实验动物犬瘟热病毒检测方法

实验动物犬瘟热病毒检测方法

国家标准 GB/T14926.59一2001 实 验动物 犬瘟热病毒检测方法 Laboratoryanmimal一Methodfore%aminationof eaninedistemperyirus(CDw 2001-08-29发布 2002-05-01实施 中华 民共 和国 发布 国家质量监瞥检验检疫总篇国家标准

GB/T14926.592001 前 言 本标准规定了犬瘟热病毒的检测方法 犬瘙热是犬的主要烈性传染病之一,在我国犬群中广迈流行,是目前危害我国养犬业最为严重的挨 病,是普通级犬和SPF犬的必检项目 因此增加该病赤的检测方法 本标准由科学技术部提出并归口 本标准起草单位;实验动物学会 本标准主要起草人;田克恭

国家标准 实验动物 14926.59-2001 GB/T 犬瘟热病毒检测方法 animalMethodforexaminationof L.aboratory camimedistempervirs(CDw 范围 本标准规定了犬瘟热病毒(CDV)的检测方法、试剂等 本标准适用于犬CDV的检测 引用标准 下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文 本标准出版时,所示版本均 为有效 所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性 GB/T14926.50一2001实验动物酶联免疫吸附试验 GB/T14926.51一2001实验动物免疫酶试验 原理 根据免疫学原理,采用CDV抗原检测犬血清中CDV抗体 主要试剂和器材 4.1试剂 4.1.1ELISA抗原 4.1.1.1特异性抗原 用cD感染Vero细胞,接种8一10d后,当病变达十十十十十十十时收获 冻融三次或超声波 处理后,低速离心去除细胞碎片,上清液再经超速离心浓缩后制成EL.ISA抗原 4.1.1.2正常抗原 Vero细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液 4.1.2抗原片 CDV接种Vero细胞,接种后5~7d,病变达十十+十十时,用胰酶消化分散,PBS洗涤,涂片 室 温干燥的同时,在紫外线下20cm处照射30min,冷丙酮固定10 -20C保存 min， 4.1.3阳性血清 CDV实验感染或自然感染的犬血清 41.4阴性血消 无CDV感染、未经免疫的犬血清 4.1.5酶结合物 国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 002-05-01实施
GB/T14926.59一2001 辣根过氧化物酶标记羊或兔抗犬IgG抗体;或辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白(SPA 42器材 421酶标仪 4.2.2普通显微镜 4.2.337C培养箱或水浴箱 检测方法 5.1采用ELISA方法(见GB/T14926.50一20o1)进行血清学检测 52采用IEA方法(见GB/T14926.51一2001)进行血清学检测 结果判定 普通级犬,接种疫苗后，经EL.ISA检测抗体效价>1;160,或IEA检测抗体效价>1;20判为合 格 6.2SPF级犬,不应进行疫苗接种,对阳性检测结果,选用同一种方法或另一种方法重试 如仍为阳性 则判为阳性 结果报告 根据判定结果,作出报告

国 家 标 准 实 验 动 物 犬瘟热病毒检测方法 GB/T14926,592001 标准出版社出版发行 北京西城区复兴门外三里河北街16号 邮政编码:l00045 http://www.spc.net.cn 电话63787337、63787447 2005年7月第一版2005年7月电子版制作 书号;1550661-22916 版权专有侵权必究 举报电话:(010)68533533 GB/T14926.59-2001