保健食品中葛根素的测定

保健食品中葛根素的测定

国家标准 GB/T22251一2008 保健食品中葛根素的测定 Determinatonofpuerarininhealthfods 2008-07-31发布 2008-11-01实施 中华人民基和国卫生部 发布 国家标准化睿理委员会国家标准
GB/T22251一2008 前 言 本标准由卫生部提出并归口 本标准负责起草单位:疾病预防控制中心营养与食品安全所 本标准参加起草单位:北京市疾病预防控制中心 本标准主要起草人:杨大进、鲁杰、宋书锋、马兰,罗仁才 本标准为首次发布
GB/T22251一2008 保健食品中葛根素的测定 范围 本标准规定了保健食品中葛根素的测定方法 本标准适用于以葛根为主要原料的保健食品中葛根素的测定 当信噪比S/N=3,取样量为1.0g,定容体积为10mL时,本方法的检出限(LOD)为2.0X10了g/kg 当信噪比s/N=10,取样量为1.0g,定容体积为10mL时,方法的定量限(L0Q)为6.0X10-g/kg 方法 的线性范围为5.04g/ml504g/ml 原理 根据葛根素溶于甲醇,水等极性溶剂的特性,试样采用70%甲醇溶液进行超声提取,然后定容,单 葛根提取物制成的试样过滤后直接利用高效液相色谱仪分离,紫外检测器检测,根据保留时间和峰面 积进行定性和定量 由多种植物提取物制成的试样需经大孔吸附树脂净化后再进行高效液相色谱 分析 试剂和材料 3.1甲醇(CH.OH):优级纯 3.2无水乙醉(c.H.,OH);分析纯 3.3冰乙酸(CH,cooH);优级纯 3.436%乙酸:用冰乙酸与水按9:l6的比例配制 3.5水(Ho);为实验室一级用水,电导率(25C)为0.01ms/m. 3.6葛根素标准品:纯度>95% 37葛根素标准铺备游液(a.0Dn说/ml);谁确称取0.02长葛根素标准品(精确至0.01),用0% 甲醉溶解并定容至10mL混匀(此标准储备溶液在4C冰箱中可保存7d. 3.8葛根索标准使用液(2004g/ml)准确吸取1.00mL葛根索标准储备游液于10ml容量瓶中,用 70%甲醇定容至刻度,混匀此标准使用液在4C冰箱中可保存7d) D101大孔吸附树脂树脂用70%乙醉浸泡24h,使其充分溶胀,反复用去离子水冲洗,将乙醉洗 净后装人层析柱(3.10)上,柱高为10cm 3.10层析柱;长15cm,内径1.0cem 仪器和设备 高效液相色谱仪;附紫外检测器 超声波清洗器 4. 4. 离心机:4000r/min. 分析步骤 5.1试样处理 5 .1.1单一葛根提取物制成的试样根据试样含量,称取0.50g一l.00g试样(精确至0.001g),加适 量70%甲醉醇,于超声波清洗器中超声提取20min,冷却至室温,再用70%甲醇定容至10ml,混匀,静 置,上清液经0.45Am微孔滤膜过滤后,待液相色谱分析
GB/T22251一2008 5.1.2多种植物提取物制成的试样;根据试样含量,准确称取0.50g1.00g试样(精确至0.001g), 加适量水溶解,并于超声波清洗器中超声20min,冷却至室温后用水定容至10ml,混匀,4000r/min 离心5min 取1nmL上清液上大孔吸附树脂层析柱,用约40mL水以1lmL/min淋洗杂质,再用50mL 70%甲醇洗脱葛根素,将洗脱液置于沸水浴蒸发近干,用70%甲醇将其溶解并定容至1mL,过0.45Am 滤膜后待高效液相色谱用 5.2标准曲线的制备 分别吸取标准使用液(3.8),用70%甲醇稀释并定容的浓度分别为54g/m、104g/mL,204g/mL、 304g/ml、404g/ml,504g/ml的标准系列 5.3液相色谱参考条件 55 .3.1色谱柱;ODsC,250mm×4.6mm,5m. 2 5.3. 流动相:甲醇36%乙酸十水=25+3+72 5.3.3流速;0.6ml/min 5.3.4检测波长:247nmm 5.3.5进样体积:10L 5.4色谱分析 在给定的仪器条件下进标准溶液系列和试样净化液进行液相色谱仪分析以保留时间定性,以峰高 或峰面积定量 结果计算 试样中葛根素的含量按式(1)进行计算 c×V×1000 X= m1X1000X1000 式中: 试样中葛根素的含量,单位为克每千克(g/kg): -由标准曲线求得进样液中葛根素的浓度,单位为微克每毫升(4g/ml); 试样定容体积,单位为毫升(mL) 试样质量,单位为克(g) 777 计算结果保留两位有效数字 精密度 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对值不得超过算术平均值的10% 色谱图 在上述色谱条件下的色谱图见图1一图2 0.141 葛根素 0.12 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0.00 002030400微06.007.a09,00.00I.012.0013401.00.017.00M.0 t/min 图1葛根素标准色谱图
GB/T22251一2008 葛根素 0.15 0.10 0.05 0.00 吐x 1.002.003.004.005.006.007.008.009.0010.0011.0012.0013.0014.0015.0016.0017.0018.00 /min 图2多种植物提取物制成的试样色谱图