中国对虾

中国对虾

国家标准 GB/T19782一2005 中 国 对虾 Chineseprawn 2005-06-02发布 2005-10-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 中 国国家标准化管委员会国家标准
GB/T19782一2005 中 国 对虾 范围 本标准规定了对虾的主要形态结构特征、生长与繁殖、遗传学特性以及检测方法 本标准适用于对虾的种质检测和鉴定 名称与分类 学名 对虾CFenneropenaeuschinensis(Osbeck，1765)刀 分类位置 节肢动物门(Arthropoda),甲壳纲(Cru ,十足目(Decapoda),对虾科(Penaeidae),明对虾属 ustacea， Fennerobenaeuus 主要形态结构特征 外形 对虾身体侧扁,分为头胸部和腹部两部分 额角上缘基部具7齿9齿,末端尖细无齿;下缘 具3齿~5齿,下缘齿较小 维野第1腹肢的内肢变形特化成交接器.,略显钟形 雌虾第4对和第5对步足之间基部的腹甲上 有一圆盘状交接器,为纳精囊 对虾的外部形态见图1 图1对虾外部形态 3.2可量性状 3. .2.1第一触角上触鞭长度约为头胸甲的1.33倍,下触鞭长度约为头胸甲的0.67倍,与额角相等 3.2.2第二触角鳞片末缘超出第一触角柄但不及额角的末端,其触鞭很长,约为体长的2.5倍 3.2.3腹部第4节至第6节背部中央具有纵脊,第6节长约为高的1.5倍 3.2.4尾节长度微短于第6节,其末端甚尖,两侧无活动刺 3.2.5眼胃脊明显,占自眼眶边缘至肝刺间距离的3/5
GB/T19782一2005 3.3可数性状 鳗的可数性状见表1 表1对虾鲤的数目 胸 节 称 侧 钯 关节腮 足 钯 钯 生长与繁殖 4.1生长 对虾是在断续地蜕皮中生长由于雌雄对虾性成熟时间不同因而雕雄对虾的生长类型显著不 同 其体长体重及生长关系式参见附录A 4.2繁殖 4.2.1亲虾 成熟的雌虾体长18cm~23cm,体重60g~80g,呈青绿色;成熟的雄虾体长13cm17cm,体重 30g~40g呈黄褐色 4.2.2交配 在10月上旬至11月初雌虾最后一次蜕皮后进行交配,翌年春季5月至6月产卵时,精子与卵子同 时排出 4.2.3产卵 水温升至13C时开始产卵,为多次产卵 雌虾怀卵量50.7108.9×10'粒(体长18 cm 20cm).卵子为沉性卵,呈浅褐色或灰绿色,直径0.235mm一0.275mm 卵膜举起后卵膜径 0.330mm0.440mm 遗传学特性 5.1细胞遗传学特性 对虾的染色体数目为2n=88,核型公式为68m十16sm十百t,染色体组型见图2 > iG >; e C 订 6 a >' 2 H3 >0 n >t :3 :> IG 《s c Ee T 《e )《 'e 6n < 图2对虾染色体组型
GB/T19782一2005 5.2生化遗传学特性 5.2.1同工酶图谱 对虾成体肌肉中乳酸脱氢酶(LDH)的电泳图谱见图3,表现为一条酶带 图3对虾成体肌肉中LDH电泳图谱 5.2.2群体遗传变异范围 对虾平均多态座位点比例为15%一20%,平均杂合度的观测值为0.01630.0275 检测方法 染色体的检测 6. 染色体的制备 将对虾胚胎或幼体用0.02%秋水仙素溶液浸泡60min 6. 1.2将胚胎或幼体移人0.7%氯化钾溶液中低渗30nmin 6. 去低渗液,缓慢加人新配制的卡诺氏(Carnoy's)固定液(3份甲醇加1份冰醋酸)固定15min 6. -20min,反复两次 1.1.4将胚胎或幼体滴到冰冻的载玻片上,室温下干燥 6.1.1.5用磷酸缓冲液(0.1tmol/LpH7.2)将吉姆萨原液稀释为4%的溶液染色15min 吉姆萨染 色液的配制见附录B 6.1.2染色体的组型分析 选择染色体形态好的分裂相100个计数,确定染色体数目 同时进行显微摄影并放大,用游标卡尺 测量染色体,进行染色体组型分析 通过计算和数理统计,根据相对长度、臂比按以下要求分类,即臂 比1.0~1.7为中部着丝粒染色体(m组),1.713.0为亚中部着丝粒染色体(snm组),3.1~7.0为亚端 部着丝粒染色体(st组),7.1以上的为端部着丝粒染色体(t组) 然后得出对虾的染色体核型 公式 同工酶分析 6. 2 .2.1样品的采集与保存 6 将对虾成体(活体)运到实验室,保存于一70C超低温冰箱中 6.2. 电泳分离 采用水平平板电泳仪及12%14%淀粉凝胶进行电泳分离 加样后,先用正式电泳时电压的二分 -电泳15min,使滤纸片吸附的样品进人凝胶中,去掉滤纸片防止出现拖带现象 正式电泳:TC8.0 系统,80V,20mA,电泳8h 整个电泳过程均在4C冰箱中进行 电泳结束后,凝胶切片,放人预先配 好的并在37恒温箱中保温的同工酶染色液中染色 同工酶染色液的配制见附录C
GB/T19782一2005 附 录A 资料性附录 对虾体长,体重及生长关系式 雌性、雄性对虾在自然海区体长与体重关系式分别以式(A.1)和式(A.2)表示 A.1 w=11.0×10"LA. A.1 w=11.3×10LA8? (A.2 式中 w 体重,单位为克(g); 体长,单位为毫米(mm). A.2对虾在自然海区的体长生长关系式以式(A.3)表示 L，=L[1一e(一灯 A.3 式中 日龄时的体长,单位为毫米(mm); 极限体长,单位为毫米(mm); 日龄,单位为天d); 开始生长时间,单位为天d); 生长系数 注:雌性:lx=201.3mm,k=0.018,l=25d; 雄性;L =163.5mm,k=0.0168,=9d A.3对虾在自然海区的体重生长关系式以式(A.4)表示 w，=w [1一e越一)]" (A.4 式中 w 日龄时的体重,单位为克(g); 极限体重,单位为克(g); W 日龄,单位为天(d) 开始生长时间,单位为天(d); 生长系数 注:雌性;w =91.8g,k=0.018,l=25d; 友=0,0168,=9d 堆性w =49.1g,k
GB/T19782一2005 附录 B 规范性附录 吉姆萨(Giemsa)染色液的配制 B.1吉姆萨染色液母液 称取0.5旦吉姆萨粉,量取甘油33nmL,在研钵中先用少量甘油与吉姆萨粉混合,研磨至无颗粒时 再将剩余甘油加人,在56C条件下温浴2h后,再加人33ml 甲醇,并混匀 保存于棕色瓶中备用 B.2磷酸缓冲液(0.2mol/L，pHH7.2) 磷酸缓冲液由A液和B液按比例混合而成 B.2.1A液(0.2mol/L,Na;HPO,:取36.1只含1个结晶水的磷酸氢二钠(Na;HPOH,O)定容 于1000ml的蒸水中;或取71.63【含2个结晶水的磷酸氢二钠(NaHPO2H,O)定容于 1000mL的蒸馏水中,即可 B.2.2B液(0.2mol/L,NaH_PO);取27.6g含1个结晶水的磷酸二氢钠(NaHPOH.O)定容于 1000mL的燕溜水中;或取31.21含2个结晶水的磷酸二氢钠(NaHPo 2Ho)定容于1000mL 的蒸水中,即可 B.2.3取A液720ml,B液28mlL,两者混合即为pH7.2的磷酸缓冲液 吉姆萨工作液 取100mL的磷酸缓冲液,加人3mL吉姆萨染色母液即可
GB/T19782一2005 附录 C 规范性附录 同工酶染色液及其所需溶液的配制 c.11mol/L三胫甲基氨基甲烧-盐酸(Iris-Hcl)缓冲液的配制 800mL水中加人121.1巨Tris碱,加人浓Hcl调节pH值至8.0,加水定容至1000mL,分装后高 压灭菌 c.2同工酶染色液的配制 见表C.1 表c.1同工酶染色液的配制 药 品 浓 度 剂量/mL 50 Tris-HC 0.2mol/IpH8.0 乳酸锂 1.0mol/I(pH8.0 辅1NAD 10mg/ml 硝基四幽篮(NBT 5mg/ml 甲基吩嗦甲基硫酸盐(PMs) 5mg/m