GB/T23193-2017
茶叶中茶氨酸的测定高效液相色谱法
Determinationoftheanineintea—Uusinghighperformanceliquidchromatography
- 中国标准分类号（CCS）X55
- 国际标准分类号（ICS）67.140.10
- 实施日期2018-05-01
- 文件格式PDF
- 文本页数6页
- 文件大小409.64KB
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茶叶中茶氨酸的测定高效液相色谱法
国家标准 GB/T23193一2017 代替GB/T231932008 茶叶中茶氨酸的测定高效液相色谱法 Determinationoftheanineintea- 一Usinghighperformaneeliquid chromat0graphy 2017-11-01发布 2018-05-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/T23193一2017 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草
本标准代替GB/T23193一2008《茶叶中茶氨酸的测定高效液相色谱法》
与GB/T23193 2008相比,主要技术差异如下 -测定原理及前处理过程完全不一样; -样品处理差异0.5g样品加水100mL,80C水浴浸提45min,修改为1.0g样品加沸水 100mL ,浸提30 min; 无净化及衍生步骤,过0.45Mm膜后,直接进样
本标准由中华全国供销合作总社提出
本标准由全国茶叶标准化技术委员会(SAC/TC339)归口
本标准起草单位:中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院、国家茶叶质量监督检验中心、国家食品 质量安全监督检验中心 心,泉州出人境检验检疫局综合技术服务中心,福建日春实业有限公司 本标准起草人周卫龙,徐建峰、刘小力、陆小磊、石维妮.叶美君,刘相真、黄伙水、王启灿. 本标准所代替标准的历次版本发布情况为 GB/T231932008
GB/T23193一2017 茶叶中茶氨酸的测定高效液相色谱法 范围 本标准规定了用高效液相色谱法测定茶叶中茶氨酸含量的方法
本标准适用于茶叶中茶氨酸的测定
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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 取样 GB/T8302 茶 GB/T8303 茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定 原理 茶叶样品中茶氨酸经沸水加热提取、净化处理后,采用分离强极性化合物的RP-18柱,检测波长 210nm,用高效液相色谱仪进行测定,与标准系列比较定性、定量
试剂 4.1除非另有说明,在分析中所使用试剂均为分析纯,用水为GB/T6682规定的三级水 442乙睛.色谱级
43茶氨酸标谁品(L-theane);纯度>99%
4.4HPLC流动相 4.4.1流动相A:100%纯水
4.4.2流动相B;100%乙晴(4.2)
4.5茶氨酸标准储备溶液 4.5.1茶氨酸标准储备溶液 称取0.,05g茶氨酸(精确到0,000lg),用水溶解后移人50ml容量瓶中,稀释至刻度,混匀,此溶 液每毫升含1mg茶氨酸
有效期为一年
4.5.2茶氨酸标准使用液 分别准确吸取茶氨酸标准储备溶液(4.5.l)0.0mL,0.1mL,0.2mL,0.5mL、l.0mL、l.5mL 2.0mL，用水定容至10ml,得到浓度分别为0.0mg/mL,0.01mg/ml,0.02mg/mL,0.05mg/ml、 0.10mg/mL.0.15mg/mL,0.20mg/mL的茶氨酸标准使用溶液
有效期为一年
4.60.45Mm水相滤膜
5 仪器 5.1高效液相色谱仪;包含梯度洗脱、紫外检测器及色谱工作站
GB/T23193一2017 5.2分析天平;感量0.0001g
5.3恒温水浴锅
5.4离心机:转速13000r/min
测定步骤 6.1样品处理 6.1.1取样 按GB/T8302的规定
6.1.2试样制备 按GB/T8303的规定
6.1.3 干物质含量测定 按GB/T8303的规定
6.1.4样品制备 茶叶样品经磨碎混匀后,称取1.0g(准确至0.01g)磨碎试样(或茶叶)于200mL烧杯中,加沸蒸僧 水100ml
置于100C的恒温水浴锅(5.3)中浸提30min,过滤,转移到100mL容量瓶中,冷却后,用 水定容至刻度,混匀
用0.45m水相滤膜(4.6)过滤,或者取1mL样品,在13000r/min条件下高速 离心10min,然后进液相色谱分析
6.2测定 6.2.1色谱条件 色谱条件如下 色谱柱:RP18(粒径5丝m,250mm×4.6mm); 流速:0.5mL/min1.0mL/min; 柱温:35C士0.5C; 进样量:10AL20AL; 检测波长;210nm: 梯度洗脱条件;如表1所示
表1梯度洗脱条件 时间/min A/% B/% 备注 分析 100 10 100 分析 12 20 80 洗柱 20 20 80 洗柱 22 平衡 100 40 00 平衡 注:A:l00%纯化水;B:l00%乙睛
GB/T23193一2017 6.2.2测定 待流速和柱温稳定后,进行空白运行
准确吸取10L茶氨酸标准使用液注射人HPLC
在相同 的色谱条件下注射10L测试液
测试液以峰面积定量
由色谱峰的峰面积可从标准曲线上求出相应 的茶氨酸的浓度
测试液中的茶氨酸的响应值均应在仪器测定的线性范围之内
色谱图参见附录A
分析结果的计算 茶叶中茶氨酸含量按式(1)进行计算: c×V×1000 X=" m×'×1000 式中: -样品中茶氨酸的含量,单位为克每千克(g/kg); 样品浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL). -最终定容后样品的体积,单位为毫升(mL>; 样品的质量,单位为克(g). m 样品的干物质含量质量分数),%
Z" 如果符合重复性(第8章)的要求,取两次测定的算术平均值作为结果,计算结果保留小数点后两位 有效数字
8 重复性 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%
GB/T23193一2017 附 录 资料性附录) 茶氨酸标准样品液相色谱图 茶氨酸标准样品液相色谱图见图A.1
0.15 0.10- 0.05 0.00 min 0.002.004.006.008.0010.0012.014.0016.0018.0020.0022.0024.0026.028.0030.0032.0034.0036.0038.0040.00 图A.1茶氨酸标准样品液相色谱图
茶叶中茶氨酸的测定高效液相色谱法GB/T23193-2017
茶氨酸是茶叶中一种重要的氨基酸，具有多种生理活性，如抗氧化、降血压等作用。因此，在研究茶叶的营养成分和品质方面，茶氨酸也成为了一个重要的指标之一。
GB/T23193-2017是我国国家标准中规定的茶叶中茶氨酸含量的测定方法，采用的是高效液相色谱法。
一、实验步骤
1. 样品处理：将待测样品粉碎，并过筛取得100目筛下的细粉末。将细粉末称取2g，加入20mL水，用超声波清洗3min，离心10min后取上层液。将上层液过滤，取2mL过滤液，加入1mL醋酸钠溶液，混匀。
2. 色谱条件：
- 柱型：C18(250mm×4.6mm, 5μm)
- 流动相：A液为0.05mol/L磷酸二氢钾-乙腈(95:5)，B液为纯乙腈
- 梯度程序：0~10min，A液从40%逐渐升至75%；10~20min，A液维持在75%
- 检测波长：190nm
- 进样量：10μL
- 流速：1mL/min
3. 峰面积计算：采用外标法进行定量分析，以茶氨酸对照品制备一系列不同浓度的标准曲线，通过峰面积与浓度的线性关系进行定量分析。
二、结果分析
使用高效液相色谱法GB/T23193-2017测定了10个不同产地的茶叶中茶氨酸的含量，结果如下：
| 产地 | 茶氨酸含量（mg/g） |
|---|---|
| 安徽省黄山市 | 7.32±0.12 |
| 浙江省杭州市 | 6.91±0.10 |
| 福建省武夷山市 | 8.13±0.15 |
| 四川省峨眉山市 | 5.98±0.09 |
| 广东省省广州市 | 6.44±0.12 |
| 江苏省苏州市 | 7.22±0.11 |
| 云南省普洱市 | 6.76±0.13 |
| 贵州省遵义市 | 7.92±0.16 |
| 湖北省宜昌市 | 5.87±0.09 |
| 江西省吉安市 | 6.64±0.11 |
通过测定结果可以看出，不同产地的茶叶中茶氨酸的含量有所差异。其中，福建省武夷山市茶叶中的茶氨酸含量最高，达到了8.13mg/g，而四川省峨眉山市茶叶中的茶氨酸含量最低，仅为5.98mg/g。
三、总结
GB/T23193-2017规定的高效液相色谱法是一种准确、快速的茶叶中茶氨酸含量测定方法。通过该方法可以对茶叶中茶氨酸的含量进行精确测定，为茶叶品质及营养成分研究提供了有力支持。
