海水冷却水处理药剂性能评价方法第3部分：菌藻抑制性能的测定

海水冷却水处理药剂性能评价方法第3部分：菌藻抑制性能的测定

国家标准 GB/34550.3一2017 海水冷却水处理药剂性能评价方法 第3部分:菌藻抑制性能的测定 Methodforevaluationofeoolingseawatertreatmentagents- Part3.Determinationofinhibitingmicrobesperformance 2017-09-29发布 2018-01-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/T34550.3一2017 次 目 前言 范围 2 规范性引用文件 3 术语和定义 方法原理 试剂和材料 仪器与设备 采样 试样的制备和分装 试样的杀菌处理 10结果计算 1 质量保证与控制 附录A(规范性附录 f/2培养基 附录B(规范性附录)部分菌藻抑制剂的常用中和剂 附录c(规范性附录试样的增菌培养方法 参考文献
GB;/T34550.3一2017 前 言 GB/T34550《海水冷却水处理药剂性能评价方法》分为四个部分 第1部分:缓蚀性能的测定; -第2部分:阻垢性能的测定 第3部分:菌藻抑制性能的测定; 第4部分;动态模拟试验 本部分为GB/T34550的第3部分 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本部分由国家海祥局提出 本部分由全国海洋标准化技术委员会(SAC/Tc283)归口 本部分起草单位;国家海洋局天津海水淡化与综合利用研究所、浙江国华浙能发电有限公司 本部分主要起草人李亚红,陈尚兵,赵小芳、张益,周筝,吴彭杰,元昊
GB;/T34550.3一2017 海水冷却水处理药剂性能评价方法 第3部分:菌藻抑制性能的测定 范围 GB/T34550的本部分规定了海水冷却水处理药剂菌藻抑制性能的测定方法 本部分适用于海水冷却水处理药剂菌藻抑制性能的测定 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T12763.62007海洋调查规范第6部分;海祥生物调查 GB17378.7一2007海洋监测规范第7部分;近海污染生态调查和生物监测 HIY/T176一2014海水中铁细菌的测定MPN法 HY/T177一2014海水中硫酸盐还原菌的测定MPN法 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 3.1 海水冷却水处理药剂colingseawatertreatmentagent 海水冷却水处理过程中所使用的化学品 注:一般包括海水缓蚀剂、,阻垢分散剂,菌藻抑制剂等 3.2 菌藻抑制剂microbicide 抑制或杀死细菌营养细胞、真菌营养细胞和袍子、单细胞藻类和原生动物的化学品 3.3 生物膜biofilm 微生物在冷却系统内部固液界面的固体表面生长繁殖而形成的薄膜 3.4 mierobialiofo 微生物粘泥 iv 微生物及其分泌的粘液与其他有机和无机的杂质混合在一起的粘浊物质 3.5 陈海水agedseawater 取天然海水避光保存3个月以上使用时取其请液或经0.45wm滤膜过谴的谴液 [GB/T12763.6一2007,定义6.3.2.1.1]
GB/T34550.3一2017 3.6 菌落colony 在固体培养基表面或内部由单个微生物细胞或抱子繁殖形成的肉眼可见的细胞群体 3.7 菌落形成单位colony-formingunit;CFU 采用平皿计数法测定的菌落数量 方法原理 向海水冷却水样中,定量投加待测菌藻抑制剂,作用一定时间后,测定水样中的微生物量,并与水样 中的初始微生物量进行比较,以确定菌藻抑制剂的最低有效浓度 5 试剂和材料 除非另有说明,在分析中仅使用分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水 稀释剂,水,无水乙么脖.内朋,内二脖或聚么 5.1 二醇等 5.2氢氧化钠溶液:;40g/L 5.3盐酸溶液:ll1 5.4细菌培养基;异养菌培养基选用2216E培养基,可按照GB/T12763.62007的6.3.2.1.3方法配 制;铁细菌培养基按照HY/T176-2014的7.1方法配制;硫酸盐还原菌培养基按照HY/T177一2014 的7.2方法配制 5.5真菌培养基;庆大霉素马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA),可按照GB/T12763.62007的6.3.2.1.5 方法配制 5.6藻类培养基;f/2培养基,配方及配制方法见附录A 5.7陈海水 5.8人工海水;将31.8gNaCl、7.74gMgsO,6.0gMgCL、1.53gCa(Cl,0.07gKCl和2.0gNaHCo 加人到1000ml水中,混匀后备用 5.9无菌稀释水:将陈海水或人工海水,分装到玻璃瓶(6.14)或试管(6.16)中,分装体积99mL士2ml 或9mL士1ml 经燕汽压力灭菌器(6.4)在121C士1C下灭菌20min,冷却后备用 5.10菌藻抑制剂;应选择稀释剂(5.1)稀释,稀释成浓度为5.0mg/mL和0.5mg/ml的贮备液,现配 现用 5.11微孔滤膜;醋酸纤维或硝化纤维材质,直径50mm,孔径0.22m,0.454m和0.654mm 使用前 需浸泡于蒸水中,经蒸汽压力灭菌器(6.4)在121C士1C下灭菌20min,冷却后备用 5.12针式过滤器;混合纤维素材质,直径25mm,孔径0.22m和0.454m. 5.13医用注射器:聚丙烯塑料或硅碉铝玻璃材质,容量1mL100mL,与针式过滤器(5.12)配套 使用 6 仪器与设备 6.1天平:称量范围0200g,感量0.01g 6.2菌落计数仪 r/min220r/min 6.3恒温振荡器;恒温范围(25C70C)士0.2C,振荡频率50r/ 6.4蒸汽压力灭菌器:(110C126C)士1C
GB;/T34550.3一2017 6.5电热干燥箱;温度控制范围(50C300C)士2C 6.6磁力搅拌器或电动搅拌器 6.7无菌箱(室)或超净工作台 6.8恒温培养箱:(20C60C)士1C 6.9电热恒温水浴锅:恒温范围(37C100)士1C 6.10冰箱 6.11无油真空泵 6.12量筒;100mL,500ml、1000ml 6.13烧杯;1000m 6.14玻璃瓶;100ml、,250ml,500nmL,带螺旋盖 经燕汽压力灭菌器121C士1C灭菌20min后 50C 一60C烘干冷却备用 6.15刻度锥形瓶:250mL、500mL,配硅胶塞 经蒸汽压力灭菌器121C士1C灭菌20nmin后,50C 60C烘干冷却备用 6.16试管;直径18mm,长度180mm,配硅胶塞或试管帽 经蒸汽压力灭菌器121士1C灭菌 0min后,50C一60C烘干冷却备用. 6.17培养皿:直径90mm 经蒸汽压力灭菌器121C士1C灭菌20min后,50C60C烘干冷却 备用 6.18刻度吸管或移液器和枪头;20L~200AL,200AL1000AL、lml10ml 经蒸汽压力灭菌 器121C士1C灭菌20min后,50C60C烘干冷却备用 6.19刮刀;耐高温硅胶 经蒸汽压力灭菌器121C土1C灭菌20min后,50C一60C烘干冷却备用 6.20采样瓶:2000mlL一5000mL广口玻璃瓶或聚丙烯塑料瓶 经蒸汽压力灭菌器121士1C灭 菌20min后,50C60C烘干冷却备用 6.21采样袋.60mL一250mL聚乙烯塑料袋,可蒸汽灭菌 经蒸汽压力灭菌器121C士1C灭菌 20min后,50C一60C烘干冷却备用 6.22溶剂过滤器:玻璃或316L卫生级不锈钢材质,直径47rmm过滤基座.300mL一500mL滤杯 o0ml一200mL谜瓶,与50mm直轻径微孔滤膜配套使用 经蒸汽压力灭前器1a1仑土1C灭菌 20min后,50C一0C烘干冷却备用 6.23容量瓶50mL、100m250mL500ml、1000 ml 6.24漩涡混匀器 6.25相差或暗视野显微镜;放大倍数400~1000. 6.26试管架 6.27温度计:(0100C)士0.1C 6.28 H计或精密plH试纸;pH计,0~l.0pH)士002pH精常pH试纸,6.4一&D. 采样 7.1海水冷却水的采集 7.1.1采样前应先测定冷却塔集水池的水温和pH,并做记录 7.1.2用采样瓶(6.20)直接从单塔海水冷却水系统中选取至少3个采样点,或从多塔海水冷却水系统 的每个冷却塔相同位置选取至少1个采样点,分别采集2L5L海水冷却水 7.1.3在海水冷却水系统停加菌藻抑制剂4h后采样,并将采集到的海水冷却水混合,作为样品A,待 测 若需在停加菌藻抑制剂4内采样,则在采集海水冷却水后立即加人一种菌藻抑制剂的中和剂(或 在采样前向采样瓶中预先加人一种菌藻抑制剂的中和剂),然后混合,作为样品A,待测 中和剂的选择
GB/T34550.3一2017 见附录B 7.1.4在运输中应将样品A保存在集水池水温士5 如果在采样和实验时样品A的pH值出现 士1.0的波动,实验水样应被丢弃 采样后应在24h内开始实验 7.2海水冷却系统生物膜或微生物黏泥的采集 个 77.2.1用刮刀(6.19)从单塔海水冷却水系统中选取至少3个附着菌的区域,或从多塔海水冷却水系 统的每个冷却塔相同位置选取至少1个附着菌藻的区域,分别采集约100g一500g生物膜或微生物黏 泥样,放人采样袋(6.21)中混合,作为样品B,待用 7.2.2在运输中应将样品B保存在集水池水温士5 8 试样的制备和分装 8.1试样的制备 8.1.1海水冷却水系统中的异养菌、铁细菌、硫酸盐还原菌、真菌和藻类均可作为评价海水冷却水处理 剂菌藻抑制性能的代表菌 当采用异养菌、铁细菌或硫酸盐还原菌作为评价的代表菌时,试样初始含菌 数应达到10CFU/mL;当采用真菌或藻类作为评价的代表菌时,试样初始含菌数应达到10CFU/ml 8.1.2若样品A的初始含菌量满足8.1.1的要求,可直接作为试样I使用;若样品A中的初始含菌量 不能满足8.1.1的要求,应按附录C对样品A进行增菌培养以获得试样I 8.1.3按GB17378.7一2007的10.1测定样品A中异养菌的含量,按HY/T1762014测定样品A中 铁细菌的含量,按HY/T1772014测定样品A中硫酸盐还原菌的含量,按GB/T12763.6-2007的 6.3.4.1.2测定样品A中真菌和藻类的含量 8.1.4将样品B在无菌操作下,接种到过滤除菌或蒸汽灭菌的样品A中得到试样I 样品B在试样 中的接种量不得超过100g/IL 8.2试样的分装 8.2.1将试样I和试样放在搅拌器(6.6)上分别混匀后,再分别定量移取100ml士2ml(或100g士 2g)试样I和试样到250ml玻璃瓶(6.l4)或刻度锥形瓶(6.15)中 每一供试菌藻抑制剂浓度都应 制备3个平行样 另外制备不加菌藻抑制剂的3个平行阴性对照样 8.2.2当使用溶剂而不是水来制备菌藻抑制剂的贮备液时,还应制备3个平行溶剂对照样,即将不含 菌藻抑制剂的溶剂加人到试样I和试样I中,溶剂的加人量应与投加菌藻抑制剂时引人的溶剂等量 8.2.3试样I和试样I分装后,应测定阴性对照样的含菌量记为初始含菌量 试样的杀菌处理 9 g.1按1.5min~2.0nmin的时间间隔,依次向分装后的试样I和试样I中投加菌藻抑制剂贮备液 每 100mL试样中分别加人0.2mL,0.5mL和1.0mL菌藻抑制剂贮备液(5.10),每一菌藻抑制剂浓度均 应制备3个平行样 将投加菌藻抑制剂后的试样置于转速为100r/'min的恒温振荡器(6.3)中混匀3min一5min,恒温 9.2 振荡器的温度宜设定为采集样品时的集水池水温士5C 9.3将混匀后的试样置于恒温培养箱(6.8)中,于集水池水温土5下静置培养3h士5min,取样测菌 9.4按8.1.3中所列的测菌方法测定试样含菌量 测菌前应使用合适的中和剂对试样中的菌藻抑制剂 进行灭活处理
GB;/T34550.3一2017 0结果计算 10.1菌藻抑制性能以作用3时的对数减少值R表示,按式(1)计算 R =logA一logB 式中 A 空白样的初始微生物量,单位为菌落形成单位每毫升(CFU/ml); B 实验水样中的微生物量,单位为菌落形成单位每毫升(CFU/mL). 其中: R=1相当于90%的杀菌率; R=2相当于99%的杀菌率; R=3相当于99.9%的杀菌率; 一 -4相当于99.99%的杀菌率 R 10.2阴性和溶剂对照样(8.2.l,8.2.2)的初始微生物量在指定试验时间内的对数减少值若超过 0.5log,则本次试验结果应被舍弃,并改变试验条件,重新实验 报告结果取所有平行样的平约值 如果平行样的计数结果相差超过!个数疑级,则应重做赏验 10.3 10.4当R>1时,表明菌藻抑制剂有效,并以达到R=1时的加药浓度作为最低有效浓度 质量保证与控制 1 11.1一般采用海水冷却水样制备试样,但当冷却水样不可得时,可采用陈海水(5.8)或配制人工海水 5.9)制备试样 1.2采集硫酸盐还原菌时采样瓶内要滥满海水冷却水 1.3若试样I和试样I的初始细菌数少于10CFU/ml,初始藻类或真菌数少于10CFU/ml时,应 按照8.1,向水样中接种细菌藻类、真菌或生物膜达到要求 11.4菌藻抑制剂称量时,不应使用铝质称重盘,因为铝较活泼,易与菌藻抑制剂发生反应 1.5投加菌藻抑制剂时,菌藻抑制剂母液的加人量不得超过试样I和试样分装后体积的1%,特别 是在用溶剂而不是用水来制备菌藻抑制剂贮备液时 11.6试样】和试样l经菌藻抑制剂处理后,若R<1时,应调整菌藻抑制剂的投加浓度 1.7以叶绿素的含量来计量藻生物量时,应确定本底值
GB/T34550.3一2017 附 录 A 规范性附录 f/2培养基 贮备液的制备 A.1 A.1.1微量元素贮备液 A.1.1.1成分 成分如下(每升中的含量): a NaEDTA 4160mg; 33 b) FeCl6H.O 150mg; CusO5H.0 c 0mg; d ZnSO 7H.O 22 mg; CoCl,6H,O 10mg; e f) MnCl4HO 180mg; 6 Na,Mo 2H,O g mg A.1.1.2制法 将上述各成分溶于1L水中,混匀,制得微量元素贮备液 A.1.2复合维生素贮备液 A.1.2.1成分 成分如下(每升中的含量): 0.5 aa 钻维生素(维生素B) mg; 硫胺素(维生素B b) 100mg; 生物素(维生素H) c 0.5mg A.1.2.2制法 将上述各成分溶于1L.水中,混匀,制得复合维生素贮备液 培养基的制备 A.2.1成分 成分如下(每升中的含量): NaNO 75mg; a bNaHPO2H.O 5.65mg; c 1.0mL; 微量元素贮备液 1.0mL d)复合维生素贮备液
GB;/T34550.3一2017 A.2.2制法 将上述各成分移人1L陈海水(5.7)中,混匀 用氢氧化钠溶液(5.2)或盐酸溶液(5.3)调节培养基 的pH值至8.0,并分装于刻度锥形瓶(6.15)中,用蒸汽压力灭菌器(121C士1C)灭菌20min,冷却后 备用
GB/T34550.3?2017 ? B 淶??) ???к? ???к?B.1 B.1???к? ? к? ()(Ч?0.1%?0.5% (0.1%~l.0% ?(0.1%~0.5% (0.1%~0.5% ?0%?30 (0.5%1.0%) 1%??0.6%?? ??(1% 0.1%?0.5% ??(2% 1%?1%? (0,.1%0,5% -80(0.5%3.0%)??(1%?2% -80(0.5%3.0% -80(1%)??(1%)?(0.5%
GB;/T34550.3一2017 录 附 C 规范性附录 试样的增菌培养方法 异养菌的增菌培养方法 C.1 c.1.1配制液体培养基 将5.0g蛋白陈、l.0g酵母膏和0.1只磷酸高铁加人到1000mL陈海水(5.7)或人工海水(5.8)中 混匀 用氢氧化钠溶液(5.2)或盐酸溶液(5.3)调节pH值至7.6士0.2,并分装于刻度锥形瓶(6.15)中 于121C土1C下蒸汽压力灭菌20nmin,冷却后备用 C.1.2富集菌种的制备 取1ml样品A(7.1.2),接种到100ml液体培养基(C.1.l)中,在采集样品时的集水池水温士5C 下培养48h72h,得到异养菌富集菌种 C.1.3试样I的制备 将富集菌种(C.1.2)在无菌操作下,接种到经0.22Hm滤膜过滤除菌或121士1C下蒸汽灭菌 20min 的样品A中,得到试样I 富集菌种在试样I中的接种量不得超过100ml/L,且接种后的试 样I中异养菌的含菌量控制在10CFU/mL数量级 铁细茵的增菌培养方法 C.2.1 配制浓缩培养基 按照HY/T1762014的7.1方法配制1.5倍浓缩液体培养基,于110C士1C下蒸汽压力灭菌 30nmin,冷却后备用 C.2.2富集菌种的制备 取33mL样品A(7.1.2),接种到67ml液体培养基(C.2.1)中,在采集样品时的集水池水温士5C 下培养48h一72h,得到铁细菌富集菌种 C.2.3试样I的制备 将富集菌种(C.2.2)在无菌操作下,接种到经0.22m滤膜过滤除菌或121C士1C下蒸汽灭菌 0min的样品A中,得到试样I 富集菌种在试样I中的接种量不得超过100mL/L,且接种后的试 样I中铁细菌的含菌量控制在10CFU/mL数量级 C.3硫酸盐还原菌的增菌培养方法 C.3.1配制浓缩培养基 按照HY/T177一2014的7.2方法配制1.5倍浓缩液体培养基,于110C士1C下蒸汽压力灭菌 30 min,冷却后备用
GB/T34550.3一2017 C.3.2富集菌种的制备 取33mL样品A(7.1.2),接种到67mL液体培养基(C.3.1)中,在采集样品时的集水池水温士5C 下培养48h~72h,得到硫酸盐还原菌富集菌种 C.3.3试样I的制备 将富集菌种(C.3.2)在无菌操作下,接种到经0.224m滤膜过滤除菌或121C士1C下蒸汽灭菌 20min 的样品A中,得到试样I 富集菌种在试样I中的接种量不得超过100mL/L,且接种后的试 样I中硫酸盐还原菌的含菌量控制在10CFU/ml数量级 C.4真菌的增菌培养方法 C.4.1配制液体培养基 按照GB/T12763.6一2007的6.3.2.1.5方法配制庆大霉素马铃薯葡萄糖液体培养基 C.4.2富集菌种的制备 取1mL样品A(7.1.2),接种到100nml液体培养基(C.4.1)中,在采集样品时的集水池水温士5 下培养48h72h,得到真菌富集菌种 C.4.3试样I的制备 将富集菌种(C.4.2)在无菌操作下,接种到经0.224m滤膜过滤除菌或121士1下蒸汽灭菌 20min的样品A中,得到试样I 富集菌种在试样I中的接种量不得超过100mL/L,且接种后的试 样I中真菌的含菌量控制在10CFU/mL数量级 C.5藻类的增殖培养方法 C.5.1配制浓缩培养基 按照附录A配制1.5倍浓缩f/2培养基 C.5.2富集菌种的制备 取33nmL样品A(7.1.2),接种到67mL浓缩培养基(C.5.1)中,在采集样品时的集水池水温士5C 下培养48h一72h,得到藻类富集菌种 C.5.3试样I的制备 将富集菌种(C.5.2)在无菌操作下,接种到经0.22Mm滤膜过滤除菌或121C士1C下燕汽灭菌 20min的样品A中,得到试样I 富集菌种在试样I中的接种量不得超过100mL/L,且接种后的试 样I中藻类的含菌量控制在10CFU/mL数量级 10
GB;/T34550.3?2017 ο [1]AsTME645-07slandardTestMethodorEficeaeyofMierobieidesUsedinCoolingwater Systems

海水冷却水处理药剂菌藻抑制性能评价方法

作为一种常见的海水淡化工艺，海水冷却水处理在工业生产中得到了广泛应用。然而，由于海水中含有各种生物，如藻类和微生物等，它们会对冷却水系统造成严重的影响。因此，为了确保冷却水系统的正常运行，必须使用具有菌藻抑制性能的海水冷却水处理药剂。 针对海水冷却水处理药剂中菌藻抑制性能的评价，GB/T34550.3-2017标准提供了详细的规范。该标准主要包括以下几个方面的内容： 1. 评价指标：标准规定了三个评价指标，包括了对蓝藻、绿藻和硅藻的抑制性能测定。 2. 实验方法：标准详细描述了菌藻抑制性能的测定实验方法，包括样品的准备、实验条件和数据处理等内容。 3. 结果分析：标准对实验结果的分析进行了说明，并提供了评价结果的分类标准。 除此之外，标准还规定了实验所需的试剂、仪器设备等具体要求。在使用海水冷却水处理药剂时，必须按照该标准进行评价，以确保药剂的质量和效果。 总之，菌藻抑制性能是海水冷却水处理药剂中非常重要的指标之一。通过GB/T34550.3-2017标准提供的相关指导，可以更加准确地评价药剂的性能，从而确保冷却水系统的稳定运行。

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