国家标准 GB/T28074一2011 苹果蠢蛾检疫鉴定方法 DeteetionandidentifieationofCydipomonella(L. 2011-12-30发布 2012-06-01实施国家质量监督检监检疫总局发布国家标准花管理委员会国家标准
GB/T28074一2011 前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口本标淮起草单位;检验检疫科学研究院、新疆出人境检验检疫局、中华人民共和国广东出人境检验检疫局、吉林出人境检验检疫局、山西出人境检验检疫局、北京出人境检验检疫局本标准主要起草人陈乃中,张祥林,梁帆、,曹逸霞、魏春艳,李惠萍,李建光、张伟、张俊华、马菲
GB/T28074一2011 苹果矗蛾检疫鉴定方法范围本标准明确了苹果蠢蛾Cydiaomonella(L.)的取样、饲养,成虫生殖器解剖和鉴定等方法本标准适用于进出境植物检疫、国内植物检疫和大田防治工作中的苹果蠢蛾的取样饲养和鉴定苹果蠢蛾基本信息学名CydiapomonellaL.. 异名Laspeyresiaomonella 俗名codlingmoth 属鳞翅目L.eprdoptera卷蛾科Tortricidae,新小卷蛾亚科olethreutnae,小食心虫族Grapholitini. 小卷蛾属cydia 幼虫随果实传带是主要传播途径,老熟幼虫或蛹也可能随包装材料传带相关种类有苹果异形小卷蛾CrsyoMohia" lerela(Meyriek)、樱小卷蛾Cyudiauckard (Zeler)、苹小食心虫CydiainobinataHeinrich,李小食心虫Cydia/unebrana(Treitschke)和梨小食心虫Cyvdiamolesta(Busek)等苹果壹蛾的其他信息参见附录A 方法原理根据苹果矗蛾的危害状,在检疫现场或发生苹果蛾的果园肉眼观察寄主果实,取得幼虫或蛹虫样,饲养蛹获得成虫,解剖制作外生殖器标本,用显微镜观察,根据形态特征对种类进行判定如果有可资鉴定的老熟幼虫,可根据老熟幼虫鉴定;如果仅发现蛹,则将蛹饲养出成虫再做鉴定;如果成虫前翅鳞片不够完整不能准确判断,则进行外生殖器解剖再做鉴定器材与试剂 70%酒精、体视显微镜、手持放大镜、昆虫针、解剖刀、解剖针、载玻片、盖玻片,塑料盒(管,细沙,小毛笔、玻璃纸、展翅板、10%氢氧化钠、酒精、二甲苯,加拿大胶、乙哒、氮化钾毒瓶、控温控湿培养箱 5 检测与饲养 5.1果实表面检查肉眼观察或用手持放大镜观察寄主果实表皮有无细小突起伤疤,虫孔,虫粪或流胶 5.2剖果检查将疑似被害果实,用解剖刀将果实剖开,检查果实内是否有幼虫(见附录B) 如发现疑似幼虫,用 70%酒精浸泡,带回实验室
GB/r28074一2011 5 包装材料检查在检疫现场,检查包装材料上有无老熟幼虫或蛹如发现疑似幼虫,用70%酒精浸泡,如发现蛹可用指形管盛装,带回实验室蛹的培养 5 将蛹置于有透气孔的塑料盒(管)内的湿细沙表层中,将塑料盒(管)置于养虫箱内,以25 C 30,相对湿度为65%的条件饲养至成虫羽化在容器内投人滴有乙酥的棉球将蛾晕倒,将蛾取出置于氮化钾毒瓶内,使之真正死亡然后针插,使用小毛笔和玻璃纸展翅制成针插标本,供鉴定标本的制作准备 6.1成虫针插标本针插成虫标本,供鉴定成虫外生殖器玻片标本将成虫腹部取下,浸泡在10%氢氧化钠水溶液中,煮沸5min,取出解剖,去掉与外生殖器无关的体壁、肌肉、内脏等,再放到75%,85%,95%和100%酒精中各10min,最后置于二甲苯中透明,整形,再放到载片上,滴加拿大胶,盖片风干,加贴标签实验室鉴定用体视显微镜观察将幼虫标本,用手持放大镜或体视显微镜观察成虫标本,或用显微镜观察成虫外生殖器玻片标本,判断是否符合以下形态特征(见附录B、附录C和附录D) 7.1成虫 7.1.1概貌 20 体长8mm,翅展19mm~ mm,体灰褐色而带紫色光泽雄蛾色深、雌蛾色浅 7.1.2头部复眼深棕褐色头部具有发达的灰白色鳞片丛;下唇须向上弯曲,第2节最长,末节着生于第2节末端的下方翅 7.1.3 前翅翅基部淡褐色;外缘突出略呈三角形,在此区内杂有较深的斜行波状纹;翅的中部颜色最浅,也杂有波状纹臀角处的肛上纹呈深褐色,椭圆形,有3条青铜色条斑,其间显出4条一5条褐色横纹,这是本种外形上的显著特征雄蛾前翅腹面中室后缘有一黑褐色条斑,雌蛾无后翅深褐色,基部较淡 7.1.4外生殖器 7.1.4.1 雄抱器瓣在中间有明显颈部;抱器腹在中部有明显凹陷,其外侧有一指状尖突;抱器端圆形,具有许多长毛;阳茎短粗,基部稍弯;阳茎针6枚8枚,分两行排列
GB/T28074一2011 7.1.4.2雌产卵瓣内侧平直,外侧弧形;交配孔宽扁;后阴片圆大;囊导管短粗,在近口处强烈几丁质化,扩大呈半圆;囊突两枚,牛角状 7.2卵椭圆形,扁平,中央略隆起;初产时半透明,后期卵上可见一圈红色斑纹,卵壳上有很细的皱纹 7.3幼虫老熟幼虫体长14mm一18mm 幼龄幼虫谈黄白色,渐长呈谈红色头部黄褐色,两侧有较规则的褐色斑纹前胸气门前毛片上有3根毛(L毛胸足蹭爪背侧刚毛短于蹭爪腹部第8节与9节每侧sV毛数量通常为2:1,第9节L毛3根,第3根通常着生在单独的毛片上腹足趾钩单序(几乎同长度)环状,外侧通常有缺口肛上板较前胸背板浅,上面有淡褐色斑点,无臀榄(肛上板腹面梳齿状骨化刺苹果蠢蛾及其重要近缘种幼虫的鉴别见附录D. 蛹 7.4 长7mm~10mm,黄褐色通常雌大于雄雌腹3节可活动,而雄4节可动第2一7腹节背面各有两排整齐的刺,前排粗大,后排细小,第810腹节背面则各有1排刺腹末有臀榄结果判定以老熟幼虫或成虫形态特征为依据,符合上述7.1.3或7.1.4.1或7.1.4.2或7.3者可判定为苹果蠢蛾样本保存鉴定后的标本要永久保存,并加注明时间、地点,寄主、,采集人等信息的标签幼虫可保存在70% 的酒精中
GB/r28074一2011 附录A 资料性附录苹果蠢蛾其他信息 A.1主要寄主苹果、榻棒、杏、李、桃、梨等 A.2生物学雌蛾多产卵在果树上层的果实和叶片上幼虫孵出后,从果尊、果嗣、果蒂等部位蛙人果内,取食果肉和种子幼虫共5龄幼虫老熟后,往往近直线钻出脱果,在树干皮下,裂缝处或地上隐蔽物内或土中结茧化蛹以末代老熟幼虫在树干皮下,裂缝处等处越冬,翌年春季化蛹、羽化被害寄主果实可见细小突起伤疤或虫孔,有时虫孔处还可见虫粪或流胶 A.3地理分布目前已广泛分布于全球各大洲寒温带地区,仅我国北方大部分省区还没有发现,具体分布地区欧洲;阿尔巴尼亚,奥地利、白俄罗斯、比利时、保加利亚、塞浦路斯,捷克、斯洛伐克、丹麦、爱沙尼亚、芬兰,法国(包括科西嘉岛,德国希腊,匈牙利爱尔兰、,意大利包括撒丁岛、西西里岛,拉脱维亚、立陶宛、马耳他、摩尔多瓦,荷兰,挪威,波兰,葡苟牙(包括亚逊尔群岛、马德拉群岛,罗马尼亚,俄罗斯联邦(俄罗斯欧洲部分、俄罗斯远东,西伯利亚,塞黑、斯洛伐克、西班牙(包括加那利群岛),瑞典,瑞士、乌克兰,英国(英格兰和威尔士、北爱尔兰、苏格兰). 亚洲!阿富开,亚美尼里.,阿塞拜雕、乔治亚共和国,印度(喜马偕尔邦、克什米尔.北方邦>,伊圆.伊 ,吉尔青斯斯里、黎巴版.巴基斯坦,叙利亚.塔吉克斯组、士耳其、土库登拉克、以色列、约旦、哈萨克斯坦、斯坦,乌兹别克斯坦等地新疆,甘肃等局部地区也已有发生非洲:阿尔及利亚、埃及、利比亚 ,毛里求斯,摩洛诉.,南非,突尼斯北美洲;美国(加利福尼亚、伊利诺斯、印第安那、爱荷华、马萨诸塞、密歇根、密苏里、纽约、北卡罗菜那,俄亥俄、俄勒冈,宾夕法尼亚、犹他、维吉尼亚、华盛顿,西维吉尼亚、,威斯康星),加拿大(大不列颠哥伦比亚、新不伦瑞克、新斯科舍,安大略,爱德华王子岛、魁北克)、墨西哥南美洲;阿根廷、玻利维亚、巴西(巴拉那、南里奥格兰德、圣卡塔琳娜)、智利、哥伦比亚、秘鲁、乌拉丰大洋洲;澳大利亚(新南威尔士、昆士兰,南澳、塔斯马尼亚、维多利亚、,西澳).新西兰
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GB/T28074一2011 附录规范性附录苹果蠹蛾及重要近缘种幼虫鉴别检索表无臀栉;刚毛基部有毛片;头部黄褐色,两侧有较规则的褐色斑纹;胸足跚爪背侧刚毛短于蹋爪;腹部第8节与9节每侧sV毛数量通常为2:1;第9节1毛3根,第3根通常着生在单独的毛片上;腹足趾钩单序环状,外侧有缺口;肛上板较前胸背板浅，上面有淡褐色斑点苹果矗蛾CydiaomonellaL 有臀栉;腹第9节每侧1根D毛和1根SD毛在同一毛片上,SV毛通常每侧1根;肛上板外侧成对刚毛明显长于内侧成对刚毛腹足趾钩为单序或双序;前胸气门前毛片不向后延伸到气门下腹足趾钩为三序;前胸气门前毛片向后延伸到气门下;头顶中央锐角状下凹苹果异形小卷蛾Crytophlebialeucotreta(Meyrick 第9节背中央毛片(D毛片)与两侧毛片(D毛和sD毛共有毛片)相连或靠近第9节背中央毛片与两侧毛片有一定距离,不靠近腹部刚毛毛片颜色与体表颜色接近;胸足驸爪与背侧刚毛均粗短;腹节背面肌肉附着点亮斑不明显腹足趾钩为单序环苹小食心虫CyvdiainobinataHeinrieh 腹部刚毛毛片颜色明显深于体表颜色;胸足驸爪与背侧刚毛比较细长;腹节背面肌肉附着点亮斑明显樱小卷蛾Cyvdiabackardi(Zeller) 腹足趾钩为单序环;腹节背面肌肉附着点亮斑通常2对梨小食心虫Cyxudiamolesta(Busck) 腹足趾钩为双序环;腹节背面肌肉附着点亮斑通常1对李小食心虫CydiaJwnebraaTreitschke)

苹果蠹蛾检疫鉴定方法GB/T28074-2011

苹果蠹蛾是苹果、梨等水果作物的严重害虫之一，严重威胁着我国水果生产和供应。为保障水果生产和贸易安全，建立苹果蠹蛾的检疫鉴定方法变得非常必要。

什么是苹果蠹蛾？

苹果蠹蛾是一种小型昆虫，属于鳞翅目天蛾科。其幼虫主要在苹果、梨和杏等水果中寄生并进行食害活动，对果实造成严重损害。同时，苹果蠹蛾还可以通过果实、包装材料、贮藏设施等多种途径进行传播和蔓延。

GB/T28074-2011检疫鉴定方法

GB/T28074-2011《苹果蠹蛾检疫鉴定方法》是由中国国家标准化管理委员会于2011年发布的国家标准，主要适用于进出口水果、种子和幼苗等进行检测，以确保其不含苹果蠹蛾。

该标准规定了苹果蠹蛾检测的样品制备、检测方法、结果判断等方面的要求。其中，样品制备包括对检测物的采集、处理和提取DNA等步骤；检测方法包括PCR法和实时荧光PCR法两种，其中实时荧光PCR法具有灵敏度高、特异性好、快速准确等优点。

总结

苹果蠹蛾是危害我国水果生产和供应的严重害虫之一，GB/T28074-2011标准提供了一种可靠的检测方法，可以对进出口的水果、种子和幼苗等进行检测。建立健全的苹果蠹蛾检疫鉴定方法有助于保障我国水果产业的稳定发展。