国家标准 GB/T39946一2021 唇用化妆品中禁用物质对位红的测定高效液相色谱法 DeterminationofprohibitedParaRedinlipeosmeties- Highperformaneeliquidchromatography 2021-03-09发布 2021-10-01实施国家市场监督管理总局发布国家标涯花管理委员会国家标准
GB/39946一2021 前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由轻工业联合会提出本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口本标准起草单位:山东省产品质量检验研究院、山东福瑞达生物工程有限公司、上海市日用化学工业研究所、青岛捷励行咨询有限公司本标准主要起草人:周莉莉、侯广月、卞英芳、王一村刘倩、杨素珍、邹惠玲、沈敏、张鹏、王晓霞、丁环
GB/T39g46一2021 引言本标准的被测物质是我国《化妆品安全技术规范(2015年版)》规定的禁用物质禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质《化妆品安全技术规范 2015年版)》规定:若技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时,国家有限量规定的应符合其规定;未规定限量的,应进行安全性风险评估,确保在正常、合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害目前我国尚未规定该物质的限量值,本标准的制定,仅对化妆品中测定该物质提供检测方法
GB/39946一2021 唇用化妆品中禁用物质对位红的测定高效液相色谱法范围本标准规定了唇用化妆品中对位红的高效液相色谱测定方法的原理、试剂和材料、仪器设备,试验步骤、结果计算、回收率和精密度,允许差等内容本标准适用于唇膏,润唇膏、唇袖、唇蜜和唇彩等唇用化妆品中对位红的测定 lg" 本标准方法检出限为0.20mg/kg,定量限为0.80mg/ 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法原理试样经三氯甲婉分散后,用乙翡进行提取,离心过膜后,采用高效液相色谱法进行测定,外标法定量必要时,采用液相色谱-质谱法确证试剂和材料 4.1水:GB/T6682规定的一级水 4.2对位红标准品;纯度不小于98%,对位红的英文名称,CAs号分子式、相对分子质量和结构式参见附录A的表A.1 4.3三氯甲烧(CHCl,);优级纯 4.4乙睛(CH,CN);色谱纯 4.5流动相:乙睛十水=85十15(体积比). 4.6标准工作溶液:准确称取对位红标准品(4.2)5.00mg(精确至0.01mg)于10mL容量瓶中,加人约 2mL三氯甲烧(4.3),待溶解后用乙晴(4.4)定容制得质量浓度为500g/mL的对位红标准储备液(于 4C避光保存,有效期3个月量取适量的对位红标准储备液,用流动相(4.5)稀释成质量浓度分别为 0.10g/mL,0.20g/mL,0.50g/mL、1.004g/mL、2.004g/mL、5.004g/mL、10.004g/mL的标准工作液,现用现配 5 仪器设备 5.1高效液相色谱仪;配有二极管阵列检测器 5.2电子分析天平;:感量为0.01mg和0.0001g 5.3超声波清洗器
GB/T39g46一2021 5.4涡旋混合器 5.5离心机:转速不低于6000r/min 5.6微孔滤膜:有机相,孔径0.45m 氮气吹干仪 5.7 6 试验步骤 6.1样品处理称取0.5g(精确至0.0001g)混合均匀试样于50ml离心管中,加人2mL三氯甲烧(4.3),涡旋混匀,加人13mL乙睛(4.4),超声提取10min,6000r/min离心10min 取5mL上清液于40C条件下氮吹浓缩至近干,用流动相(4.5)溶解定容至1mL.,超声提取5min,经0.45um微孔滤膜(5.6)过滤,供高效液相色谱测定 6.2测定 6.2.1色谱条件液相色谱分析参考条件如下 a 色谱柱:C,250mm×4.6mm(内径),54m,或其他等效色谐柱; b) 流动相(4.5); 流速:1.0mL/min; c 柱温:30C; d 进样量,10L. e fD 检测波长:485 nm 6.2.2标准工作曲线绘制将标准工作溶液(4.6)按色谱条件(6.2.1)进行测定以色谱峰的峰面积为纵坐标,对应的溶液质量浓度为横坐标,绘制标准曲线对位红标准溶液的典型色谱图和DAD光谱图参见附录B的图B.1和图B.2. 6.2.3试样测定将试样溶液(6.1)按色谱条件(6.2.1)进行测定,外标法定量试样溶液中被测物的响应值应在标准曲线的线性范围内,超出线性范围则应稀释后再进行分析必要时,阳性样品需经液相色谱-质谱法进行确证试验(参见附录C). 6.3空白试验除不称取试样外,均按上述步骤进行结果计算试样中对位红的含量按式(1)计算 p×V×V×1000 = Y m7×V×1000
GB/39946一2021 式中: 试样中对位红的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); 从标准工作曲线上查出的样液中对位红的质量浓度,单位为微克每毫升(4g/mL); 试样提取溶液的体积,即三氯甲婉与乙翡体积之和,单位为毫升(mL); V -分取液经浓缩后的最终定容体积,单位为毫升(ml); 1000 单位换算常数试样质量,单位为克g); mn 用于浓缩分取的样品体积,单位为毫升(mL) V 计算结果应扣除空白值,保留两位小数回收率和精密度在添加浓度0.60mg/kg4.00 mg/kg范围内，回收率在88.1%103.8%，相对标准偏差小于10% 允许差 9 在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%
GB/T39g46一2021 附录 A 资料性附录) 对位红标准物质的信息表A.1给出了对位红的英文名称,CAs号、分子式、相对分子质量和结构式见表A.1 表A.1对位红标准物质的信息中文名称英文名称 CAS号分子式相对分子质量结构式对位红 ParaRed 6410-10-2 CHmN,O 293.28
GB/39946一2021 附录B 资料性附录对位红标准溶液的典型色谱图和DAD光谱图对位红标准溶液的典型色谐图和DAD光谱图分别见图B.1和图B.2 0.007 7.281 0.005 0.003 0.001 -0.001 0.0 3.0 6.0 9.0 12.0 5.0 时间/minm 图B.1对位红标准溶液的典型色谱图 0.008 226 0.006 485 0.004 327 0.002 0.000 260 310 360 460 510 560 210 410 波长/nm 图B.2对位红标准溶液的DAD光谱图
GB/T39g46一2021 录附 C 资料性附录) 确证试验 C.1液相色谱参考条件液相色谱参考条件如下: 色谱柱:C,100mm×2.1mm(内径),1.7m,或其他等效色谱柱; a b) 流动相:A为乙睛,B为0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱程序:0min1.0min,20%A;1.0nmin~ 4.0min,20%A95%A;4.0min7.0min,95%A;7.0nmin~7.1min,95%A20%A:; 7.1min10.0min，20%A 流速:0.3mL/min; c d 柱温:40C; e 进样量l0ML C.2质谱参考条件质谱参考条件如下离子源;电喷雾离子源(ESI); a b 离子化模式:正离子模式:; 气帘气(CUR):241.3kPa; C d 碰撞气(CAD):55.2kPa; 电喷雾电压(IS):5000.0V; 离子源温度(TEM):450.0C; 雾化气(GS1):206.8kPa; g h 辅助气(GS2);206.8kPa; 检测方式:多反应监测模式(MRM) 对位红的保留时间,母离子、子离子,去簇电压(DP),碰撞电压(CE),碰撞室人口电压(EP)和碰撞室出口电压(CXP)见表C.1,对位红定量离子对和定性离子对的MRM色谱图分别见图C.1和图C.2 表C.1对位红的质谱参数 DP/V CE/V EP/V CXP/V 化合物保留时间n 母离子" 子离子" min 1/您 n/3 对位红 4.85 294.1 156.1,128.0 100.0 25.0,30.0 7.0 8.0
GB/39946一2021 n41oevtooDa zo1nd1o)Dde XlMMCFVS t=1rE==T M车xOk河rms 4.85 3.0e4 2.8e4 2.6e4 2.4e4 2.2e4 2.0e4 1.8e4 l.6e4 1.4e4 1.2e4 1.0e4 8000.0 6000.0 4000.0 2000.0 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 3.0 3.5 5.5 6.0 时间/min 图c.1对位红定量离子对的MM谱图(10ng/mL) k12c2o1ots-1o-1ofD:da2 anx.23e4c耳 4.85 2.3e4 2.2e4 2.0e4 1.8e4 l.6e4 1.4e4 1.2e4 1.0e4 8000.0 6000.0 4000.0 2000.0 0.0 0,0 0.5 1.0 1.5 2.0 2,5 3.0 3.5 ,0 6.0 时间/min 图c.2对位红定性离子对的MM色谱图(10ng/mL) C.3定性测定进行试样测定时,将试样适当稀释,按液相色谱和质谱参考条件(C.1和C.2)测定样液和标准工作液,如果检出色谱峰的保留时间与标准物质的相一致,并且在扣除背景后的样品质谱图中,所选择的离子均出现,而且选择离子的相对丰度与标准物质的进行比较,相对偏差不超过表C.2规定的范围,则可判断该样品中检出对位红表C.2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度人/% 50 50k20 20k10 l0 士25 士50 允许的相对偏差/% 士20 士30

唇用化妆品中禁用物质对位红的测定高效液相色谱法GB/T39946-2021

唇用化妆品中禁用物质的危害

唇用化妆品是女性日常生活中不可或缺的一部分，然而，其中可能含有禁用物质，如对位红等。这些物质会对人体造成危害，导致过敏、皮肤炎症等健康问题。因此，在生产和销售过程中，对唇用化妆品中的禁用物质进行检测是非常必要的。

高效液相色谱法的应用

高效液相色谱法是一种基于溶液-固体分离原理的分析方法，具有分离效率高、分析速度快等优点。在唇用化妆品中禁用物质的检测中，对位红的测定也可以采用该方法。

GB/T39946-2021标准要求

GB/T39946-2021《唇用化妆品中禁用物质对位红的测定高效液相色谱法》是我国化妆品行业标准化技术委员会于2021年发布的一项标准。该标准规定了对位红在唇用化妆品中的检测方法和要求，包括样品制备、色谱条件、检测灵敏度等。

具体来说，该标准要求使用C18反相高效液相色谱柱进行分离，并采用紫外检测器进行检测。同时，要求样品应该经过预处理，如加热、超声等，以提高检测的精度和准确性。

操作流程

针对GB/T39946-2021标准，对唇用化妆品中的对位红进行检测的操作流程如下：

准备标准品和待测样品，并进行预处理
将经过预处理的样品注射进入高效液相色谱柱中进行分离
使用紫外检测器对分离后的物质进行检测，并记录检测结果
通过计算公式计算样品中对位红的含量

总结

唇用化妆品中禁用物质的检测是保障消费者健康的一项重要措施。GB/T39946-2021标准提供了对位红在唇用化妆品中的检测方法和要求，为相关从业人员提供了标准化的操作流程和检测标准，有助于促进唇用化妆品行业的发展和进步。