GB/T37849-2019
液相色谱飞行时间质谱联用仪性能测定方法
Methodofperformancetestingforliquidchromatographytandemtimeofflightmassspectrometry
- 中国标准分类号（CCS）N53
- 国际标准分类号（ICS）71.040.30
- 实施日期2020-03-01
- 文件格式PDF
- 文本页数7页
- 文件大小458.01KB
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液相色谱飞行时间质谱联用仪性能测定方法
国家标准 GB/T37849一2019 液相色谱飞行时间质谱联用仪 性能测定方法 Methodofperformaneetestingforliquidchromatographytandemtimeof Iightmassspectrometry 2019-08-30发布 2020-03-01实施 国家市场监督管理总局 发布 币国国家标准化管理委员会国家标准
GB/37849一2019 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草
本标准由科学技术部提出
本标准由全国仪器分析测试标准化技术委员会(SAC/TC481)归口
本标准起草单位:计量科学研究院、广州禾信仪器股份有限公司、暨南大学
本标准主要起草人:苏福海、戴新华、高伟、宋德伟、王卫华,邵明武、何海红、黄正旭,朱辉、洪义
GB/37849一2019 液相色谱飞行时间质谱联用仪 性能测定方法 范围 本标准规定了液相色谱飞行时间质谱联用仪的性能测试方法
本标准适用于各种形式的液相色谱飞行时间质谱联用仪的性能测定
规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
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GB/T13966分析仪器术语 GB/T32267分析仪器性能测定术语 JF1528飞行时间质谱仪标准规范 术语和定义 GB/T32267、GB/T13966,JJF1528界定的以及下列术语和定义适用于本文件
3.1 分辨率resolution 仪器对相邻两个质谱峰的区分能力 注;有两种计算方法 双峰法;选取两个相邻峰进行计算; -单峰法;使用单一峰进行计算
3.2 灵敏度sensitivity 在规定的条件下,对选定化合物产生的某一质谱峰,仪器对单位浓度样品所产生的响应值
一般用 给定浓度条件下的信噪比表征灵敏度,信噪比为样品信号强度与噪声强度的比值
3.3 质量范围massrange 在正常状态下可测定的离子的质荷比范围
3.4 线性范围linearrange 响应值与待测物浓度呈线性关系的浓度范围
3.5 质量稳定性massstability -段时间内,质谱仪对离子质荷比测量值的变化
GB/T37849一2019 3.6 质量准确性mmassaccuraey 离子质荷比测量值与理论值之间的偏差
3.7 定量重复性qantizationreprdueibility 在相同测量条件下,对同一浓度的待测物进行多次重复测量,峰高(峰面积)之间的一致性
3.8 定性重复性qualitatiereprodueibility 在相同测量条件下,对同一浓度的待渊物进行多次重复渊量离子丰度比之间的一致性
3.9 动态范围dymamic" range 单张质谱图中,基峰(响应最高的质谱峰)与稳定最低信号的响应的比值 试剂和标准物质 除非另有规定,所有溶剂均为色谱级
4.1宜使用以下浓度标准物质,使用时根据仪器状况稀释至合适浓度
溶液稀释方法宜根据仪器灵敏 度状况,采用经过校准的100L和1000l.定量移液管,10倍逐级稀释,直到满足使用要求
每级稀 释母液取样量不少于100L 4.2利血平标准物质(GBwE)130412),l.0"g/ml,不确定度2.0%
4.3利血平纯度标准物质(GBw(E)090457),99.6%,不确定度0.4% 4.4聚丙二醉(简称PPG)450溶液,3.6g/ml 4.5PPG1000溶液,3.6g/mL 4.6PPG2000溶液,3.6g/ml. 测试环境 S 5.1室内环境:清洁无尘,无易燃、易爆、腐蚀性气体,室内排风良好
5.2室内温度18C一25C,相对湿度<50%
5.3仪器工作台应平稳,周围无强烈机械振动和电磁干扰源
5.4电源电压220V士22V,50Hz士1Hz
性能指标的测定 6.1测定通用条件 开机抽真空,直到真空正常,进行调谐,通过后参照附录A条件进行测定
6.2分辨率 通过流动注人方式以10AL/min流速注人一定浓度利血平标准物质溶液,采集一级质谱和二级质 谱图,采用单峰法计算分辨率
一级质谐以质荷比(m/:)609.2807处峰计算,二级质谱以m/195.0652
GB/37849一2019 或m/:397.2122处峰根据式(1)进行计算
R=M/AM 式中 分辨率; M 离子峰的质荷比 离子峰的半峰宽(fulwidthathalfnmaximumm，FwHM). M 6.3灵敏度 色谱条件参照附录A,注人适当浓度的利血平溶液,提取一级质谱m/609.2807离子或二级质谱 m/195.0652离子,再现质量色谱图,根据式(2)计算该浓度下的信噪比s/N
S/N=H/H晚用 式中: S/N 信噪比 H 提取离子(一级质谱m/609.2807,二级质谱m/:195.0652)的峰高; 基线噪声
H猫加 注1:全扫描方式下,应检查所得谱图与标准谱图的匹配度
注2噪声选择;出峰后0.5min~1.0min,在这一范围内做噪声信号做均方根(RMs),作为噪声高度
注3适当浓度指根据不同仪器状况.对标准物质进行必要的稀释使之符合进样要求,下同 6.4质量范围 将质量数设在仪器可测范围(m/501250),进行全质量范围扫描,观察是否出现特定质谱峰,离 子出峰的质荷比最小值和最大值之间,为质量范围 示例:例如用聚丙二醇校正仪器需要观察如下特征峰是否出现:m/59.049l;m/175.1329;m/233.1747; -326.2537, ;m/把442.3374 500.3793:m/616.4630;" ;m/674.5048:m/=9 /906.6729;m/1196.8816
可 / A m/: 根据不同实际情况选择不同样品
6.5线性范围 宜采用选择离子检测方式,参照附录A色谱条件,从低到高依次注人不同浓度的利血平溶液， -级 质谱取m/609.2807,二级质谱取m/:195.0652的离子峰,计算测试浓度范围内,峰高(峰面积)与浓 度间的线性相关系数R,并得到R'=0.9,0.99,0,.999或0.9999的浓度范围
-般使用的标准溶液利血平溶液配制样品作标准曲线,例如0.01ng/mL0.1ng/mL、1ng/mL 10ng/ml、100ng/ml,最低浓度应满足10倍信噪比,根据不同仪器型号可选择不同浓度范围
线性范围测试宜采用统一的分辨率和扫描速度,定量重复性和定性重复性对分辨率和扫描速度要 求同此 6.6质量稳定性 参照附录A色谱条件,注人适当浓度的利血平溶液,每2h进一次样,重复不低于6次
记录一级 质谱(m/609.2807)离子质荷比测量值,计算离子质荷比实际测量值的极差,作为稳定性测试结果
质量准确性 仪器稳定后,参照附录A色谱条件,注人适当浓度(例如1pmol/L)的利血平溶液,扫描获得 -级质谱或二级高分辨质谱图
记录一级质谱(m/:609.2807)或二级质谱m/:195.0652和 /397.2122)离子测量值,进行3次以上,计算离子实际测量值与理论值的差,选取其中绝对值最大 /
GB/T37849一2019 的一个,保留正负符号,作为质量准确性
6.8定量重复性 仪器稳定后,根据实际灵敏度,注人1.0l适当浓度的利血平溶液,连续6次以上,提取相应特征 离子,再现质量色谱图,按质量色谱峰峰高(峰面积)进行面积积分,根据式(3)计算相对标准偏差 RsD),得到定量重复性
-" ×100% RSD 式中 RSD 相对标准偏差; 相应化合物第i次测量峰面积 r 相应化合物n次测量峰面积算术平均值: -测量序号; 测量次数
6.9定性重复性 仪器稳定后,参照附录A色谱条件,注人1.0L适当浓度的利血平溶液,连续6次以上,分别记录 m/-609.2807(基峰)、m/
195.0652.,m/397.2122的保留时间,计算保留时间的RsD. 选取其中 较大的一个作为定性重复性
6.10动态范围 采用流动注射的方式,向质谱内部持续通人大浓度利血平,调节利血平的浓度使利血平基峰的响应 达到响应上限为基峰响应A
逐步调节相关电压参数直到可以获得稳定的m/=195.0652信号为 止,为最低响应B
根据式(4)计算两者的比值,为动态范围
M=A/B 式中 动态范围 M 基峰响应; A 最低响应
注:利血平的浓度根据仪器型号而定，一般为ng/L级别
GB/37849一2019 录 附 A 资料性附录 性能测试推荐参数条件 液相色谱推荐参数条件(利血平)如下 色谱柱;根据具体仪器型号而定,选择符合相关物质分析的色谱柱; a 流动相;水(含0.1%甲酸)十乙晴含0.1%甲酸) b 流速;0.4mL/min; c 柱温:40C; d 梯度条件见表A.1
e 表A.1 时间/min 有机相浓度 0.00 10% 5% 2.00 95% 3.00 3.01 10% 5.00 10%
液相色谱飞行时间质谱联用仪性能测定方法GB/T37849-2019
液相色谱飞行时间质谱联用仪（LC-TOF/MS）是一种分析化学技术，能够快速、准确地对复杂的生物样品中的化合物进行鉴定和定量。该技术已经广泛用于代谢组学、蛋白质组学等领域。
GB/T37849-2019是我国针对该技术的性能测定标准，主要包含以下内容：
- 1、仪器性能验证：包括精密度、稳定性、线性范围、检出限和灵敏度等指标。
- 2、分离效果和检测能力：通过标准物质的测定，来评估仪器的分离效果和检测能力。
- 3、应用实例：通过对复杂样品的分析，来验证仪器的鉴定和定量能力。
在进行LC-TOF/MS分析前，需要先对仪器进行质量控制，并进行仪器性能验证。其中，精密度指标是评估仪器重复测量结果的稳定性，通常使用相对标准偏差（RSD）进行描述。稳定性指标是评估仪器长时间运行的稳定程度，通常使用相对漂移率（RDR）进行描述。线性范围指标是评估仪器对待测化合物响应的线性程度，检出限指标是评估仪器对待测化合物最小可检出浓度，灵敏度指标是评估仪器对待测化合物的响应强度。
分离效果和检测能力是评估LC-TOF/MS仪器对化合物分离和检测的能力，通常采用标准物质的测定来进行评价。比如，利用乙酸盐缓冲溶液中的17种氨基酸作为标准物质，来评价仪器的分离效果和检测能力。应用实例则是通过对真实样品进行分析来验证仪器的鉴定和定量能力。
总的来说，GB/T37849-2019对LC-TOF/MS仪器进行了全面而系统的性能测定，可以有效地指导实验室在该技术领域的应用和开发。
