GB/T36858-2018
饲料中黄曲霉毒素B1的测定高效液相色谱法
DeterminationofaflatoxinB1infeeds—Highperformanceliquidchromatography
- 中国标准分类号（CCS）B46
- 国际标准分类号（ICS）65.120
- 实施日期2019-04-01
- 文件格式PDF
- 文本页数6页
- 文件大小424.15KB
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饲料中黄曲霉毒素B1的测定高效液相色谱法
国家标准 GB/T36858一2018 饲料中黄曲霉毒素B的测定 高效液相色谱法 DeterminationfaflatoxinBinfeeds一 Highperformaneeliquidchromatography 2018-09-17发布 2019-04-01实施 国家市场监督管理总局 发布 币国国家标准化管理委员会国家标准
GB/36858一2018 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)提出并归口
本标准起草单位:华中农业大学
本标准主要起草人:齐德生、张妮娅、张家才、孙铝辉、王峻、陶灿、王帅
GB/36858一2018 饲料中黄曲霉毒素B的测定 高效液相色谱法 一黄曲霉毒素B，是高致癌物质,应小心处理,分析操作过程应在通风橱内或指定区域内进 警示- 行
分析过程中,操作者应采取相应的防护措施
分析过程结束后,接触过的器皿及黄曲霉毒素B溶 液应使用浓度为5%的次氯酸钠溶液浸泡过夜
范围 本标准规定了测定饲料中黄曲霉毒素B的高效液相色谱法
本标准适用于饲料原料,配合饲料,浓缩饲料、精料补充料中黄曲霉毒素B的测定
本方法的检出限为0.54g/kg,定量限为2.04g/kg
规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
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GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 原理 试样中的黄曲霉毒素B经黄曲霉毒素B提取溶液提取后,再经三氧甲炕萃取、三氟乙酸衍生,行 生后的黄曲霉毒素B采用反相高效液相色谱-荧光检测器进行测定,外标法定量
试剂或材料 除非另有规定,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂
41水;符合GBT6682中规定的一级用水
4.2甲醉,色谱级
443 乙腊色谱级
4.4三氯甲烧 445 黄曲霉毒素B 提取溶液:量取84mL乙睛,加人到16ml水中,混匀
黄曲霉毒素B 4.6 衍生溶液;分别量取20ml三氟乙酸,加人70ml水中,混匀后加人10ml冰乙 酸,混匀
临用现配 4.7流动相:分别量取20ml甲醇、10ml乙睛和70ml水,混匀
经0.22Am有机滤膜过滤后备用 4.8黄曲霉毒索B标准储备溶液(1000g/ml);精确称取黄曲霉毒素B对照品(纯度>98%)10.0mg" 用10ml乙晴完全溶解,配制成黄曲霉毒素B含量为1000g/ml的标准储备溶液，一20C保存,有效 期为6个月
或有证标准溶液
GB/T36858一2018 4.9黄曲霉毒素B标准工作溶液;取1.0ml黄曲霉毒素B标准储备溶液,用乙睛定容至100mL,浓 度为104g/mlL
再取此稀释液1.0mlL,用乙晴定容至100mL,则浓度稀释为l00ng/mL的标准工作 溶液
4.10黄曲霉毒素B标准系列溶液;将黄曲霉毒素B标准工作溶液用乙睛分别稀释成1ng/m、 2ng/ml,5ng/ml,10ng/ml、20ng/ml,50ng/mL、,100ng/mL的标准系列溶液
临用现配
4.11有机滤膜;直径50mm,孔径0.224m 4.12针头式过谴器;有机型,孔径0.224m. 4.13乙腊水溶液(90十10);量取90mL乙睛,加人到10mlL水中,混匀
5 仪器设备 5.1 高效液相色请仪:配备荧光检测器 5.2分析天平:感量为0.01mg
5.3溶剂过滤器;规格1000mL 5.4氮吹仪
5.5恒温振荡器
5.6旋涡混合仪
5.7超声波清洗仪 5.8水浴锅
6 样品 按GB/T14699.1规定采集有代表性的试样,按照GB/T20195规定将试样粉碎,过0,.42mm分析 筛,混匀后装人密闭容器中,备用
试验步骤 7.1试样处理 平行做两份试验
称取5.00g(精确到0.01g)试样置于100ml带塞锥形瓶中,加人25.0ml
黄曲 霉毒素B提取溶液(4.5),室温下200r/min振荡提取60min,用中速滤纸过滤,取10.0ml滤液于 三叙甲桃(.4)翠取,旋涡混合1min,静置分层后,取下层拳取液 50ml具塞离心管中,加人10,0ml 于15mL具塞离心管中,0C水浴孤气吹干
加人30AL乙肺水解液(A.13)复游,然后加人700儿l 黄曲霉毒素B衍生溶液(4.6),加塞混匀,40下恒温水浴衍生反应75min后,经0.22m微孔滤膜过 滤后,待测
7.2标准系列 分别取0.9mL黄曲霉毒素B标准系列溶液(4.10)于7个10mL具塞离心管中,50C水浴氮气吹 干,用200L乙睛水溶液(4.13)复溶,然后加700L黄曲霉毒素B衍生溶液(4.6),加塞混匀,40C下 恒温水浴行生反应75min,再经0.22m微孔滤膜过滤后,待测
7.3高效液相色谱参考条件 色谱柱;C色谱柱,长250mm,内径4.6mm,粒径5wm;或性能相当者
GB/36858一2018 流动相(4.7)
流速lmL/mim. 激发波长:365nm;发射波长:440nm.
柱温:30C 进样体积;20AL
7.4测定 在上述液相色谱参考条件下,将衍生后的黄曲霉毒素B标准系列溶液,试样溶液注人高效液相色 谱仪,测定相应的响应值(峰面积),采用单点或多点校正,外标法定量
黄曲霉毒素B标准溶液色谱图 参见附录A
试验数据处理 试样中黄曲霉毒素B的含量以质量分数w表示,单位为微克每千克(4g/kg),按式(1)计算 0.9×p×V m×V
式中 试样衍生液在标准曲线上对应的黄曲霉毒素B含量,单位为纳克每毫升(ng/mL); V 提取液的总体积,单位为毫升(mL):; V. -用于萃取的提取液体积,单位为毫升mL) 试样的质量,单位为克(g): m 0.9 衍生后的试样溶液体积,单位为毫升(mL) 以两个平行样品测定结果的算术平均值报告结果，结果保留至小数点后一位
精密度 在重复性条件下,两次独立测定结果与其算术平均值的绝对差值,不大于该平均值的20%
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饲料中黄曲霉毒素B1的测定高效液相色谱法GB/T36858-2018
饲料是畜禽养殖过程中必不可少的一种物质，但是由于储存条件不当、原材料污染等因素会导致饲料中出现各种有害物质，例如黄曲霉毒素B1。
黄曲霉毒素B1是一种常见的真菌代谢产物，在饲料加工过程中很容易被检测到。而它对畜禽的生长发育和健康都会造成严重危害，因此对饲料中黄曲霉毒素B1的测定显得尤为重要。
目前，测定饲料中黄曲霉毒素B1的方法有很多种，其中高效液相色谱法GB/T36858-2018是一种被广泛采用的方法。该方法具有灵敏度高、准确度高、可重复性好等优点，能够有效地检测出饲料中微量的黄曲霉毒素B1。
高效液相色谱法GB/T36858-2018的操作过程比较简单，主要包括样品提取、洗脱、柱分离和检测等步骤。其中样品提取是最核心的步骤之一，常用的提取方法有乙腈提取法、甲醇水提取法等。在样品提取过程中需要注意对样品的保护，避免因为操作不当而对样品造成污染。
总之，采用高效液相色谱法GB/T36858-2018标准进行饲料中黄曲霉毒素B1的测定能够有效地保障畜禽的生长发育和健康，对于农业生产具有重要意义。
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