GB/T37492-2019
粮油检验谷物及其制品水溶性膳食纤维的测定酶重量法
Inspectionofgrainandoils—Determinationofsolubledietaryfibreincerealsandcerealsproducts—Enzymegravimetricmethod
- 中国标准分类号（CCS）X04
- 国际标准分类号（ICS）67.040
- 实施日期2019-12-01
- 文件格式PDF
- 文本页数7页
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粮油检验谷物及其制品水溶性膳食纤维的测定酶重量法
国家标准 GB/T37492一2019 粮油检验谷物及其制品 水溶性膳食纤维的测定酶重量法 nspeetionofgranandols一Deermimatonofsoubledietaryfibreinm eerealsandcerealsproducts一Enzymegravietricmethod 2019-05-10发布 2019-12-01实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/37492一2019 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草
本标准由国家粮食和物资储备局提出
本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAC/TC270)归口
本标准起草单位:农业农村部谷物及制品质量监督检验测试中心(哈尔滨. 本标准主要起草人;单宏、苏萍、杜英秋,马永华陈国友、程爱华、王乐凯
GB/37492一2019 粮油检验谷物及其制品 水溶性膳食纤维的测定酶重量法 范围 本标准规定了酶重量法测定谷物及其制品水溶性膳食纤维的原理、试剂和材料、仪器和设备、分析 步骤、结果计算和精密度要求 本标准适用于谷物及其制品中水溶性膳食纤维的测定
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GB/T5490粮油检验一般规则 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 原理 谷物及制品试样在缓冲溶液及高温高压作用下水解,通过用热稳定的a-淀粉酶使样品凝胶,过滤， 再通过蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶对样品进行消化,去除蛋白质和淀粉,以不能消化的残渣计重,除去灰 分为水溶性膳食纤维
试剂和材料 除另有说明外,所用试剂应为分析纯,试验用水应符合GB/T6682中二级水的规定
4.1无水乙酸钠(CH,CO,.Na)
4.2无水磷酸氢二钠(NaHPO))
4.3磷酸二氢钠(NaH.POH.o)
4.4乙酸(CH,CO,H.)
4.5无水乙醇(CH,CH,OH)
4.6丙酮(CH,cOCH
氢氧化钠(NaOH)
4,7 4.8盐酸(HCI
4.9蛋白酶
4.10a-淀粉酶(从猪胰脏提取的VI-B型). 4.11淀粉葡萄糖苷酶
4.12玻璃棉
4.132.0mol/L缓冲液
4.13.1乙酸溶液(2.0mol/L);取115ml乙酸(4.4),加人700mL水,混匀后用水定容至1L 4.13.2乙酸钠溶液(2.0mol/L);称取164.00g无水乙酸钠(4.1),溶于水,移人1L容量瓶中,稀释至
GB/T37492?2019 ?? 4.13.3??(pH4.5)40mL2.0malL??(4.13.1)40ml.2.0mol ?(4.13.2)?? 4.14λ? 4.14.1?(O.1mol/L);?l4.20g?(4.2),?,1000ml ?,??? 4.14.2?(0.lmol/L):?13.80g(4.3),?,1000ml.? ,??? 4.14.30,1mol/λ?(pH>7;61ml0.1lmol/I?(4.14.1)39ml 0.1mol/L?(4.l4.2)?? 4.15??: ?5.00g?(4.9),?100mlλ?(4.14.3),15nmin1500X 10min ,?úв(4.12)?????,0C~5C?档? ?ж??A 4.16a-?? ?5.00ga-?(4.10)?100mlλ?(4.l4.3),15min1500X mm,?úв4A.12)?????,0?5T? 10 ?? ?ж??A 4.17? ?;.0o(A.11)ν10ml?λ?(.l4.3),15mina 00x?10mim,?úв?(4.12)?????,0C5? 档???ж??A 4.1880%??: ?800mL??(4.5),1L?,???,? 4.19?(1nmol/L). ?4.00g(4.7),?,100mL?,??? 4.20?(1mol/L).: ?8.3mL(4.8),100m?,???.? 豸 S 5.1÷:?????20?? 5.2?;0.01g,0.0001g 5.3;105C?2C 5.4?:525C?5C 5.5??:100C?1C 5.6? 5.7?? 5.8?:250mL 5.9??:50mL 5.10??;60mL,?40Mm?;?,1g~3g (4.12),,1l05C4h,???,á 5.11?á
GB/37492一2019 5.12抽滤装置;由抽滤瓶抽滤垫及水系组成
分析步骤 6.1试样制备 取适量试样磨粉,全部过孔径为1mm(20目)的筛,混匀
置于样品盒中室温保存
6.2试样测定 6.2.1称样 准确称取试样0.5g(精确至0.0001g),置50ml具塞磨口试管中
如果试样的脂肪含量超过 10%,则需要先脱脂再进行测定
6.2.2水解 加人2mL缓冲溶液(4.13.3),混匀,置于120c1.3×10Pa高压灭菌器中水解60min. 6.2.3淀粉酶酶解 加人100AL.a-淀粉酶溶液(4.16),加塞,置于60C士1水浴锅中酶解消化30min
然后将经过 酶处理的试样倒人玻璃滤器中,抽滤,用50mL试管收集滤液,用10mL热水冲洗滤器,将所有残留颗 粒无损失地转移至滤器中,再用5ml热水冲洗堆蜗,洗液并人上述滤液
6.2.4调整pH 在滤液中加人4ml乙酸-乙酸钠缓冲溶液(4.13.3),用氢氧化钠溶液(4.19)或盐酸溶液(4.20),调 滤液pH至5.2 6.2.5淀粉葡萄糖苷酶酶解 加人50AL淀粉葡苟糖苷酶(4.17),搅拌均匀,加塞,置于60C士1C水浴锅中酶解消化301 min
6.2.6蛋白酶解 加人20Al蛋白酶溶液(4.15),搅拌均匀,加塞,置于60士1C水浴锅中酶解消化30n min
6.2.7沉淀 将滤液转移至250ml三角瓶中,加人无水乙醇(4.5),使乙醇与试样液的体积比为4:1
混匀,加 塞,静置60min,促使沉淀生成
6.2.8洗涤 将经过沉淀处理的试液倒人处理后玻璃滤器中,抽滤,用80%的乙醇溶液(4.18)清洗三角瓶,将所 有残留颗粒无损失地转移至滤器中,用20ml.80%的乙醉溶液清洗滤渣2次,20ml的丙酮清洗2次
弃去滤液
6.2.9烘干 将玻璃滤器置于105C士2烘箱内烘干3h,取出,置于干燥器中,冷至室温,称量mi精确至 0,0001 g)
GB/T37492一2019 6.2.10灼烧 把烘干后称重的玻璃滤器置于马弗炉中,525C士5下灼烧1h,冷至200以下后,取出,置于 干燥器中,冷至室温,称量mg(精确至0.000lg)
6.2.11空白测定 按6.2.16.2.10测定空白,但不加试样
结果计算 结果计算见式(l): [(m一m 一m]X1o0 x S ×1一 式中 -试样中水溶性膳食纤维的含量,单位为克每百克(g/100g); n -滤器和试样残渣的质量,单位为克(g); 滤器和试样灰分的质量,单位为克(g) 1 -试剂空白滤器和试样残渣的质量,单位为克(g); n 试剂空白滤器和灰分的质量，单位为克(g); n 试样的质量,单位为克(g); 71 预干燥时失重的质量分数,%.,未经预干燥时.s S=0
取两次测定结果的平均值,计算结果保留到小数点后两位
测定结果不符合重复性要求时,应按GB/T5490的规定重新测定,计算结果
8 精密度 在重复性条件下,两次平行测定结果的绝对差值不得大于这两个测定值的算术平均值的10%
GB/37492一2019 附 录 规范性附录 淀粉酶、蛋白酶、淀粉葡萄糖苷酶的活性要求,测定方法及判定标准 A.1活性要求及测定方法 A.1.1淀粉酶活性测定 淀粉为底物,以Nelson/Somogyi还原糖测试淀粉酶活性;10000U/ml十1000U/mL
1U表示 在40C,pH6.5时,每分钟释放1Mmol还原糖所需要的酶量
以对硝基苯基麦芽糖为底物测试淀粉酶活性;3000CeralphaU/ml十300CeralphaU/ml
Ceral pha表示在40C,pH6.5时,每分钟释放14mol对硝基苯所需要的酶量
A.1.2蛋白酶活性测定 酪蛋白测试蛋白酶活性;300U/ml400U/ml[1个酶活力单位定义;40C,为pH8.0时,每分 钟从可溶性酪蛋白中水解出(并溶于三氯乙酸)1mol酪氨酸所需要的酶量];或7U/mg15U/mg [1个酶活力单位定义:37C,为pH7.5时,每分钟从酪蛋白中水解得到一定量的酪氨酸(相当于1mol 酪氨酸在显色反应中所引起的颜色变化,显色用Folin-Ciocalteau)试剂时所需要的酶量]
偶氮-酪蛋白测试蛋白酶活性;300U/ml400U/mL[1内肽酶活力单位定义为;40C,为pH8.0 时,每分钟从可溶性酪蛋白中水解出(并溶于三氯乙酸)1mol酪氨酸所需要的酶量]
A.1.3淀粉葡萄糖苷酶活性测定 淀粉/葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测试淀粉葡萄糖苷酶活性:2000U/ml3300U/mL(1个酶 活力单位定义为:40C,pH4.5时,每分钟释放1mol葡萄糖所需要的酶量 对-硝基苯基-丹麦芽糖苷(PNOBM)法测试淀粉葡萄糖苷酶活性:130U/ml一200U/ml[1个酶 活力单位定义(1PNPA单位)为;40C时,有过量的8葡萄糖苷酶存在下,每分钟从对-8硝基苯基-8麦 牙糖苷释放1mol对-硝基苯所需要的酶量]
判定标准 当酶的生产批次改变或更厂使用间隔超过6个月时,应按表A.1所列标准底物进行校准,以确保所 使用的酶达到预期的活性,不受其他酶的干扰
表A.1酶活性测定标准 测试活性酶的种类 预期回收率/% 标准底物 标准质量/ 玉米淀粉 a-淀粉酶十淀粉葡萄糖苷 1.0 小麦淀粉 1.0 a-淀粉酶淀粉葡萄糖苷酶 <！ 酪蛋白 0.3 蛋白酶 <1 95l00 8葡聚糖 0.l一0.2 -葡聚糖酶 柑橘果胶 果胶酶 0.10.2 95100 95~100 阿拉伯半乳聚糖 半纤维素前 0.l0.2
粮油检验谷物及其制品水溶性膳食纤维的测定酶重量法GB/T37492-2019介绍
一、定义
水溶性膳食纤维是指可溶于水的多糖和半纤维素类物质，具有调节肠道菌群、促进肠道蠕动、降低血脂、减少糖尿病等作用。粮油检验谷物及其制品水溶性膳食纤维的测定酶重量法GB/T37492-2019是国家标准，用于测定谷物及其制品中的水溶性膳食纤维含量。
二、特点
1. 测定方法采用酶重量法，准确度高、结果可靠。
2. 该标准适用于谷物及其制品的水溶性膳食纤维含量测定，包括小麦、玉米、大米等常见谷物，以及面粉、饼干、方便面等制品。
3. 测定过程简单，操作方便，能够快速得到样品中水溶性膳食纤维的含量。
三、应用范围
水溶性膳食纤维是一种重要的营养成分，对人体健康具有重要作用。该标准可以广泛应用于粮油检验、食品加工、医药等领域，为相关行业提供技术支持和质量保障。
四、总结
粮油检验谷物及其制品水溶性膳食纤维的测定酶重量法GB/T37492-2019是一项重要的检测标准，能够准确测定谷物及其制品中水溶性膳食纤维的含量。其特点在于准确度高、结果可靠，应用范围广泛，为相关行业提供了技术支持和质量保障。
