GB/T28091-2011
剑线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofXiphinemaspp.asvirusvectors
- 中国标准分类号（CCS）B16
- 国际标准分类号（ICS）65.020.01
- 实施日期2012-06-01
- 文件格式PDF
- 文本页数28页
- 文件大小1.51M
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剑线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法
国家标准 GB/T28091一2011 剑线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法 DeteetionandidentifieationofXiphinemaspp.asvirusveetors 2011-12-30发布 2012-06-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/T28091一2011 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口 本标准起草单位;珠海出人境检验检疫局、浙江大学和珠海市质量计量监督检 测所
本标准主要起草人:张卫东、郑经武、廖力、蒋立琴、张燕、郭恺、陈其文、乐海洋、徐森锋、迟远丽、 吴长坤、彭仁
GB/T28091一2011 剑线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法 范围 本标准规定了剑线虫属传毒种类的检疫整定方法 本标准适用于植物根系、土壤及栽培介质中剑线虫属传毒种类的检疫鉴定 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 件
GB/T24830拟毛刺线虫属传毒种类)检疫鉴定方法 进出境植物苗木检疫规程 SN/T1l57 SN/T1158进出境植物盆景检疫规程 剑线虫属(传毒种类)基本信息 中文名1剑线虫属(传毒种类》 学名:Xiphine emnaapp.
英文名;virusvectorsspeciesofDaggernematode
剑线虫属传毒种类隶属于线虫门NematodaRudolphi,1808Lankester,1877,无侧尾腺纲Ade Linstow,1905、矛线目DorylaimidaPearse,l942、长针线虫科l.ongidoridae(Thorne,1935 nophorea neaCobb,1913
Filipjev,1934剑线虫属Xiphin" 剑线虫传毒种类是植物根系的迁移性外寄生线虫,主要依靠土壤,介质土和带根苗木,球茎等寄主 植物材料的调运传播
剑线虫属(传毒种类)的其他信息参见附录A
方法原理 将现场检疫中发现的介质土、土壤以及植株,送实验室经漏斗法或浅盘法分离获得线虫,制成临时 或永久玻片,显微镜下对雌、雄虫主要鉴定特征仔细观察并测量数据,依据本标准描述的剑线虫属传毒 种类形态鉴定特征与其基本生物学信息,按系统分类学方法,鉴定其生物学种类
仪器和用具 仪器和用具按GB/T24830执行
6 试剂 试剂按GB/T24830执行,分样筛选用300目
GB/28091一2011 现场检测 对苗木,球茎等寄主材料进行检查,注意观察苗木的生长状况、根部为害状,以及是否带介质、土壤 等
重点选取植株矮化、萎缩,根部肿大、粗短、畸形,侧根丛生等症状的苗木及根际介质或土壤,如无可 疑症状则按要求随机取样
取样后立即置密封塑料袋,标记后及时送实验室检测
具体抽样比例按sN/TI157和sN/T1158执行
实验室检测 线虫分离 线虫分离按GB/T24830执行
8.2体视显微镜镜检 分离获得的水样在10倍以上体视显微镜检查,观察线虫的形态结构
8.3标本制作 标本制作按GB/T24830执行
8.4 生物显微镜观察,摄影和测量 应针对雌、雄虫主要鉴定特征仔细观察并显微摄影,重点包括整体形态,头区轮廓、齿尖针,尾部形 态、雌虫生殖系统及雄虫交合刺等,并在每张图片上加相应标尺,测量并计算a,b,c和V等值
形态鉴定特征 9.1剑线虫属形态鉴定特征 9.1.1雌虫 虫体细长,热杀死后虫体直或腹弯或呈“C”形、开螺旋形
头部圆,连续或缢缩;侧器口宽裂缝状 侧器囊倒马形或漏斗形;齿尖针细长、针状,高度硬化,齿尖针基部呈叉状,齿托基部呈显著的凸缘状; 齿针导环为双环、后环高度硬化,导环位于齿尖针后部靠近齿尖针与齿托相连接处;背食道腺核位于背 食道腺开口附近,大于腹亚侧腺核
雌虫生殖腺有4种类型;前后生殖腺均发育完全的双生殖腺型、前 生殖腺退化但结构尚完整的双生殖腺型,前生殖腺退化且结构不完全的假单生殖腺型和无前生殖腺的 单生殖腺型等,有些种类的子宫内有骨化结构
尾部形态多样;短、半球形、有或无1个指状尾突,圆锥 形,前部圆锥形后部渐变细成丝状等
9.1.2雄虫 雄虫(有些种至今未发现)体长、形态、头部、口针、食道和尾形的特征均似雕虫,双生殖腺、对伸,交 合刺矛线型,粗壮,有侧附导片,斜纹交配肌发达,由泄殖腔向前延伸,泄殖腔区有1对交配乳突,其前一 段距离有1列腹中交配乳突(最多7个
9.2剑线虫属传毒种类的形态鉴定特征 剑线虫属传毒种类形态鉴定特征参见附录B和附录C
GB/T28091一2011 .americanumCobb,1913 9.2.1美洲剑线虫(X. 雕虫虫体细长(1.4mm 1.7mm),形成一个开阔的螺旋形;唇区半球形、轻微膨胀;齿尖针中空， 147 长约为724m,基部分叉;齿托有凸缘,长约为45Am 7m;双生殖腺,在输卵管处回折,子宫伸长. 窄、内无特殊分化结构;尾呈圆锥形,背面有一大弯,末端半球形,末端角质层无育管
雄虫极少,虫体与 雕虫相似,但后三分之一部分比雌虫弯曲更大;精巢成对,伸展而对称;交合刺很直,骨化,长为29Am.
9.2.2贝克剑线虫(X.bakeriwiliams,1961 雌虫虫体细长(3.7mm一4.7mm),热杀死后弯曲成钩状;唇区与体壁不连续,轻微缢缩;口针细 长,齿针和齿托部之和超过200Am;阴门位置较前,双卵巢,两侧生殖系统结构完整,长度相同或几乎相 一指状突
雄虫极少发现
同,无子宫分化;尾短圆锥形,末端有 9.2.3拜西尔剑线虫(X.basiriSiddiqi.1959 雕虫虫体细长(2.9mm一3.5mm),弯曲成钩状或螺旋形;唇区轻微缢缩,齿尖针和齿托长度分别 um一70um;生殖腺成对,两侧生殖系统结构完整,长度相同或几乎相同,子 Am和54 为120m132 宫存在假“Z”字形结构;尾短圆锥形,末端有一明显指状突
雄虫稀少 X.brevicollumLordello,1961 雌虫虫体细长(1.8mm一2.2mm),弯曲呈螺旋形或钩状;唇区与体壁不连续，缢缩;齿尖针和齿托 150m之间,双生殖腺,两侧生殖系统结构完整,长度相同或儿乎相同,子宫无分化器 之和在86Am 官;尾短圆锥形或半圆形,背面呈一个突圆形的大弯,腹面呈指状,尾尖钝圆
9.2.5加州剑线虫(X.caifornieumLamberti,1979 雌虫虫体细长(1.8mm2.2mm),弯曲呈螺旋形或钩状;唇区与体壁不连续,缢缩;齿尖针长 83am一98am;双生殖腺,对伸,子宫无分化,“Z”字型器官缺失;尾短圆锥形至半圆形,背面呈一个突圆 形的大弯,腹面呈指状,尾尖圆锥形,末端角质层无盲管
9.2.6考克斯剑线虫(X.coxiIarjan,1964) 雌虫虫体细长(3.1tmm4.0nmm),热杀死后呈“C”字形;唇区轻微缢缩,齿尖针和齿托长度分别 为113m一127Am和68Am~82m;双生殖腺,两侧生殖系统结构完整,长度相同或几乎相同,子宫 存在假“Z”字形结构;尾短圆锥形,末端有一指状突
雄虫稀少
9.2.7裂尾剑线虫(X.diversicaudatwmMeoletzky,1927 雌虫虫体细长(4.0mm55mm),热杀死后体弯曲;唇区扁,光滑,缢缩;齿尖针平均长度为 143Am;双卵巢,折叠,两侧生殖系统结构完整,长度相同或几乎相同,每个子宫有一个明显的假“Z”字 形器官;尾部尾短圆锥形,末端有一指状突
雄虫虫体与雌虫类似,齿尖针长134Am,基部有分叉,齿托 长75m,导环距齿针尖前端1254m;交合刺强大,中央弯曲,长度为75Am,侧引带15m. indexThorm.1950 g.2.8标准剑线虫(X. 3.6 雌虫虫体为长圆柱形(2.8mm mm),形成一个开阔的螺旋形;唇区为半圆形,有轻微缢缩; 齿尖针中空,平均长度为126Am,基部分叉与齿托形成牢固的连接,齿托长约为704m,有3个大的凸 缘;生殖腺成对,在输卵管处回折,子宫腔高度肌肉化,长与体宽接近,无子宫分化,“Z”器官缺失;尾短 圆锥形至半圆形,末端有圆形或半圆形指状突,背面呈一个突圆形的大弯,腹面呈指状
雄虫数量极少
GB/28091一2011 对繁殖不起决定性作用;虫体形态,唇区,食道,尾形等都与雌虫相似;交合刺粗状,但不骨化长约为 63 3Amm
9.2.g意大利剑线虫(X.ilaliaeMeyl,1953 雌虫虫体细长(2.3mm一2.8mm),热杀死后弯曲成"C”字形;唇区与体壁不连续,明显缢缩;齿尖 针长度87m 1~96Am,齿托长度为54m 64m;双卵巢,两侧生殖系统结构完整,长度相同或几乎 相同,无子宫分化;尾长圆徘形
雄虫极少发现
9.2.10里弗斯剑线虫(X.rivesiDalmasso,1969 1mm)弯曲显螺能形或钩状;孵区与体壁连续,无碰缩齿尖针长度 雌虫虫体细长(1.7mm2. 1014m;双卵巢,两侧生殖系统结构完整,长度相同或几乎相同,子官无分化，“Z"字形器官缺 90" Am 失;尾短圆锥形至半圆形,背面呈一个突圆形的大弯,腹面呈指状,尾尖端圆,末端角质层无盲管
塔简剑线虫(X.arjane 9.2.11 enseLamberti,1979 雌虫虫体细长(1.2mm1.4mm). 弯曲呈螺旋形或钩状;唇区与体壁不连续,缢缩;齿尖针长度 78um一88Am;生殖腺成对,两侧生殖系统结构完整,长度相同或几乎相同,子宫无分化,无“Z”字形器 官,尾短圆徘形至半圆形,背面呈一个突圆形的大弯,腹面呈指状,尾尖圆锥形,末端角质层无盲管
9.3剑线虫属主要传毒种类测计值 剑线虫属传毒种类的测计值见表1
表1剑线虫属传毒种类测计值 测计值 传毒线虫种类 ODS ODP mm m m 1.4一1.7 46一57 5.3一8.2 39~52 7483 42一47 49一53 美洲剑线虫 X.americanum 1.6 46 8.9 40 74 49 68.998.87.111.455.683
贝克剑线虫 X.baer" 4.15 8.7 63.9 68 2,93,5 56~75 4.2一8.0 58~77 120~132 54一70 4953 拜西尔剑线虫 X.basiri 3. 57~73 5,6~6.3 59一66 124126 6466 3.3 40.7 5.6 60.3" 84.7 48.8" 1.82.2 51一54 X.revicwllum 50.1 7.7 108.2 6o 94 5268 5876 8398 44~53 49~55 58 l.82.2 5.5 加州剑线虫 X.califonieun 68 6 89 5.9 48 1.8 3 6682 9~82 13~127 6882 4046 7.59.2 考克斯剑线虫 X.co.ri 96,o8,9~l0.659.372l13~123 66~70 4.0 5792 7097 4.0一5.5 l6.6~l1.461一l34 30157 39~46 裂尾剑线虫 X.diersicaudatum 96 7290 7.4l1.3 55100 131~153
GB/T28091一2011 表1(续 测计值 传毒线虫种类 ODs ODP " mm m mm 42 54一61 6.28.0 7298 123134 7481 2.83.6 40 标准剑线虫 X.inde.r 3.6 63 7.3 88 7584 6.4~7.3 040 8796 5464 150 D 意大利剑线虫 X.ilaliae 43.4 79101 6,49.2 4750 93102 一2.1 3749 5.7一6.9 51一59 90~101 48~57 5154 里弗斯剑线虫 X.rivesi 7888 53~56 3442 5.4一6.1 3842 4347 塔简剑线虫 X.larjaense 注 体长;a -体长/最大体宽;b -体长/体前端至食道与肠连接处的距离;c -体长/尾长;(ODs oadontostyle齿尖针长度;oDP -oadoantoephore齿托长度;v体前端至阴门处距离x100/体长 结果判定 10 将观察、,测量获得的各鉴定特征数字代码与多歧检索表按字母顺序进行核对,如果所有数字均与某 种相符,则初步鉴定为该种 若初步鉴定为剑线虫属传毒种类,且符合第9章对应形态鉴定特征以及表1测计值,可判为检出剑 线虫属传毒种类,其寄主和地理分布等信息可供参考
11 样品保存 若鉴定为剑线虫属传毒种类,则将剩余的线虫杀死、固定制成永久玻片保存;也可以用4%甲醛固 定后长期保存
标签上应注明样品编号、种名、寄主、产地、制作人和制作时间等
对已鉴定出带有剑线虫的植物材料,经登记后,要保存在5C~10C及干燥、防鼠防虫处,并标明 样品编号、截获日期、截获人、寄主名称,运输工具名称,输出国名等,样品需至少保存6个月,以备复验、 谈判和仲裁
GB:/T28091?2011 ?A ?? ?() A.1???A.1 A.1??? ? ???Cherryraspleafvirus(CRL ?? ???Tobacoringspotvirus(TRsV X.americanum 3. ??TomatoringspotvirusToRSV ????Peachrosettemosaicvirus(PRMV ?? ???ArabismosaicvirusArMV X.xakeri ? ?Cowpeamosaicvirus(cPMV X.basir/" X.breicwllum ??ToRsV ???CRIV ?? ??ToRSV X.califoricn ???TRSV ???ArMv ?? ????StrawberrylatentringspotvirusSLRSV ??? TRSV X.co.ri ??BromemosaicvirusBMV ???ArMv ??RaspberryrinEspotvirus cRpRsw) β? ??BMV X.diersicaudatum ???? Carmationringspotvirus(CRsVm) ????SLRSV ???ArMV ?? ???GrapevinechromemosaicvirusGCMV X.inder ?Gr8 apevimeanleafvirus(GFLV ? ?GFLv X.ilaliae ???CRLV ??? ???TRsv X.rivesi ??ToRsv ? ???TRsv X.tarjanense ??ToRSV
GB/T28091一2011 A.2剑线虫属传毒种类主要寄主及地理分布见表A.2 表A.2剑线虫属传毒种类主要寄主及地理分布 线虫名称 主要寄主 地理分布 葡萄(Vitisspp.),番茄(Lypersineculenwm 巴基斯坦,印度,斯里兰卡,,波 美洲剑线虫 桃Prunuspersica、玫瑰Ros 、结缕草属 spp. 兰,澳大利亚、新两兰、智利、墨西哥,加 X.america Zwysiaspp.),草莓(Fruariawa),大豆(G/ywine 拿大、美国 ma.r)和杂草 大花卷耳eradiuowlsaum)、普通繁缕 Sellariumedia、藜Cheooliumalbm、草莓 (Fruariaamanassa、野茅(Daucvis glomeraula) "魂 贝克剑线虫 钩子(Rubusidae4s)、马铃薯Solanumuberosm 日本、朝鲜、加拿大、,美国 X.bakeri 莓(Fragariaesca)、黑麦(L Lcopersiconesculentun 豌豆Pisum 777 Chenopodiumama ranticolor),越橘(Vacciniumcorymbosum 向日葵(Helianthsanus),茄子(Solanummelon hetos、平茄I" Lywo/persin gena、秋类(Hibiscs 7IlOS 心 果 lAh-s 雾水葛属 esculentumn 印度、巴基斯坦、塞内加尔,尼日利 拜西尔剑线虫 悉 枝 属 枣 荔 Poteriaspp. AnnonaspPp 亚、苏丹,毛里求斯、波多黎各、美国、墨 形 Foliumn X.basirl Zisipwsspp. CP 郁金 西哥,古巴 玫瑰Roaspp. 晚香玉 Polianthestuuberosd 棉花(Gossypiumarboreum)、高 粱(Sorghumicolor)、柑橘(Ci/russpp 匈牙利、以色列意大利,波兰保加 咖啡(Cofeaarabica)、悬钩子(Rubusspp.、樱 利亚、俄罗斯、斯洛伐克、乌兹别克斯 Prupedweruws),番茄(Lyopersiconecu 桃Pr X.brevicollum 坦、罗马尼亚、西班牙、巴西、委内瑞拉、 桃 Prunuspseudocerasus、草莓 le1l 秘鲁,洪都拉斯、美国,肯尼亚、马拉维 Frugariaananasa),葡萄(Vitisspp. 毛里求斯、南非 葡萄Vitisspp.)、柑橘Cilrusspp.)、首蓉属 加州剑线虫 Me 、玫瑰Rua sp.),橄榄树(OMea 美国,墨西哥,秘鲁,智利,巴两 ledlicagospp, X.californicumn euroe 考克斯剑线虫 德国,比利时,英国,西班牙、新西兰 首截属(Mdiw(ospp" X.cori 加拿大、美国 苹果(Malwsdomesthica),葡萄(Vihisspp.),啤酒花 英国、意大利、比利时,德国,瑞士法 Humlusluulus),悬钩子(Ruusspp.),玫瑰(Rosu 裂尾剑线虫 国,塞尔维亚、保加利亚,瑞典,挪威,西 9pp..芸芹属Br brasicaspp.)、天门冬属(Radi X.diersicadatum 班牙,奥地利、以色列、土耳其、约旦、澳 pp),胡萝卜(Duuuscaroa),三叶草(Trifodiun 大利亚,新西兰,加拿大、美国,南非 epense)、草莓(Frugariaanaasa)、蔷薇(Rosa spp.
GB:/T28091一2011 表A.2(续) 线虫名称 主要寄主 地理分布 葡萄(Vitisspp.,无花果(Ficuscarica、玫瑰(Rosa pp.),柑橘(Citruspp.),杨属(Populwsspp.)、酸橙 Cilrsaurantium)、尊麻属(Urticaspp.,草莓(Fra gariaanwasa),欧洲水青冈(Fags ,胡桃 伊朗、伊拉克、,法国,德国,瑞 svlatica 标准剑线虫 Juglandaceaespp.、仙人掌属(Opunliaspp.、松属士、俄罗斯、葡萄牙、意大利匈牙利、西 X.inde Pi4sspp. Tar
holo 班牙,土耳其,澳大利亚,南非、摩纳哥、 埃及,阿根廷、智利,美国 Se77e ,欧洲甜樱桃 777S777 7I 阿月浑 爬山虎Parthenoissustricsidlata 7177 子(Pisacia ea)芦苇RhicsomaPhram mitis 葡精Viis 意大利,法国,西班牙,塞尔维亚,彻 巴旦杏(Amygalwscommunis sPp. 意大利剑线虫 杏(Prunusarmeniaca 柑橘Ctrusspp.)、针叶树萄牙保加利亚、斯洛文尼亚、俄罗斯、 X.italiae elriiedcod Mwruspp.),橄榄树(oea塞浦路斯,以色列、土耳其,埃及、尼日 europaea),桃(Prunusersica),李(Prunussaliecina 利亚、利比亚、南非 苹果Malusdomestica、葡萄Vitisspp.、桃 Prwupersia)、悬钩子 Rudhuspp.)、胡桃 里弗斯剑线虫 法国、葡萄牙、西班牙、德国、美国、加 Jugandaceaespp)、白杨Populusspp,)、桧属 拿大 X.riesi 、朴属 Juniperwsspp.),胡桃(Jugandaceaespp.入 Celisspp,、栎属(Qwercusspp. 塔简剑线虫 首蓉属(Medicagospp. 美国 X.larjanense
GB/T28091一2011 附 录 B 资料性附录 剑线虫属传毒种类的形态特征图 25Hm A~c、H~K 5mD E 35m G 0Hm A,C 体前部; 雌虫后生殖管; D,E 头端; 雄虫整体; G,IJ,K尾端
图B.1 美洲剑线虫(X.americanum)形态特征图
GB/28091一2011 30Hm 50Hm 50Hm m 200Hm 30m 体前部; -雄虫尾部; B E -雕虫尾部 雕虫整体; -雌虫阴门及前生殖腺(侧面) -雄虫体后部 图B.2贝克剑线虫(X.bakeri)特征图 10o
GB/T28091一2011 100m H~J 50m 50Hm B、D、KN 50Hm 50m E 体前部(侧面); -雌虫前生殖腺(侧面) 雕虫尾部; F,G “Z”结构分化 头部前淄 雄虫体后部 H~小 D -雄虫尾部 Kl -4龄1龄幼虫尾部侧面 图B.3拜西尔剑线虫(x.basiri)特征图 11
GB/28091?2011 m AC 30m D ?; -?β() B~D E-14?β ?B.4x.brevicollum? 12
GB/T28091?2011 20m -? β; c?F 14?β; ?β G ?B.5??(X.caiforniewm)? 13
GB:/T28091?2011 2 -1?4?β; A?D E -?β ?; F?H -?β -? J ?B.6??(X.eoxi)? 14
GB/T28091一2011 25m B、H、J 3m 一A、E、G 300mc 75um A,B 体前端(侧面); 雄虫全长; C D 雌虫阴门及后生殖腺; EG 雕虫尾部唇区; 雄虫尾部《侧面) H 雄虫体后部 带有球状体的“Z"字形结构
图B.7裂尾剑线虫(X.diversicaudatum)特征图 15
GB/28091一2011 -雕虫全长; -头部侧器; B E 附器; -幼虫食道腺前端的替代齿针; F 雄虫体后部; -雕虫体后部
图B,8标准剑线虫(X.inde.x)特征图 16
GB/T28091一2011 M 20Hm 20m" B、C、E、F 30m D、I、J 30m G、 00um 体前部 体后部; CF 不同群体雌虫尾部; 头端 H 法国群体雄虫体后端; 南美群体雄虫尾部 、 K、L 雕虫整体; M 雕虫生殖系统
图B.9意大利剑线虫(X.ialiae)特征图 17
GB/28091?2011 20m AB 500m 1C ?(). B ; c -??? ?B.10???(X.rivesi)?? 20m ??); B -?β(档 ?B.11?(X.tarianense)? 18
GB/T28091一2011 附 录 c 资料性附录 剑线虫属多歧检索表 表c.1剑线虫属多歧检索表 组别 序号 种类 A B D E F H K X.orthothenum 23 2 2 X.cham/bersi 23 . ，moohyslerum GROUP1 23 23 radicicola 2 X.brasiliense 4)5123 23 58 X.fagesi 7b 23) 71 12 X.ensiculiferum 7b X.logicaudlatn 23 X.clauicaudlatun 234 34 X.ilicaulatum 1 456 l23 X.krugi GROUP2 12 X.dlinidiatunn 5 45 l13 X.llanosn 6b 23 12 6b X.costaricense 7b 15 71 X.surianese 234 234 23 16 X，siiliun 1" X.orbn 23 34 34 23 GRoUP3 18 X.arcm 7b 56 23 19 7b 34 7b X.hygrophilum 20 X.ory2ue 21 X.hallet 34 23 56 22 X.faikaeJfeaikae" 2(33(4 23 23 X.atikaeeburnense 23)l3(4 56 23 心 334 34 24 X.arilaliae 23 12 23 25 X.limooense 23 34 26 45 . .algeriense GROUP4 56 34 21 X.ifacolu"n 34 Y. 28 ch0i 29 X.ebriense 45a 45 30 X.manubriatum 45b 23 31 X，bhoenici 5a 45 56 45 56 2)3423 32 X.rolwnalwm 6b7b 56 33 5a7b46 23 X.tropicale 19
GB/28091一2011 表C.1续 序号 E K 组别 种类 X.dlracoontaun 34 34 12 123 56 35 23 X
baritaliae 12 23 34 34 34 2 12 45 36 X.marsupilami X.meridianumn 4!5 45634 3 37 38 Y
3 34 23 38 te1ue 39 X.disimile 3(4 45 23 3a 45 34 40 X.co.xico.ri 34 34 23 X.abrantinun 45 456 34 23 41 42 X 45 56 34 2(3 2 .capense 43 X.seudocort 45 45 345 234 3 44 X.co.rieuropaeumn 3 45 45 23 23 45 X.limeense 45 34 46 X.malawiense 4 23 46 (2)3 4 45 X.parisilus 45 34 X.umobae 45 48 23 X.basiri 49 4)5 56 2 34 23 23 23 50 X.bolandlium GROUP5 56 12 51 X.natalense" 23 X.diersicaudatum 1(5a 45 52 345 X.imamakst 53 23 54 X.transkeiense 5 45 34 23 58 5 34 55 X.sfoekeri 23 56 X，erriaee 5a 56 2 51 x
56 4563(4 23 5a ripogranumn 58 X.artemisiae 56 45 45 x. lusitaiceun 56 4(5 59 5a 60 X.harding" 5 23 23 6a 61 X.jomereium (5)6 34 34 58 56 34 62 X.in 5b 3(4 63 5b6(5645 4a 小 pimoides 45 64 X.majus 5a6a 56 34 56a 56 34 65 X.karachiese 66 x.imitato 45623 12 6b 6 X.melitense 45 34 34 心
GB/T28091一2011 表C.1续 组别 序号 种类 E K 45 68 X.dentatun b7b 34 7b 34 71 69 7b 34 glob0sm1 70 X.tureicum 7b 56 45 34 71 71 71 X.heyns 7b 72 X.culu 56 34 23 Y 23 56 73 heresiae 45 74 X.malagasi 23 334 56 12 34 23 75 X.rarum 23 34 56 34 76 X.ornatizulu 3)42)3 77 X.ornativulatum 34 56 78 X.ongol 3 3 oles6 GROUP5 79 X.diersumn 456 80 X.belmontense" 81 56 45 34 X.thorneanum 58 82 X.loteni 56 56 23 58 56 56 45 83 X.hisanumn 8 X..smoliki; 5b7b5(6l4(57 45 56 58 85 X.ingens 3 5a7a 86 X.macroacanthumn 45 34 5 5a 87 71 56 56 23 5a7b 71 56 56 6a7a 88 niekeae 89 Y
71 56 45 34 71 coroatumn 90 X.spinuterus 12 91 Y. 45 34 123 34523 mnluc 56 92 . .reoariabile 2: 334 23 3(4 Y
45 23 93 diannae 12 . 45 94 456 co071asi 95 X.capriiense 34 45 34 34 23 Y. 34 96 lacrimaspinae 97 X.arbereheckae 56 25 Y. 5 GROUP698 mammalmn 99 X.aequum 5 45 45 Y
100 rirri 56 101 X.aceri 23 68 102 X.sphaerocehalumn 5(6 34 Y. 45 03 (crogstrMn 04 X.con" 56 56 45 56 105X.nurugicum 345 106X.adenohystherum (5)6 45 21
GB/28091一2011 表C.1续 序号 种类 E K 组别 07 23 23 12 X.jlagelliecaudatum X.iudler 108 45 12 34 09X.steocehalum 23 11oX.spaulln 12 45 12 345 11 X.wnderlindei 12 4563(41(2) 12 112 X.caenessi 12 56 2(3l1)2 12 2(3 56 45 1)2 l13 X.dimorphicaudalum 114 X.doucet 23 115 23 23 12 X.be 123 lerger 116X.insigne 23 12 117 X.s4anicola 23 34 23 23 l18 X.swart 23 l19 X.nigeriense" 23 23 120 X.maluliense 23 X.para.setariae 121 122 X.hourkei 2 45 12 123 X.ilaliae 3(4 23 GROUP7 56 124 X.conurmn 2(3l3(4
eelongatum 34 234523 12 125 23 126 . mamarubise.ralis 34 56 34 23 23 23 34 56 127 X.mamparumajor 34 23 23 345 56 23 128 X.mamparuminor 129 X，Triabile 23 34 5)6 23 34 23 13o X.erile 34 131 X.vuti 45 132X.elilumn 56 23 133X.aja开 12 134 X.longidoides 23 34 X.louis 135 45 56 45 56 136X.simplex 23 45 34 137 X.chydermumn 138x.magaliesmonlanumn 34 X aulisanumn 139 34 34 23 34 l40 X..setariae 心
GB/T28091一2011 表C.1续 序号 种类 E K 组别 34 34 14 X.michelluet 45 142 X
34 56 2 34 urasimple.r 3 56 34 143X.isrueliae 34 23 144X.arense 3 34 23 GROUP7145 X.neobasiri 34 23 146 X.akeri 45 12 147 X.breisylus X.sahelese 45 45 23 34 148 149 X 45 Seredlolese 34 34 150x.mammillatum1 2)323 5a 34 151 X.apuanum 58 5 56 45 152 X.asilgoodey 23 5 56 153X.tarjan 23 34 154 X.inder 5a(6)56 23 56 56 34 45 X.vwilene 155 23 156 56b 23 23 X，1eoitte1e 2 Y. 56 157 345 ，breneic1 6a 6a 158 X.fluminese 23 GRoUP8 34 23 159 X.lafoense 6b 160 X.bacaniloia 34 6b 6b 23 56 16 X.guirami 7a 23 76 34 62 X.guillaumeli 7b 7b 7b 23 163 34 23 6b X.)apoense 7b 23 164 X.m4crosylum 345 165 X.colombiene 7b 56 34 23 66 X.riocaguetae 7b 167 7b poros4 34 12 34 68 X.amerieanum 3(6b45656 12 123 341(2 X.aeriecase1sstriecto X.eitricolu gewrgiaum X.bacniboia X.himalaense' X.diusum GROUP9X.bricolense X.dluriese X.inaeglale X.brevicollumn X.loridae X.breisicunm X.fortuilumn X.incognilumn X.californicum X.ffranci X.inermedium 23
GB/28091一2011 表C.1续 序号 种类 组别 X.occiluu1 X
rizesE X.kosaigudlense X.laeuistrialum X.oisholslerun X.santos X.lamberti X.orycaudlatum1 X.sharmais.ing. X.aehtaicum X.luei" X.sheri X.longisillwn X.silcaticum pchydler1m GROUP9X.madeirense acificum X.simile X.mesostilum akisanense" X.arjanense X，icrostilun baraow X.taylori X
nior X，arUun X.teicutis x.neoamer X
peria4m X.thorei ericanumsp.ing. X.neoelongatumn X.pxeudoguirani X.utahense 注:特征取值及其与其相应的代码结果 雕虫生殖系统类型 A l;前生殖腺完全退化 2;前生殖腺部分退化,无前卵巢输卵管极度退化难以辨别,子宫与连接输卵管的括约肌退化但可见 3:前生殖腺结构完整但退化(子宫、输卵管、卵巢可见 4:双卵巢,两侧生殖系统结构完整,长度相同或几乎相同 子宫分化1:存在“Z”字型结构 2:存在假“Z"字型结构 3;存在刺状结构(spine) 4:无子 B 2十3 宫分化 C:尾形 尾细长未端尖锐(e'>7.5) l 2:尾长圆锥形(2.5
GB/T28091一2011 表c.2美洲剑线虫组多歧检索表 序号 E Xiphinema X.bucaiboia 2/3 2n 1/2 X.hialavese 2 X.inaeuale 2/1 2/1 2/1 1/2 2/1 3/2 X.laevistriatum 2/3 2/3 1/2 3/2 2/1 2/1 2/1 2/1 lci X 1/2 3/2 1/2 771271or” X.neoamericanums力.ing. 2/1 X，ries 1/2 1/2 2/3 3/2 2/3 3/2 2/3 X.silatiecu1 2/1 1/2 1/2 2/n 3/2 X.anericansensstricto X.breoricollun 3/2 3/2 2/3/1 2/1 12 X.breuisicum 3/2 3/2 1/2 1/2 13 X.ricolense 2/3 2/1 2/3 2/3 1/2 1/2 2/1 X.cali/ornicum 2/3 3/2 1/2 1/2 2/1 3/2 2/门 X.citricolum 21 3/2 2/1 2/n 1/2 16 X.dlifusn 2/1 X.duriens8e 4/3 2/3 1/2 2/n 2/3 18 X.loridae" 1/2 2/3 2/3 19 X.Jortuilun 3/2 3/4 2/1 3/2 3/2 20 1/2 X.ffranci 2/3 2/1 3/2 21 X.georgianum 2/3 2/1 2/1 2/3 22 X
incert 3 2/3 1/2 2/3 2/3 2 1/2 2/1 2/3 2/3 23 2/1 1/2 2/1 X.incognilum X.inlermedlium 2/n 2/1 2/3 1/2 2/3 25 X.kosaigudense 2/3 26 X.lamberti 3/4 2/1 27 X.ongistillumn 2/3 3/2 2/3 28 X.madeirense 3/2 3/4 2/3 2/3 1/2 3/2 29 X，esostiln 2/3 2/3 3/2 3/2 1/2 3/2 3/2 2/n 30 X
icrostilum 3 X.neoelomgatum 1/2 3/2 2/3 2/n 31 32 X.occiduum 1/2 2/1 2/n 2/3 33 X.opishohysterum 3/4 1/2 1/2 34 X.orycaudalum 2/1 1/2 3/2 1/2 1/2 2/3 25
GB:/T28091一2011 表C.2(续 序号 E G Xiphinema 1/2 2n 35 X.pachaicumn 3/2 3/2 2/门 2/1 2/3 3/2 2/3 21 2/n 2/3 36 X，acdlertun 1/2 37 X.acificum 2/3 1/2 3/2 2/1 2/1 1/2 2/3 3 38 X.akisanenst 1/2 1/2 2/1 1/2 1/2 2/1 39 X.aramonoot 3/2 3/21/2 1/2 1/2" 2/3 40 X 2/1 2/1 2/1 2/1 2/3 ar7nn X perwvianumn 2/1 1/2 1/2 2/3 X.pseudoguirani 2/3 2/3 1/2 1/2 3/2 1/2 1/2 43 X.santos X.sharmais.ing 2/3 8/2 45 X.sheri 2/3 2/3 2/1 46 X.simile 2/3 2/1 2/3 2/1 47 X.larjanense" 1/2 3/2 2/3 2/1 3/2 48 X.taylori 3/2 1/2 3/2 2/1 49 X，teuicuti 2 2/3 2/1 1/2 2/3 1/2 21 2/n 50 X.thorei 2 X.ulahens8e 3/2 2/3 2/1 3/2 51 注:特征取值及其与其相应的代码结果 唇区与体壁连续,无缢缩 唇区与体壁不连续,缢缩 2. A: 3
体长>2.0mm" B 1 体长<1.5mm 21.6mm<体长<2.0mm C 1 3
1014m齿尖针长度<150m 齿尖针长度<86丝m
86wn<齿尖针长度<100um 齿尖针长度<150pm e'值<1.！ 21.2
剑线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法GB/T28091-2011
剑线虫属是一种常见的植物寄生线虫，在农业生产中常常会对作物造成不良影响。因此，对于剑线虫属及其传毒种类进行检疫鉴定是非常必要的。
剑线虫属及其传毒种类
剑线虫属（Meloidogyne）是一种泥土线虫，英文名为root-knot nematodes。它们能在许多植物根中寄生，造成根部肿胀和红褐色斑点。其中以南方根结线虫(Meloidogyne incognita)和黄背根结线虫(Meloidogyne javanica)最为常见。这两个传毒种类对于茄科、豆科等作物尤为危害。
检疫鉴定方法
GB/T28091-2011《农业植物寄生性线虫检疫鉴定方法》规定了剑线虫属及其传毒种类的检疫鉴定方法，下面简要介绍：
样品的采集和处理
从有病株或疑似感染地区采集样品，去掉杂质、土壤等，保留根系部分。将样品放入盆中，加水洗净后切成小块，用5%双氯芬酸钠溶液浸泡2小时，再用蒸馏水清洗干净，备用。
差显镜观察法
将样品置于玻片上，用手轻轻把样品压扁，加一滴蒸馏水，覆盖盖片，然后用放大镜或显微镜观察是否有剑线虫存在，可通过形态特征进行初步鉴定。
内转录间隔序列鉴定法
取样品DNA，进行PCR扩增，得到内转录间隔序列，然后进行测序并比对数据库，确定其种类和亚型。
卵囊孵化法
将样品加入含有适宜剑线虫的培养基中，培养2周后观察是否有卵孵化，可以初步确定剑线虫的存在。
结语
剑线虫属及其传毒种类是一类危害严重的植物寄生线虫，对于农业生产造成了很大的影响。因此，进行检疫鉴定是非常必要的。本文介绍了GB/T28091-2011标准下的三种检测方法，希望能对相关农业工作者提供一些参考。
