牛无浆体病快速凝集检测方法

牛无浆体病快速凝集检测方法

国家标准 GB/T186512002 牛无浆体病快速凝集检测方法 Methodsoffastagglutinationtest forbovineanaplasm0sis 2002-02-19发布 2002-05-01实施 中华 民共，和国 发布 国家质量监昏检验检疫总篇国家标准
GB/T186512002 前 言 过去认为无浆体(anaplasma)是原虫,现确定是一种立克次氏体,译名还有微粒抱子虫、无形体等， 根据生物学特征,“无浆体”最为确切,因此本标准中用此名 牛无浆体病是一种牛血液传播病 牛一且 感染,即可成为终生带虫者,使养牛业造成很大经济损失 世界动物卫生组织[worldOrganizationfor AnimmalHealth(英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),OE]将本病列为B类传染病,本病也是我国 出人境动物检疫对象之 OIE推荐诊断牛无浆体病的方法中,卡片凝集检测具有微量、快速,灵敏度高和特异性好等优点,故 得到广泛应用 我国曾报道过用补体结合试验诊断牛无浆体病,但因部分血清有抗补体作用,而常被误 判.目前国内尚无卡片凝集检测标准 本标准以OIE推荐技术为依据,参考了澳大利亚和美国检测方法,抗原保存期为一年到三年,试验 温度范围为25C28C 本标准由农业部提出 本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口 本标准起草单位:农业部动物检疫所 本标准主要起草人;吴鉴三、张肖正
国家标准 牛无浆体病快速凝集检测方法 GB/T18651-2002 Methodsoffastagglutinationtest forb0vineanaplasmosis 范围 本标准规定了牛无浆体病快速凝集检测方法 本标准适用于牛无浆体病的诊断 其他动物无浆体病的诊断亦可参照本方法 试剂和器械 2.1试剂 a无浆体凝集抗原,4C保存; b阴性协同血清(牛血清因子),一70C-80C保存; e阳性对照血清，一20C保存; d阴性对照血清 一20C保存 以上试剂由制标单位提供 2.2器械 2.2.1微量移液器;5Al.、10l或5Al25AL.(连续可调) 2.2.2微量移液器头若干个 2.2.3试验用板;取85mm×12.5mm洁净透明塑料平板,用油漆或油性记号笔划成4排×6个区位 操作步骤 实验应在25C28C环境下进行 3.1被检血清按常规采集和分离,从采集到第一次检测前,要在室温放置38h一48h,然后冷藏或冻存 备用,长期低温保存会使阳性率下降 3.2取出凝集抗原,阴性协同血清、阳性和阴性对照血清以及被检血清在25C一28C下放置 15min20min 3.3同时在平板第一排左起1,2区位划上阳性(+)和阴性(一)符号,其余各区位依次编上被检血 清号 3.4用微量移液器在编号区位内按号分别加阳性、阴性对照血清和待检血清10AL 3.5在各区位加凝集抗原了L,靠近血请互不接触 3.6在各区位抗原旁加阴性协同血清10L,互不接触 3.7用牙签将各区位的三种反应物摊成液面(约成人小指甲盖面积),混合均匀 做一份血清换用一根 牙签 3.8用手轻轻晃动该平板,在4min~8min内,当阳性对照血清开始出现凝集反应时,对着黑色背景 判读结果 2002-05-01实施 国家质量监督检验检疫总局2002-02-19批准
GB/T18651一2002 判定标准 阳性对照血请出现颗粒请晰的凝集现象 4.1 4.2阴性对照血清没有可辨认的任何凝集颗粒 4.3被检血清凡出现可辨认的凝集颗粒的凝集现象,均判为阳性反应