条斑紫菜

条斑紫菜

国家标准 GB21046一2007 条斑 菜 紫 Porphyraye.oensis 自2017年3月23日起，本标准转为推荐性 标准，编号改为GBT21046-2007 2007-06-26发布 2007-10-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管蹬委员会国家标准
根据国家标准公告(2017年第7 号》和强制性标准整合精简结论，本标准自2017 GB21046一2007 年3月23日起，转为推荐性标准，不再强制执行 言 前 本标准第2,3、45,6、7章为强制性,其余为推荐性 本标准附录A、附录B为规范性附录 本标准由农业部提出 本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口 本标准起草单位:江苏省海祥水产研究所 本标准主要起草人:许璞,朱建一,陆勤勤、王汉清,袁昭岚
GB21046一2007 条 紫 菜 斑 范围 本标准规定了条斑紫菜(Porhyrayeoensis)的主要生物学特征,细胞遗传学特征及检验方法 本标准适用于条斑紫菜种质的检测与鉴定分析 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 2.1 叶状体thallus 叶状体属配子体,由壳弛子,单抱子萌发形成 为栽培和收获的对象 2.2 丝状体eonchocelis 丝状体属抱子体,由果弛子萌发形成 在栽培过程中属种苗阶段 2. 3 果袍子earpospore 由叶状体营养细胞转化形成果胞与精子囊器,成熟后两性细胞接合形成合子,合子经分裂成为果 袍子 壳抱子conchospore 丝状体营养藻丝发育形成弛子囊枝,弛子囊成熟分裂形成并放出壳袍子 2.5 单抱子 mon0spore 由叶状体营养细胞形成单袍子囊，一个袍子囊产生一个单袍子 单袍子为单倍核相,萌发生成叶状 体,为条斑紫菜无性生殖袍子 名称与分类 3.1学名 条斑紫菜Porphyruyesoensis 3.2分类位置 红毛菜目(Bangiales)、红毛菜科(Bangiaceae),紫菜属(Porhyra). 形态构造特征 4.1叶状体 薄膜状,藻体卵形或长卵形,基部脐形、圆形或心脏形(见图1) 边缘细胞排列整齐,外缘平滑无锯 齿 以基部细胞向下延伸的假根丝固着在生长基质上 藻体青紫色或黑紫红色 体高一般为12cm~ 30cm， 人工栽培可达1m以上 叶状藻体单层细胞,细胞内含一个星状色素体,位居中央 营养细胞 腔高25Am28Am,宽14m22m,人工栽培藻体细胞腔高14Am 26m,宽8Am13m.
GB21046一2007 图1条斑紫菜叶状体 4.2丝状体 丝状,不规则分枝 生长可分为3个阶段,即营养藻丝弛子粪枝《膨大藻丝)和壳袍子形成(见 图2).营养藻丝细丝状,藻丝细胞宽约2Am一4Am,长度范围约10Am一80Am;抱子囊枝细胞宽约 10Am15am,长约12xm一17m,接近成熟时长宽略等 丝状体能钻人贝壳或其他含碳酸钙的物体 中生长,或悬浮生长于海水中 藻丝青黑色,成熟阶段呈青褐色 藻丝细胞间具孔状联系,色素体为带 状或呈不规则状 营养藻丝 2、3- -营养藻丝上新长出抱子囊枝 抱子囊枝 5,6 成熟阶段的抱子囊枝,分裂形成壳抱子 图2条斑紫菜丝状体 S 繁殖特性 雌雄同株 雌雄生殖细胞混生,精子囊器形成区域多呈条纹状,为该种重要特征之一 具有性繁殖 和无性繁殖两种方式 有性繁殖 叶状体进人成熟期,叶体前端及边缘区域的营养细胞发育转化成果胞和精子囊母绷胞 精子囊母 细胞为堆性生殖绸胞-经多次分裂形成精子囊器内含精子囊128个较少64个,分裂式.合A,BC,或 含ABc. 果胞为雌性生殖细胞,果胞受精后分裂,成熟的果抱子囊内含果袍子16个,分裂式 早AB.C 果袍子逸出萌发成丝状体 丝状体经营养藻丝生长,发育成抱子囊枝,形成袍子囊,成熟分 裂后放散出壳抱子,萌发长成叶状体
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GB21046一2007 图5条斑紫菜丝状体苹果酸脱氢酶同工酶电泳酶谱 7.4 多态位点比例 对5个不同地理位置,不同年代的条斑紫菜丝状体,选用5种酶进行同工酶测定,条斑紫菜丝状体 种质多态位点比例为44.4%55.6% 检验方法 8.1藻体形态 8.1.1叶状体 外形与色泽按4.1规定,采用目视法和显微镜检测 8.1.2丝状体 按4.2规定,采用显微镜检测 8.2染色体检验 8.2.1方法 铁矶-苏木精染色方法 8.2.2染色液 媒染剂;4%铁矶;染色剂:0.5%苏木精 8.2.3染色方法 材料固定(固定液;朋酸'酒精=1'38h一12h.1%铁俱游液中染色8h12h,用水漂洗4次一 5次.0.5%苏木精溶液染色8h12h.45%醋酸分色、压片 8.3 同工酶检验 8.3.1酶液提取 酶液提取步骤如下 a)取检样丝状体用蒸水洗净,吸水纸吸干,称取0.4g左右 b)将丝状体置于事先预冷的研钵中,按1:3(质量浓度)加人酶提取液(配制方法见第A.1章) 冰浴中研磨10min~15min D 4C,l0000r/min离心30m min; 取上清液点样,剩余上清液置一20C保存备用 e) 8.3.2电泳 8.3.2.1凝胶浓度 浓缩胶浓度为5%,按第A.2章配制 分离胶浓度为7.5%,按第A.3章配制
GB21046一2007 8.3.2.2加样 按8.3.2.1方法制胶,0.025%澳酚蓝作指示剂,取45L样品加人点样孔中 8.3.2.3电泳 温度0C4C,电压160V,时间2h一3h 当溴盼蓝指示带移至距胶末端约2cm时停止电泳,立 即取下凝胶 8.3.3染色 取下凝胶,重蒸水漂洗干净,37C染色,染色完成后重蒸水漂洗，置7%醋酸溶液中保存 染色液的 配制见附录B
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GB21046?2007 B ? 淶?? ??? B.1????? NAD??I)50nmg,NBT(??30mg,PMs(?)2mg 95%?4mL,0.2mol/1Tris-HCl?(pH8.0)14ml.,100mL? 0.2mol/LTris-HCl?(pH8.0);6.05gTris,200ml?,?pH8.0,250mL ? B.2???? NAD50mg,NBT30mg,PMs2mg,1mol/L(pH7.0)10mL,0.1mol/L?5mg" 0.5mol/ITris-HCl?(pH7.1)15mL,.100mL??? 0.5mol/LTris-HC?(pH7.1):60.5gTris,500mL??,?pH7.1 1000ml? B.3????? mg,NBT30mg,PMs2 NAD50 nol/LI-?pH7.0)10mL,0.5mol/LTris-HCl mg,lmmG ?(pH7.1)20mL,l00ml?