饲料中氯羟吡啶的测定高效液相色谱法

饲料中氯羟吡啶的测定高效液相色谱法

国家标准 GB/T22262一2008 饲料中氯胫吹的测定 高效液相色谱法 Determimationofcopidolinfeeds一 Highperformaneeliquidchromatography 2008-08-01发布 2008-11-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管蹬委员会国家标准
GB/T22262一2008 前 言 本标准的附录A为资料性附录 本标准由农业部提出 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口 本标准起草单位:农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心 北京)] 本标准主要起草人:索德成、李兰、魏书林
GB/T22262一2008 饲料中氯胫毗的测定 高效液相色谱法 范围 本标准规定了高效液相色谱仪测定饲料中氯胫毗唁的方法 本标准适用于配合饲料、预混合饲料及浓缩饲料中氧胫毗嚏的测定 方法最低定量限为1mg/kg 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682一1992,neqIsO3696:1987 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 原理 试样中氯羚毗唁经甲醇提取.用氧化铝柱净化分离.浓缩后用甲醇溶解,注人高效液相色谱仪反相 色谱系统中进行分离,用紫外检测器进行测定 试剂和溶液 除非另有规定,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T6682规定的一级用水 乙晴;色谱纯 4.1 4.2甲醇 4.了流动氧化铝(中性,层析用)粒度150pm一75pm,在800C灼烧3h,并在130C烘箱中烘烤1h 后,放人干燥器中备用 氧差毗院标准品,纯度均应大于95% 4.5飘差毗驼标准辫被 4.5.1氯羚毗院标准贮备液;分别准确称取已知纯度的氯羚毗院标准品10mg(精确至0.0001g),置 于100mL棕色容量瓶中,加甲醉(4.2)超声使之完全溶解,并定容至刻度,摇匀 该溶液中氧羚毗院浓 以/mL,于4C保存可使用6个月 度为100" 4g 4.5.2氯羟毗啶标准工作液:准确移取氯胫毗5ml,置于50ml棕色容量瓶中,用甲醇(4.2)定容 至刻度,该溶液中氧胫毗浓度均为10g/mL,于4C保存可使用1个月 仪器和设备 除实验室常用仪器和设备外,还包括以下仪器和设备 电子天平;精度为0.0001g 5.2振荡器 5.3高效液相色谱仪;配二极管矩阵检测器或紫外检测器 5.4滤膜:孔径为0.45m
GB/T22262一2008 5.5离心机:5000 r/min 5.6旋转蒸发器:50C 5.7涡轮混合器;2500 r/min 5.8氧化铝净化柱;长度200mm,内径10mm玻璃柱 柱底部装有G砂芯板,装人氧化铝约10e Cm 的高度,使用前用20mL甲醇淋洗 试样的选取和制备 6.1按GB/T14699.1采样 6 2 选取有代表性饲料样品至少500g,按GB/T20195制备样品 分析步骤 7.1试液的制备 7.1.1提取 准确称取配合饲料5g一10g或浓缩饲料1g一5g、复合预混合饲料1g一5尽(精确至0.001g),于 50ml离心管中,加人甲醇25mL,旋涡混合,于振荡器振荡30min,3000r/min离心5min,取上清液 备用 7.1.2净化 准确吸取上清液10mL,移人氧化铝净化柱中,用10mL甲醇洗柱内壁 将过柱溶液及洗脱液全 部接收于旋转蒸发瓶中,用50C水浴的旋转蒸发器将溶剂蒸干 用1mL甲醇溶解残渣,过0.45m 的滤膜,滤液进液相色谱仪检测 7.2测定 7.2.1液相色谱条件 色谱柱,具有c填料的柱子(粒度为》pm)柱长150mm内径毛.6mn. 流动相乙睛十水=10十90(体积比)以1.0mL/min流速洗脱 检测器:二极管矩阵检测器或紫外检测器,检测波长为270nm 7.2.2定量测定 按高效液相色谱仪说明书调整仪器操作参数 向液相色谱柱中注人待测定氯羚毗标准工作液 4.5.2)及试液(7.1),得到色谱峰面积响应值,用外标法定量 7.2.3结果计算 试样中氯羟毗啶的含量X以质量分数(mg/kg)表示,按式(1)计算: P×V×c×V， X= ？ 又m又节 式中: 试样溶液峰面积值; P 样品的总稀释体积,单位为毫升(mL) 标准溶液浓度,单位为微克每毫升(ug/mL); C 标准溶液进样体积,单位为微升L):; V P 标准溶液峰面积平均值; 试样质量,单位为克(g); V 试样溶液进样体积,单位为微升(L). 平行测定结果用算术平均值表示,保留三位有效数字 重复性 同一分析者对同一试样同时两次平行测定结果的相对偏差不大于10%
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