食品接触材料高分子材料食品模拟物中1,2-苯二酚、1,3-苯二酚、1,4-苯二酚、4,4'-二羟二苯甲酮、4,4'-二羟联苯的测定高效液相色谱法

食品接触材料高分子材料食品模拟物中1,2-苯二酚、1,3-苯二酚、1,4-苯二酚、4,4'-二羟二苯甲酮、4,4'-二羟联苯的测定高效液相色谱法

国家标准 GB/T23296.24一2009 食品接触材料高分子材料 食品模拟物中1,2-苯二酚、1,3-苯二酚、 1,4-苯二酚、4,4'-二胫二苯甲酮、 4,4'-二胫联苯的测定高效液相色谱法 Foodeontaetmaterials一Polymer一Determimationof1,2-dihydrosybenzene. 1,3-dihydroxybenzene,1,4-dihydroxybenzene,4,4'-dihydroxybenzophenone and4,4'-diydroxybiphenylinfo0dsimulants Highperformaneeliquidchromatography 2009-04-27发布 2009-09-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管蹬委员会国家标准
GB/T23296.24一2009 食品接触材料高分子材料 食品模拟物中1,2-苯二酚、1,3-苯二酚 1,4-苯二酚、4,4'-二胫二苯甲酮 4,4'-二胫联苯的测定高效液相色谱法 范围 本标准规定了食品模拟物中1,2苯二酚、1,3苯二酚、1,4-苯二酚、4,4'-二羚二苯甲削酮和4,4’-二 胫联苯的测定方法 本标准适用于食品模拟物水、3%质量浓度)乙酸溶液、10%体积分数)乙醉溶液和异辛烧中 1,2-苯二阶、1,3-苯二酚、l,4-苯二酚、4,4’-二胫二苯甲酮和4,4'-二胫联苯含量的测定 本标准三种水基食品模拟物水、3%质量浓度)乙酸和10%体积分数)乙醇中1,2-苯二酚和 1,3-苯二酚的检测低限为0.150 /L,1,4-苯二酚的检测低限为0.100mg/" /L,4,4'-二胫二苯甲酮和 mg/ 4,4'-二胫联苯的检测低限分别为0.200 g/L 和0.250mg/L,橄榄油模拟物中1,2-苯二酚和 1.3-苯二酚的检测低限为0.150mg/kg,l,4苯二酚的检测低限为0.100mg/kg,4,4'二羚二苯甲酮和 4,4’-二胫联苯的检测低限分别为0.200nmg/kg和0.250mg/kg 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标淮的条款 凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682一2008,ISO3896.1987,MoD) GB/T23296.12009食品接触材料塑料中受限物质塑料中物质向食品及食品模拟物特定 迁移试验和含量测定方法以及食品模拟物暴露条件选择的指南 原理 食品模拟物中1,2-苯二酚、1,3苯二酚、1,4苯二酚、4,4'-二胫二苯甲酮和4,4'-二胫联苯通过高 效液相色谱进行分离,采用紫外检测器进行检测 水基食品模拟物直接进样,异辛婉模拟物经水萃取后 进样 采用内标法定量 试剂和材料 除另有规定外,水为GB/T6682规定的一级水,试剂均为分析纯 正已炕 42甲醇;色谱纯 43 乙睛色谱纯 4.4冰乙酸 4.5无水乙醇 4.6磷酸二氢钠(NaHPO2H,O). 4.71,2-苯二酚标准品[C,H,(OH),CAs号;l20-80-9];纯度大于或等于99% l.3苯二酚标准品[c,H.(OH)..cAs号;l08-46-3];纯度大于或等于99%. 4.8
GB/T23296.24一2009g 4.91,4苯二酚标准品[CH(OH),CAs号:l23-31-9];纯度大于或等于99% 4.102-甲基-1,3-苯二酚内标物[CH.CH,(OH)g,CAs号:608-25-3]纯度大于或等于98% 4.114,4'-二胫二苯甲酮标准品(HOC,H,COC,H,OH,CAs号:611-99-4);纯度大于或等于99% 4.124,4'-二胫联苯标准品(HOC,H,CHOH,CAs号:92-89-6):纯度大于或等于99% 4134.4"-亚甲基联苯酚内标物[H.(C,H.,OH),cAs号;620-92-8];纯度大于或等于98% 4.143%(质量浓度)乙酸溶液;称取冰乙酸(4.4)15.0g用水定容至500mL 4.1510%体积分数)乙醇溶液;量取100.0ml无水乙醉(4.5)于1000ml容量瓶中,用水定容至 刻度 l,2-苯二酚和1,4-苯二酚标准储备液(0.5g/L);称取50mg士2mg(精确到0.lmg)1,2-苯二盼 4.7)或1,4苯二盼(4.9),用甲醉(4.2)定容至100ml,充分混匀 1,3苯二标准储备液(0.125g/L)称取12.5mg士2mg(精确到0.lmg)1,3-苯二阶(4.8),用 甲醉(4.2)定容至100ml,充分混匀 4.182-甲基-1,3-苯二酚标准内标储备液(lg/L):称取100mg士2mg(精确到0.1mg)2-甲基-1,3-苯 二酚(4.10),用甲醉(4.2)定容至100ml,充分混匀 4194.4'二羚二苯甲酮或4,4'二羚联苯标准储备液(0.5g/L).称取4,4'二羚二苯甲醒(4.11)或 二二胫联苯(4.12)50mg士2mg(精确至0.1mg),用甲醇(4.2)定容至100ml,充分混匀 4,4'-亚甲基联苯酚标准内标储备液(5.0g/I):称取500mg士2mg精确至0.1mg)4,4'-亚甲 基联苯酚(4.13),用甲醇(4.2)定容至100ml,充分混匀 4.211,2-苯二酚标准系列工作溶液:准确移取0ml ml、4.0ml8.0ml、l6.0ml和20.0mL 的1,2-苯二酚标准储备液(4.16),分别置于25mL容量瓶中,用甲醇(4.2)定容至刻度,充分混匀,得到 160mg/L,320mg/L和400mg/L 1,2-苯二酚浓度分别为0.0mg/I、40.0mg/L、80.0mg/I 4.221,3-苯二酚标准系列工作溶液;准确移取0ml,2.0mL、4.0mL,8.0mL,16.0mL和20.0mL 25mL容量瓶中,用甲醇(4.2)定容至刻度,充分混匀,得到 的1,3-苯二酚标准储备液(4.17 l,3-苯二浓度分别为0.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、40.0mg/I、80.0mg/L和100mg/I 4.231,4-苯二酚标准系列工作溶液;准确移取10m的1,4苯二酚标准储备液(4.16)于100ml容 量瓶中,用甲醇(4.2)定容至刻度,充分混匀,得到1,4-苯二酚浓度为50mg/1的标准稀释液 准确移 取上述标准稀释液0mL、1.5ml,5.0ml、7.5ml、,10.0ml和15.0ml,分别置于25ml容量瓶中， 用甲醇(4.2)稀释至刻度,充分混匀,得到1,4-苯二酚浓度分别为0.0mg/L,3.00mg/L,10.0mg/1、 15.0mg/L、20.0nmg/1和30.0mg/L 4.242-甲基-1,3-苯二酚标准内标工作溶液;准确移取5mL 的2-甲基-1,3-苯二盼标准内标储备液 )于25mL容量瓶中,用甲醇(4.2)定容至刻度,充分混匀,得到2-甲基-1,3-苯二酚浓度为 4，18 200mg/1 25 -二羚二苯甲酮或4,4'-二胫联苯和4,4'-亚甲基联苯盼标准系列工作溶液:;准确移取0mL、 2.0 0ml、4.0mL,8.0ml16.0ml和20.0ml的4, 二苯甲酮或4,4'-二羚联苯标准储备液 4.19),分别置于25mL容量瓶中,加人5.0mL .的4.4'-亚甲基联苯酚标准内标储备液(4.20),用甲醉 0.0mg/L (4.2)定容至刻度，充分混匀,得到4,4'-二羚二苯甲酮或4，4'-二羟联苯浓度分别为 40.0mg/L80.0mg/儿L、160mg/L320mg/L和400mg/L,4,4'-亚甲基联苯盼浓度为1o00mg/L 4.264,4'-亚甲基联苯酚标准内标工作溶液;准确移取5mL的4,4’-亚甲基联苯酚标准内标储备液 (4.20)于25ml容量瓶中,用甲醇(4.2)定容至刻度,充分混匀,得到4,4'-亚甲基联苯酚浓度为 1000" mg 仪器与设备 5 高效液相色谱仪:配紫外检测器
GB/T23296.24一2009 5.2分析天平:;感量为0.0001g和0.01g 5.30.45m微孔谴膜 5.4 分液漏斗.,l00ml 试液的制备 6.1标准工作溶液的制备 6.1.1水基食品模拟物介质标准工作溶液 1,2-苯二酚、1,3-苯二酚、1,4-苯二酚的标准工作溶液 分别移取1.0mL的1,2-苯二酚、l,3-苯二酚、l,4-苯二酚和2-甲基-l,3-苯二酚标准系列工作溶液 4.21、4.22、4.23和4.24)于25ml容量瓶中,用水定容,得到混合标准工作溶液,其中1,2-苯二酚浓 g/L、1.6mg/L、3.2mg/L、6.4mg/L、12.8m mg/儿L.16mgL;l,3-苯二酚浓度分别为 度分别为0mg 0mg/L,0.4mg/L,0.8mg/L、1.6mg/IL,3.2mg/L、4.0mg/L;l,4-苯二酚浓度分别为0mg/L g/L;2-甲基-1,3苯二酚浓度为8mg/L rmg/I、0.80mg/L、1.6 0.12mg/L,0.40mg/L、0.60 m8 采用同样方式,制备3%(质量浓度)乙酸溶液和10%体积分数)乙醇溶液同样浓度系列的标准工 作溶液 6.1.1.24,4'-二胫二苯甲酮、4,4’-二 -二胫联苯的标准工作溶液 准确移取1.0ml的4,1'二羚二辈甲朋或41'二羚联辈和4,'亚甲基联苯围标准工作溶液 4.25)于25ml.容量瓶中,用水定容,得到4,4'-二羚二苯甲酮或4,4'-二羚联苯浓度为0mg/L 1.6mg/L3.2mg/L、6.4mg/L、12.8mg/L、16mg/L和4,4'-亚甲基联苯酚内标浓度为40mg/L的 标准工作溶液 采用同样方式,制备3%质量浓度)乙酸溶液和10%体积分数)乙醇溶液同样浓度系列的4,4'-二 羚二苯甲酬或4,4'-二羚联苯和4,4'-亚甲基联苯酚标准工作溶液 异辛婉模拟物介质标准工作溶液 6.1.2.11,2-苯二酚、1,3-苯二酚和1,4-苯二酣的标准工作溶液 在6个烧杯中准确称取25.0g(精确至0.01g)异辛婉,然后转移至6个100mL分液漏斗中,分别 加人1.0mL的1,2-苯二盼、1,3苯二盼、1,4-苯二盼和2-甲基-1,3-苯二盼标准系列工作溶液(4.21、 4.22、4.23和4.24),充分混匀,用25ml.正已洗涤烧杯,洗涤液并人分液漏斗,然后加人10ml.水. 摇匀1nmin,静置5min,分层,收集水相萃取液,有机相再加人10mL水同法进行再次提取,收集水相萃 取液,合并两次水相萃取液于 25m容量瓶中,用水定容至刻度,得到混合标准工作溶液,其中1,2-苯 二酚浓度分别为0mg/kg、1.6mg/kg,3.2mg/kg,6.4g/kg、12.8mg/kg,16mg/kg;l,3-苯二酚浓度 分别为0mg/kg,0.4mg/kg,0.8mg/kg、1.6mg/kg、3.2nmg/kg、4.0nmg/kg;1,4-苯二酚浓度分别为 0mg/kg,0.12g/kg,0.40mg/kg,0.60mg/kg,0.80mg/kg、1.6mg/kg;2-甲基-1,3-苯二酚内标物浓 度为8mg/kg 6. 1.2.24,4'-二胫二苯甲酮或4,4'-二胫联苯的标准工作溶液 在6个烧杯中准确称取25g(精确至0.01g)异辛烧,然后转移至100mL分液漏斗中,分别加人 1nL标准工作溶液(4.25),混匀,用25ml正己炕洗涤烧杯,洗涤液并人分液漏斗,然后加人1o ml 水,摇匀1min,静置5min,分层,收集水相萃取液,有机相再加人10m流动相[7.1.2b)]同法进行再 次提取,收集水相萃取液,合并两次水相萃取液于25mL容量瓶中,用水定容至刻度,得到4,4'-二胫二 1.60 苯甲酮或4 -二胫联苯浓度分别为 mg/kg,3.20mg/kg,6.40mg/kg,12.8mg/kg、 44- 0.0mg/kg、l 16.0 mg/kg和4,4'-亚甲基联苯酚浓度为40mg/kg的标准工作溶液 6 食品模拟物试液的制备 6.2. 总则 食品模拟物试液按GB/T23296.l一2009的要求从迁移试验中获取,在4C冰箱中避光保存
GB/T23296.24一2009g 6.2.2水基食品模拟物 6.2.2.1用于测定1,2-苯二酚、1,3-苯二酚、1,4-苯二酚的试液 准确移取1ml的2-甲基-1,3-苯二酚标准内标工作溶液(4.24)于25ml容量瓶中,用水基食品模 拟物试液定容至刻度后,过0.45m滤膜后供高效液相色谱进样,平行制样两份 6.2.2.2用于测定4,4'-二胫二苯甲酮,4,4'-二羚联苯的试液 使用1mL的4,4'-亚甲基联苯酚作为标准内标工作溶液(4.26),其他同6.2.2.1 6.2.3异辛烧模拟物 6.2.3.1用于测定1,2-苯二酚、1,3-苯二酚和1,4-苯二酚的试液 准确称取从迁移试验中获得的25g(精确至0.01g)异辛婉模拟物于烧杯中,转移至100ml分液 漏斗中,准确加人lml标准内标工作溶液(4.24),充分混匀 用25ml正己婉(4.1)洗涤烧杯洗涤液 并人分液漏斗，然后加人10mL 水,摇匀1min,静置5nmin,分层,收集水相萃取液,有机相再加人 10ml水同法进行再次萃取,收集水相萃取液,合并两次水相萃取液于25ml容量瓶中,用水定容至刻 度,充分混匀,过0.45m滤膜后供高效液相色谐进样,平行制样两份 6.2.3.2用于测定4,4'-二羚二苯甲酮或4,4'-二胫联苯的试液 准确称取从迁移试验中获得的25g(精确至0.01g)异辛熔模拟物于烧杯中转移至100mL分液 漏斗中,准确加人1nmL标准内标工作溶液(4.26),充分混匀 用25mL正已己烧洗涤烧杯,洗涤液并人 分液漏斗,然后加人10mL水,摇匀1min,静置5min,分层,收集水相萃取液,有机相再加人10m流 动相[7.1.2b)]同法进行再次萃取,收集水相萃取液,合并两次水相萃取液于25ml容量瓶中,用水定 容至刻度,充分混匀,过0.45Am滤膜后供高效液相色谱进样,平行制样两份 6.3空白试液的制备 按6.2的操作处理没有与食品接触材料接触的食品模拟物 测定 7.1测定条件 7 .1.11,2-苯二酚、1,3-苯二酚和1,4-苯二酚的测定条件 a)色谱柱:(ODsCw,柱长250mm,内径4.6mm,粒径54m,或相当者; b) 流动相:称取7.5只磷酸二氢钠(4.6)溶于800mL水中,加人乙睛(4.3)150mL.用冰乙酸 4.4)调节pH到3.6士0.2(约需冰乙酸5mL),用水定容至1L e)流速1.0mL/min; d 进样量;50L e)柱温:30C f 波长;280nm. 7.1.24,4'-二胫二苯甲酮或4,4'-二胫联苯的测定条件 a)色谱柱;(ODsCw,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5um,或相当者; b 流动相;甲醇(4.2)-水(55十45); e)流速1.0mL/min: d 进样量:20L 柱温:30C e f 波长;280nm. 绘制标准工作曲线 按7.1所列测定条件,对水基食品模拟物介质标准工作溶液或异辛炕介质标准工作溶液进行检测 以食品模拟物中1,2-苯二盼、l,3-苯二酚、l,4苯二酚、4,4'-二胫二苯甲酮、4,4'-二胫联苯浓度为横坐 标,单位以“mg/kg或mg/L”表示,以待测物与内标物的峰面积比值为纵坐标,绘制标准工作曲线 标
GB/T23296.24一2009 准曲线的相关系数要求等于或大于0.996 标准溶液色谱图参见附录A 按式(1)计算回归参数: y=a×.r十b 式中: 食物模拟物标准工作溶液中待测物的峰面积与内标物的峰面积比值; 回归曲线的斜率; 食物模拟物标准工作溶液中待测物浓度,单位为毫克每升或毫克每千克(mg/儿或mg/kg); 回归曲线的截距 标准曲线的相关系数要求不小于0.996 7.3试液测定 对空白试液(6.3)和食品模拟物试液(6.2)依次进样,记录相应峰面积,扣除空白值,根据线性方程 计算食品模拟物中1,2苯二前l,3-辈二盼l,+苯二盼、4,4二羚二苯甲酮、4,4'二羚联苯浓度,单位 以“mg/或mug/kg”表示 结果计算 食品模拟物试液中1,2-苯二酚、1,3-苯二酚、1,4-苯二酚,4,4'-二胫二苯甲酮、4,4'-二羚联苯浓度 食品模拟物试液中1,2-苯二酚、1,3-苯二盼、1,4-苯二酚、4,4'-二羚二苯甲酮、4,4'-二羚联苯浓度e 按式(2)计算 式中: -食品模拟物试液中待测物的浓度,单位为毫克每升或毫克每千克(mg/儿或mg/kg); -食品模拟物试液中待测物的峰面积与内标物的峰面积比值 -回归曲线的截距 -回归曲线的斜率 8.21,2-苯二酚、1,3-苯二酚、1,4-苯二酚、4,4'-二胫二苯甲酮、4,4'-二胫联苯特定迁移量的转化计算 由8.1得到的食品模拟物试液中待测物浓度,根据迁移试验中所使用的食品模拟物试液的体积与 测试样液与食品模拟物接触面积,通过数学换算计算出待测物的特定迁移量，单位以“mg/kg或 mg/dnmi"表示 详见GBy/T23296.1一2009的第13章 计算结果以平行测定值的算术平均值表示,保留3位有效数字 重复性 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%.
GB/T23296.24一2009g 附 录A 资料性附录 四种食品模拟物中1,2-苯二酚、1,3-苯二酚、1,4-苯二酚 4,4'-二胫二苯甲酮、4,4'-二羚联苯的标准图谱 20- 15 10 12min 1,4-苯二酚 -1,3-苯二酚; -2-甲基-l,3-苯二酚; 1,2苯二前. 图A.1水中1,2-苯二酚、1,3-苯二酚、1,4-苯二酚和2-甲基-1,3-苯二酚色谱图 15 10 10 12 min -l,4-苯二酚 1,3-苯二酚 2-甲基-1,3-苯二酚 -1,2-苯二酚 图A.210%(体积分数)乙醇溶液中1,2-苯二酚、1,3-苯二酚、 1,4-苯二酚和2-甲基-1,3-苯二酚的色谱图
GB/T23296.24?2009 20- 15? 10 10 12 minm -1,4- 1,3- -2?-1,3- 1,2-? ?A.33%?)?1,2-?1,3-? 1,4-?2-?-1,3-?? 10- 2min 10 1,4- 1,3 -2-?-1,3- 1,2 ?A.41,2-?1,3-?1,4-?2-?-1,3-??
GB/T23296.24一2009g 125 100 75- 50- 25 min -4,4'-二羚二苯甲酮 -44'-亚甲基联苯前 图A.5水中4,4'-二胫二苯甲酮和4,4'-亚甲基联苯酚的色谱图 125- 100- 75- 50- 25 mi 4,4'二胫二苯甲酮: -4,4'-亚甲基联苯酚 图A.610%(体积分数)乙醇溶液中4,4'-二胫二苯甲酮和4,4'-亚甲基联苯酚的色谱图 125 100 75 50 25 min 4,4'-二羚二苯甲酮 4.4'-亚甲基联苯酚 图A.73%(质量浓度)乙酸溶液中4,4'-二胫二苯甲酮和4,4'-亚甲基联苯酚的色谱图
GB/T23296.24一2009 125 100 75- 50 25 mi 4,4'-二胫二苯甲酮 -44'-亚甲基联苯前 图A.8异辛炕中4,4'-二胫二苯甲酮和4,4'-亚甲基联苯酚的色谱图 125- 00 75 50- 25 min 4,4'二胫联苯; 2--4,4'-亚甲基联苯酚 图A.9水中4,4'-二胫联苯和4,4'-亚甲基联苯酚的色谱图 125 100 75- 50- 25- min 4,4'-二羚联苯; 4.4'-亚甲基联苯酚 图A.1010%(体积分数)乙醇溶液中4,4'-二胫联苯和4,4'-亚甲基联苯酚的色谱图
GB/T23296.24一2009g 125 00- 75 50- 25- 4,4'-二胫联苯; -44'-亚甲基联苯前 图A.113%(质量浓度)乙酸溶液中4,4'-二胫联苯和4,4'-亚甲基联苯酚的色谱图 125 100- 75- 50- 25 min 4,4'二羚联苯， 2--4,4'-亚甲基联苯酚 图A.12异辛烧中4,4'-二胫联苯和4,4'-亚甲基联苯酚的色谱图 10