动物源产品中喹诺酮类残留量的测定液相色谱-串联质谱法

动物源产品中喹诺酮类残留量的测定液相色谱-串联质谱法

国家标准 GB/T20366一2006 动物源产品中隆诺酮类残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 Methodforthedeterminationofquinolonesinanimaltissues LC-MS/MSmethod 2006-09-01实施 2006-05-25发布 国家质量监督检验检疫总局 发布 小 国国家标准化管委员会国家标准
GB/T20366一2006 动物源产品中唾诺酮类残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 范围 本标准规定了动物源产品中11种憧诺酮类残留量液相色谱-串联质谱的测定方法 本标准适用于禽兔鱼、虾等动物源产品中11种呤诺酮类残留的确证和定量测定 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准 GB/T6379测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法(GB/T6682一1992,neqIso3696;1987) 原理 试样中唾诺酮类残留,采用甲酸-乙睛提取,提取液用正己烧净化 液相色谱-串联质谱仪测定,外 标法定量 试剂和材料 4.1水;应符合GB/T6682中一级水的规定 4.2乙晴;液相色谱级 4.3冰乙酸液相色谱级 4.4正己炕;液相色谱级 甲酸优级纯 乙睛饱和的正己婉;量取正己婉溶液80mL于100mL分液漏斗中,加人适量乙腊后,剧烈振摇， 待分配平衡后,弃去乙晴层既得 2%甲酸溶液;2mL甲酸用水稀释至1000mL.,混匀 甲酸-乙睛溶液:98mL .乙肮巾加人2mL甲般.混匀. .飘耀沙星.请策沙星.彤氧沙星.环闪沙星.洛美沙星.月请沙星.恩诺沙星.,沙拉沙星,双 伊诺沙星、 氟沙星、司帕沙星标准品;纯度99% l1种咋诺桐类标准贮备溶液:0.1 mg/ml 分别准确称取适量的每种咋诺啊标准品,用乙腊配 /mL的标准贮备溶液(4C保存可使用3个月 制成0.1 mg 4.1111种咋喏酮类标准中间溶液:10 4g/mL 分别准确量取适量的每种诺酮标准贮备溶液 4.10),用乙睛稀释成104g/mL的标准中间溶液(4C保存可使用1个月. 4.121种唾诺酮类混合标准工作溶液;准确量取适量的唾喏酮类标准中间溶液(4.11),用甲酸-乙晴 溶液(4.8)配制成浓度系列为5.0ng/ml、10.0 ng/ml25.o ng/ml50.0ng/ml..100.0ng/mlL. 250.0ng/ml,500.0ng/nl的唾诺酮类混合标准工作溶液(4C保存可使用1周) 4.13l1种呤诺酮类混合标准添加溶液:100ng/ml 准确量取适量的唾喏酮类标准中间溶液 4.11),用乙睛稀释成100ng/mL的畦嘴酮类标准添加溶液(4C保存可使用1周
GB/T20366一2006 表1 时间/minn 乙晴/% 2%甲酸溶液/% 15 85 1n 83 20 流速:0.8mL/min c 进样量;20L d 7.4.2质谱条件 离子源,电喷雾离子源， a b 扫描方式;正离子扫描 检测方式;多反应监测; c 电喷雾电压;5500V; 雾化气压力;0.413MPa 气帘气压力:0.344MPa; 辅助气压力;0.586MPa; g 离子源温度:500c h 定性离子对、定量离子对,碰撞气能量和去簇电压,见表2 表211种隆诺酮类的定性离子对定量离子对、碰撞气能量和去簇电压 定性离子对/(m/2) 定量离子对/m/2) 名 称 碰撞气能量/eV 去簇电压/V 母离子/子离子 母离子/子离子 30 93 320.9/303.0 伊诺沙星 320.9/303.0 76 320.9/234.o 33 89 361.9/318.o 29 氧氟沙星 361.9/318.0 4 361.9/261.0 104 320.0/302.0 33 92 诺氟沙星 320.0/302.0 36 77 320.0/233.0 334.0/316.0 95 培氟沙星 334.0/316.0 77 334.0/290.o 332.0/314.o 9 2 环丙沙星 332.0/314.0 9 53 332.0/230.9 78 351.9/265.0 36 洛美沙星 351.9/265.0 351.9/334.0 30 99 358.0/340.0 36 95 丹诺沙星 358,0/340.0 358.0/254.9 95 55 360.0/316.o 90 29 恩诺沙星 360.0/316.0 90 360.0/244.9 40 83 386.0/299.0 沙拉沙星 386.0/299.0 42 83 386.0/367.9 90 400.0/356.0 30 双氟沙星 400.0/356.0 35 400.0/382.0 100 393.0/349.o 30 l09 司帕沙星 393.0/349.0 393.0/292.o 36 109
GB/T20366一2006 7.4.3液相色谱-串联质谱测定 用混合标准工作溶液(4.12)分别进样,以峰面积为纵坐标,工作溶液浓度(ng/mL)为横坐标 绘制 标准工作曲线 用标准工作曲线对样品进行定量,样品溶液中11种目标化合物响应值均应在仪器测定 的线性范围内 在上述色谱条件和质谱条件下,11种目标化合物的参考保留时间见表3 11种目标化 合物标准品的总离子流图和选择离子流图参见附录A中的图A.1、图A.2 表311种唾诺酮类标准品的参考保留时间 保留时间/nin 称 保留时间/minm 名 称 名 伊诺沙星 丹诺沙星 6.20 10.02 7.26 恩诺沙星 11.03 氧氟沙星 诺氟沙星 7.35 沙拉沙星 16.36 培氟沙星 7.89 双氟沙星 17.22 环丙沙星 8.14 司帕沙星 17.99 洛美沙星 9.09 结果计算 试样中每种诺酮类残留量按式(1)计算 ×00o X= x; To00 式中 试样中被测组分残留量,单位为微克每千克(4g/kg); -从标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度,单位为纳克每毫升(ng/mL); 试样溶液定容体积,单位为毫升(mL); 试样溶液所代表的质量,单位为克(g) 7 注:计算结果应扣除空白值， 检出低限(LoD)和定量限(L.oO 检出低限(L.oD 伊诺沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、沙拉沙星、双氟沙星、司帕沙星为 4E/kg;恩诺沙星、丹诺沙星为0.了闪E/kg 0.1 9.2定量限(LoQ) 伊诺沙星、氧氟沙星,诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、洛美沙星、丹诺沙星、恩诺沙星,沙拉沙星、双 氟沙星、司帕沙星为1.0ug/kg 10 精密度 精密度数据按GB/T6379的规定制定,其重复性和再现性的值以95%的可信度计算 0.1重复性 在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限(r),动物源产品中11种唾 诺酮类残留含量范围及重复性方程见表3 如果差值超过重复性限(r),应舍弃实验结果并重新完成两次单个试验的测定 10.2再现性 在再现性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限(R),动物源产品中11种唾 诺酮类残留含量范围及再现性方程见表4
GB/T20366一2006 表4含量范围及重复性和再现性方程 名 称 含量范围/4g/kg 重复性限r 再现性限R 依诺沙星 1.0一50.0 -0.06700十0.192l.r R=一0.0532+0.2043n 氧氟沙星 一0.9075十l.1271lgr -0.0523十0.2250.z 1.0一50.0 lgr一 -0.0159十0.1497 -0.1169十0.2624 诺氟沙星 1.050.0 R 培氟沙星 1.0~50.0 尸=0.0224十0.1021 R=一0.0171十0.2135.2 9 环丙沙星 1.050.0 -0.95271.0424lgr -0.0676+0.2329r 洛美沙星 1.050,0 0,0012十0.1048.r lgR 0.9096十l.1506lg1 丹诺沙星 1.050,.0 =0.0140+0.1ll7 R=一0.0079+0.2182.n 恩诺沙星 R 1.0~50.0 =0.0516+0.1323r -0,0109十0.2463.r 沙拉沙星 050.0 1. lgr- -1.0224十l.1336lgr R=一0.0799+0.1979.n -0.8660十1.054 -0.0347十0.1996. 双氧沙星 1.050.0 lgr R 0lgr 司帕沙星 1.050.0o -0.0343十0.1716. R=一0.0610十0.2120 注:r为两次测定值的平均值
GB/T20366?2006 ? A ?? ??? 7.31 4.6e6 4.4e61 4.2e6 4.0e61 3.8e6 3.6ce6 3.4e6 3.2e6 33 .0esr 2.8ed 2.6e6 2te 22s 6.20 2.0ed .Ret ,6e6 t6 L2s L.0e6- 11.03 9,08 B.0e5 10.01 6.0es 4.0e5 16.36 A 2.0e 0.0- 10 13 15 16 18 19 lmin 6.20min ?? ?; 7. .26min 7.35min ?? -? 7.89min 8.14min -?; ?; 9.09min 10.02min ??; 11.03minm ?? ??" 16.36min 17.22min ??; 117 ??? 99min ?A.111????
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