保健食品中前花青素的测定

保健食品中前花青素的测定

国家标准 GB/T22244一2008 保健食品中前花青素的测定 Determinationofproeyanidinsinhealthfoods 2008-07-31发布 2008-11-01实施 中华人民基和国卫生部 发布 国家标准化睿理委员会国家标准
GB/T22244一2008 前 言 本标准由卫生部提出并归口 本标准负责起草单位:疾病预防控制中心营养与食品安全所 本标准参加起草单位;吉林省疾病预防控制中心 本标准主要起草人:杨大进、肖晶、方从容、王竹天,刘宏涛 本标准为首次发布
GB/T22244一2008 保健食品中前花青素的测定 范围 本标准规定了保健食品中前花青素的测定方法 本标准适用于以葡萄籽、葡萄皮、沙棘、玫瑰果、蓝浆果、法国松树皮提取物等为主要原料制造的保 健食品中前花青素的测定 本标准的检测限;方法的检出限(LOD)为1.5×10-'g/100g,方法的定量限(L0Q)为5.0× 10-'g/100g 方法的线性范围为l04g/mL1504g/mL 原理 前花青素易溶于水,是黄炕-3-苯儿茶酚和表儿茶精连接而成的 依据试样中前花青素单体或聚合 物在加热的酸性条件和铁盐催化作用下,CC键断裂而生成深红色花青素离子即定的原理,使用高 效液相色谱,经C反相柱分离,在波长525nm处检测,根据保留时间定性,外标法定量,测定试样中前 花青素含量 试剂和材料 3.1甲醇(CH.OH):分析纯 3.2甲醇(CH.oH);色谱纯 3.3正丁醉[CH(CH).CH.OH];分析纯 3.4盐酸(HCl);分析纯 3.5二氯甲婉(CH.CLl);分析纯 . 异内醒cH),cHon.分新纯 3.7甲胶(HcooH);分析纯 3.8破股铁钱[NH,.F(sSO,.”12Ho;分析纯 3.9水(H.o);为实验室一级用水,电导率(25C)为0.01nms/m 33. 102%硫酸铁铵[NH,Fe(sO.;12H.,O]溶液;称取硫酸铁铵2g,用浓度为2mol/几盐酸溶解,定 容至100mL 3.11前花青素标准品:纯度>98% 3.12前花青素标准溶液(1.00nmg/mL);称取0.01只前花青素标准品(精确至0.0001g),用甲 醇(3.2)溶解并定容至10ml棕色容量瓶中,此溶液现用现配 仪器和设备 4.1高效液相色谱仪;配有紫外检测器 4 超声波清洗器 4.3离心机:40001 r/mina 分析步骤 5 试样处理 5.1.1 片剂;取20片试样,研磨成粉状 5.1.2胶囊:取20粒胶囊内容物,混匀.
GB/T22244一2008 1.3软胶囊;挤出20粒胶囊内容物,搅拌均匀,如内容物含油,应将内容物尽可能挤完全 5. 5.1.4口服液:摇匀后取样 5.2提取 5.2.1固体粉状试样根据试样含量称取50mg 500mg(精确至0.001g)试样于50ml棕色容量瓶 中,加人30ml 甲醉3 1)，超声处理20min,放冷至室温后，加甲醉(3.1至刻度，摇匀，离 /min,10mi 心(3000r n)或放置至澄清后取上清液备用 5.2.2含油试样;根据试样含量称取50mg~500mg(精确至0.001g)试样置于小烧杯中,用5ml 氧甲炕使试样溶解,并倒人50mL容量瓶中,再用甲醇(3.1)多次洗烧杯,并倒人50mL棕色容量瓶中 用甲醇(3.1)定容至刻度,摇匀 5.2.3口服液;根据试样含量准确吸取1ml5ml样液,置于50ml容量瓶中,加甲醉(3.1)至刻 度,摇匀 5.3水解反应 将正丁醇与盐酸按95:5的体积比混合后,取出15mlL置于具塞锥瓶中,再加人0.5mL硫酸铁铵 溶液和2ml试样溶液,混匀,置沸水浴回流.精确加热40min后.立即置冰水中冷却,经0.45m滤膜 过滤,待进高效液相色谱分析 5 标准曲线制备 吸取标准溶液(3.12)0.10,0.25,0.50,1.0,1.5mL置于10m棕色容量瓶中,加甲醉(3.1)至刻 度,摇匀 各取2ml测定,处理方法同5.3,以峰高或峰面积对浓度作标准曲线 5.5液相色谱参考条件 5.5.1色谱挂;耐低pH型的onsc;柱,4.5mmX150mm.5 儿m 5.5.2柱温:35 5.5.3检测器;紫外检测器 5 5.4检测波长;525nm 5.5.5流动相:水十甲醇(3.2)十异丙醇十甲酸=73十13十6十8 5.5.6进样量;l0l 5.5.7流速1.0mL/min. 5.5.8色谱分析:取标准溶液及试样溶液注人色谱仪中,以保留时间定性.以试样峰高或峰面积与标准 比较定量 5.6注意事项 实验过程中应避免阳光直射 结果计算 试样中前花青素的含量按式(1)进行计算 XxV X X n 式中: -试样中前花青素的含量,单位为克每千克或克每升(g/kg或g/L) 从标准曲线上得到的含量,单位为毫克每毫升(mr /ml); R 试样定容体积,单位为毫升(ml) 稀释倍数 试样的质量(或体积),单位为克或毫升(g或mL. 计算结果保留三位有效数字
GB/T22244一2008 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10% 色谱图 在上述色谱条件下的色谱图见图1一图2 吸a.10o 在 0.090 佩定 0.080 0.070 a.060 0.050 0.040 a.030 0.020 0.o10 0.000 I/min 图1前花青素标准色谱图 吸0.100 光 0.090 佩定 度 0.080 0.070 0.060 0.050 0.040 0.030 0.020 0.010 0.00o 12 l0 l/min 图2前花青素试样色谱图