPae As19柱上的梯度分离
GB/T20188一2006 60.2 SS 55.05 50.0 45,0 40.0 35.0 30.0 ， a ooXM0 25.0 20.0 15.0 5 昏兴 三 鲁跟 10.0 g 愁 也 N 田 5.0 s 小M 丽 -l.3" 5n 20.o 30.0 0.0 0." 25.0 35.0 5.0 5.0 10.0 图A.3含BrO20mg/kg的面包粉在DIoNExIonPaeAs19柱上的梯度分离 40.5 s4s 35.0" 30.0- 25.0 23o 1铺" 14010 4 20.0 15.0 10.0- 爸 登 5.0- 里 l.9- -0.2 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0 40.0 45.0 图A.4小麦粉加入BrO1mg/kg时在DOExIonPacAs19柱上的梯度分离
GB/T20188一2006 31 S 9 27 8 25 3 21 19 15 13 min 2% 2 44 46 48 10 12 161820224 28303234363840 图A.511种阴离子和有机酸在shodexIcsl-524E柱上的等度分离 31mVv V隔 29 s 27 o 25 2 烈 9 器 17 5 13 点 02 26283o3234363840 1618 27 46 图A.6空白小麦粉在shodexIcs1-524柱上的等度分离
GB/T20188一2006 31f 两 S 27 25 21 19 17 部 装路 5 三 gs S s 锡 ip 10 4446 48 12 202224262830323436384042 141618 图A.7含BrO20mg/kg的面包粉在shodexIcsl-524E柱上的等度分离 31网 雨 s 出 19 " 总 s 惊 3 5 贾 " 类 1618 20 28 32 363840 图A.8小麦粉加入Bro1mg/kg时在shdexcsH524E柱上的等度分离