饲料中单宁的测定分光光度法

饲料中单宁的测定分光光度法

国家标准 GB/T27985一2011 饲料中单宁的测定分光光度法 DeterminationoftannininfeedsSpectrophotommetry 2011-12-30发布 2012-06-01实施 国家质量监督检验检疫总局 发布 国家标准化管理委员会国家标准
GB/T27985一2011 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)提出并归口 本标准起草单位:上海市兽药饲料检测所 本标准主要起草人:商军、潘娟、黄士新、王蓓、曹莹、华贤辉、陆淳、蒋音
GB/T27985一2011 饲料中单宁的测定分光光度法 范围 本标准规定了饲料中单宁的分光光度测定方法 本标准适用于配合饲料、单一饲料中单宁含量的测定 本方法的检出限为17.5mg/kg,线性范围为0.50mg/L6.00mg/L 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 原理 用丙酬溶液提取饲料中单宁类化合物,经过滤后,取滤液加钨酸钠-磷钼酸混合溶液和碳酸钠溶液， 显色后,以试剂为空白对照,用分光光度计于760nm波长处测定吸光度值,用单宁酸作标准曲线测定 饲料中单宁含量 试剂和溶液 除非另有说明,本标准中所用试剂均为分析纯,水符合GB/T6682三级用水规定 4.1鸽酸钠(NaOW2H.O 4.2磷钼酸(HMoOPXH.O 4.3 鸽酸钠磷钥酸混合溶液,称取100.o《鸽酸纳(4.1),320.0长磷钥酸(4.2),帘于约750ml水中 移人1000mL回流瓶中,加人50mL磷酸,充分混匀,接上冷凝管,在沸水浴上加热回流2h,冷却,转 mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀,过滤,置棕色瓶中保存 室温下可保存14d. 人1000 无水碳酸钠(NaCO 4.4 45碳酸钠溶液(75g/L)称取37.5【无水碳酸钠(4.4)溶于250mL温水中,混匀,冷却,稀释至 500mL,过滤到储液瓶中备用 室温下可保存7d 4.6丙酮(CH,O) 丙酮溶液(1+1,体积比);分取等体积的水和丙酮(4.6),等体积混合,摇匀,即得 4.7 4.8单宁酸标准品(CHOm):含量>95.0% 4.9单宁酸标准储备液;称取单宁酸标准品(4.8)适量(精确到0.0001g),加适量水溶解,用水定容至 00ml摇匀,制成单宁酸质量浓度约为1mg/mL的标准储备液 在冰箱中4C可保存5d 4.10单宁酸标准使用液;精密量取单宁酸标准储备液(4.9)10.00ml,置200ml容量瓶中,用水定容 至200mL,摇匀 此溶液单宁酸质量浓度为50mg/L,用时现配
GB/27985一2011 仪器和设备 5.1紫外可见分光光度计;带10mm比色皿,可在760nm处测定 5.2电子天平;感量为0.1mg 5.3粉碎机 5.4振荡仪 5.5单标线吸管lmL,10mL.50mL.A级 5.6刻度吸管15ml 5.7容量瓶50mL,100mL,200mL..A级 5.8具塞三角瓶;250mL 5.9中速定量滤纸 试样制备 按GB/T14699.1采样,按GB/T20195制备试样,磨碎,通过0.45mm孔筛,混匀,装人密闭容器 中,避光低温保存备用 分析步骤 7.1试液的制备 称取试样1g一2g(精确至0.0001g),置于250mL具塞三角瓶(5.8)中,精密加人丙酮溶液(4.7 50.00ml,加塞密封,置振荡仪(5.4上振摇40min,静置,用中速定量滤纸(5.9)过滤,弃去初滤液,续 滤液供测定用 7.2测定 7.2.1标准曲线的绘制 精密量取单宁酸标准使用液(4.10)0.00mL,0.50mL,1.00mL,2.00mlL、3.00ml、4.00mL .00ml和6.00ml,分别置盛有约30mL水的50ml容量瓶中,摇匀,加鸽酸钠-磷钼酸混合溶液 4.3)2.5mL,加碳酸钠溶液(4.5)5.0mL,摇匀;分别用水定容至50mL,摇匀 单宁酸标准溶液浓度 分别为0.00mg/L,0.50 .1.0o .2.0o mg/L、3.00mg/L、4.00mg/L、5.00mg/L和 mg/L mg/L、 6.00mg/L,放置30min显色后,以标准曲线0.00mg/L.为空白,在760nm波长处测定标准溶液的吸 光度,以单宁酸浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线 7.2.2试样的测定 精密量取试液(7.l1.00ml,置盛有约30ml.水的50mL容量瓶中,摇匀;加钨酸钠-磷钼酸混合 溶液(4.3)2.5mL,加碳酸钠溶液(4.5)5.0mlL,摇匀;用水定容至50mL,摇匀 放置30min显色后， 以标准曲线0.00mg/儿为空白,在760nm波长处测定试样溶液的吸光度,根据标准曲线求出试液 (7.1)中单宁酸的浓度 如果吸光度值超过6.00mg/1，单宁酸的吸光度时,将试液(7.1)稀释后重新 测定
GB/T27985一2011 计算和结果的表述 计算公式 试样中单宁(以单宁酸计)的含量X,以质量分数表示,单位为毫克每千克(mg/kg),按式(1)计算 cxxDX000 X= m又100 式中: 试样测定液中单宁酸的浓度,单位为毫克每升(mg/L); 试样定容体积,单位毫升(mL); 试样稀释倍数 试样质量,单位为克(g). 8. 结果表示 2 测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留到小数点后一位 重复性 同一分析者对同一试样同时两次平行测定所得结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%

饲料中单宁的测定分光光度法GB/T27985-2011

一、什么是单宁？

单宁是鞣质的一种，广泛存在于植物体内。在饲料中，单宁含量高低会影响饲料的品质和动物的健康，因此需要对饲料中的单宁进行准确测定。

二、测定原理

GB/T27985-2011中规定，采用铁离子试剂与单宁反应生成蓝色络合物，经过分光光度计测定其吸光度值，通过计算得出单宁的含量。

三、实验操作步骤

1. 将饲料样品粉碎成细粉。
2. 取适量的饲料粉末，加入硫酸溶液，振荡20分钟。
3. 过滤，取上清液与铁离子试剂混合，静置15分钟。
4. 将混合液移至分光光度计中，测定吸光度值。
5. 按照公式计算单宁的含量。

四、实验注意事项

1. 操作时应注意安全，避免接触和吸入试剂。
2. 精确称量样品，保持实验条件一致。
3. 操作步骤必须按GB/T27985-2011的要求执行。

五、总结

分光光度法GB/T27985-2011是目前饲料中单宁测定的常用方法之一，具有快速、准确、简便等优点。在实际操作中，应注意操作细节，保证实验结果的准确性。

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