花曲柳窄吉丁检疫鉴定方法

花曲柳窄吉丁检疫鉴定方法

国家标准 GB/T40751一2021 花曲柳窄吉丁检疫鉴定方法 DetectionamdidentifieationofAgrilusplanipennisFairaire 2021-10-11发布 2022-05-01实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标涯花管理委员会国家标准
GB/40751一2021 前 言 本文件按照GB/T1.1一2020<标准化工作导则第1部分;标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 本文件由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口 本文件起草单位;浙江省检验检疫科学技术研究院、杭州海关、海 口海关、佛山海关综合技术中心、计量大学 本文件主要起草人:吴志毅、陈鹏程、蔡波、季宏铁、李凯兵田红伟、张蓬军、黄凌哲、任琐、方文渊、 程帆、吴颖
GB/40751一2021 花曲柳窄吉丁检疫鉴定方法 范围 本文件描述了花曲柳窄吉丁AgrilwsplanipennisFairmaire)的检疫鉴定方法 本文件适用于花曲柳窄吉丁的检疫和鉴定 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 3.1 盘区dise;diseus 前胸背板中域或鞘翅表面具平圆的部分或区域 3.2 前胸腹前叶prosternallobe;mentonniere 前胸腹板前缘向外突出的部分 注，前胸腹前叶狭窄至较宽大,有时缺失 3.3 隆线carina;cearinae 隆脊 昆虫体壁表面突起或隆起呈线状的结构 3,4 肩前隆脊prehumeruscarina;prelateralearina 前胸背板两侧后角处沿侧缘向背板前方两侧延伸的线状突起或隆起结构 3.5 绒毛pubescence 在前胸背板和鞘翅表面一些部位着生较短的软毛 注:绒毛可形成各种不同形状和颜色的斑纹 3.6 臀板pgidium 昆虫的末节背板 注吉丁科昆虫的臀板一般是指第7背板,其端部有时延伸出端突或端刺 花曲柳窄吉丁分类基本信息 中文名:花曲柳窄吉丁
GB/T40751一202 中文曾用名;白蜡窄吉丁,岑小吉丁 学名Aerilwsami/pemi、Fairmaire,1888 异名Awrilumaropoiohenlerger,l930;Awrlwsfrriwohenlerger,l938;Awrin ausul1i Kurosawa,1956. 英文名:Emeraldashborer,简称为EAB 分类地位;鞘翅目Coleoptera,吉丁虫科Buprestidae,窄吉丁亚科(又称瘦吉丁亚科)Agrilinae,窄吉 丁族Agrilini,窄吉丁属AgrilusCurtis 窄吉丁属世界已知3000多种,花曲柳窄青丁归属于该属的栎扁头吉丁种组,其近似种主要为栎扁 头吉丁AgriluscyaneonigerSaunders等 花曲柳窄吉丁的地理分布、寄主,生物学等其他基本信息见附录A S 方法原理 花曲柳窄吉丁的危害、生物学特性和传播方式是确定现场检疫方式的主要依据,成虫外部形态学特 征是种类鉴定的主要依据,用体视显微镜进行观察,根据外部形态特征对种类进行判定 利用成虫外部 形态特征判定其种类仍有疑问时,需进一步解剖雄虫外生殖器,用体视显微镜观察,根据雄外生殖器形 态特征对种类进行进一步鉴定 器材和试剂 o 6.1器材 体视显微镜、放大镜、培养箱、刀,斧头,凿子、螺丝刀,剪刀、子、小毛刷小毛笔、指形管、样品袋、 培养皿、养虫盒、昆虫针、标签纸、三级台等采集和标本制作器材 6.2试剂 无水乙醇、蒸僧水、乙醇-甘油保存液(100ml.75%乙醇,加人0.5ml1mL甘油 检疫与培养 7.1现场检疫 根据花曲柳窄吉丁的为害状,详细检查进出境白蜡属、核桃属、枫杨属,榆属等寄主材料,包括苗木、 原木、,板材,木质包装及其产品 对来自疫区的进出境寄主植物,实施重点检疫 检疫查验时首先关注 运输工具、木材或木材制品表面是否有窄吉丁属成虫,其次借助放大镜仔细查看种苗,原木等木材表面 是否有该虫为害虫孔、蛀屑、大的树皮缝隙、,D形羽化孔或s形蛀道等为害状(见图A.1、图A.2) 发现 可疑裂痕、蛙屑或虫孔时,可用刀、斧头、凿子、螺丝刀等工具进行剖检,查看是否有成虫、幼虫、蛹或卵 将检查获得的幼虫通常连同寄主植物一起放人样品袋,成虫老熟幼虫、蛹可用小毛笔(或小毛刷)轻挑 人或用毁子轻夹人指形管,每个指形管内放一头虫子,做好虫样的标识与记录,送至实验室 7.2培养 将木材上发现的幼虫或蛹连同寄主植物一起放人养虫盒,老熟幼虫、蛹也可单独放人盛有已消毒湿 细沙的培养皿;将养虫盒、培养皿置于培养箱内,在温度范围25C士2C、相对湿度分别为65%75% 幼虫)和60%一70%(蛹)的条件下,将幼虫、蛹培养至成虫
GB/40751一2021 标本的制备 成虫经清洁处理后制作成针插标本 将特制的小三角纸插在昆虫针上,通过三级台固定高度,然后 将成虫粘在小三角纸上 雄虫可进一步解剖出外生殖器,雄外生殖器可粘贴在纸片上,附在标本下方， 也可保存在甘油中,附在标本下方 已死亡或不需培养的幼虫、蛹,经清洁处理后浸人乙醇-甘油保存 液,制成浸制标本 实验室鉴定 g.1镜检 将标本置于体视显微镜下观察,按照亚科、属、种的相应特征进行种类鉴定 窄吉丁亚科的主要特征 体小至中型,长形,长卵形,近圆筒形或近三角形;头与前胸背板前缘等宽,部分类群头明显宽于前 胸背板;头顶平或在复眼间强烈突出,具或不具中纵凹;额平或具瘤突;额唇基沟位于两触角窝之间,窄; 触角窝间的距离等于或小于复眼间距离的一半;复眼大,椭圆形,平行或倾斜排列,部分类群复眼呈角状 突出;触角短，一般不超过前胸背板后缘;前胸背板盘区均匀隆突或不平,具大小和数目不等的瘤突;前 缘弓突或强烈弓突,后缘双曲状,中叶向后突出;鞘翅盘区平,翅端圆或具刺;前胸腹板平或侧缘隆突,具 发达的前胸腹前叶,单叶状或双叶状,部分种类腹前叶狭窄;前背折缘具或不具触角沟;足细长,部分种 类腿节和胫节膨大,有接收胫节或附节的沟;还有部分类群只有胫节膨阔,背面具附节沟;有时,胫节基 部强烈弯曲;第1附节一第4咐节具附垫,爪附齿式,部分类群单齿式,且不对称 9.3窄吉丁属的鉴别特征 体狭窄线型,背部较平,腹板略隆突,有时近圆柱状 多数种类体长小于10; mm， 少数种类可达到 15 nmm 复眼大,几乎与前胸背板前缘相接触;触角窝大且离复眼较远 前背折缘具边缘下脊;背板两 侧通常具肩前隆脊,背板后缘双曲状,中叶向后突出 小盾片常具横脊 前胸腹前叶发达 鞘翅端部呈 弧形、近截形较尖至具刺突等 前,中足基节常呈球状,后足基节横阔且略凹;后足咐节较长,第1附节 常明显长于第2附节和第3附节之和 幼虫前胸背板膨大不显著,其腹部远端扩张,第5节一第7节呈 钟形 寄主为双子叶植物 g.4栎扁头吉丁种组的鉴别特征 中型种类,体长一般大于10mm,前胸背板纵向凹陷,深,边缘脊和边缘下脊汇合,小盾片小,横脊 不明显,鞘翅光滑,端部偶尔具绒毛斑,翅端圆,彼此不相接,臀板向后延伸出钝刺或长刺 9.5花曲柳窄吉丁的鉴别特征 g.5.1成虫 mm3.4mm， 成虫狭长、楔形.较粗壮;体长12mm15mm,宽3.1 -般雌虫比雄虫长 体色有 变化,通常为铜绿色,有时为墨绿色、蓝绿色,紫绿色至近黑色,具金属光泽 头扁平,头顶具中纵凹 复眼大,肾形,青铜色,占头部近1/3 触角第1节第3节圆柱状,第4 节起呈锯齿状,触角窝位于头部前端的复眼内侧 前胸背板横阔,宽约为长的1.6倍,基部最宽,肩前隆脊短,不超过前胸背板中部,呈瘤状凸起 鞘
GB/T40751一202 翅长约为宽的3.1倍,基部最宽,前缘与前胸背板基部近等宽,翅端圆,彼此不相接,侧缘近端部具细齿， 鞘翅不完全覆盖腹部背板,鞘翅表面密布刻点 雄虫胸部腹面及足腿节内侧密布银白色长皱毛,中足的腿节最为明显,而雌虫相应部位的绒毛短 而稀 腹部青铜色,背板红色或暗红色,臀板中部具纵脊,纵脊向后延伸呈一端刺 成虫形态特征图见附录B中的图B.1和图B.2 雄虫外生殖器见图B.3 9.5.2 卵 卵初产时为乳白色至淡黄色,逐渐变为黄色至棕褐色 扁圆形至不规则椭圆形,表面粗糙不平,长 径约1.2mm,窄径约0.9mmm 见图B.4 9.5.3幼虫 mm32mm 幼虫通常四龄,体扁平,半透明淡褐色至乳白色,老熟幼虫体长26n 头小,大部分缩 进前胸,仅露黑褐色口器 前胸膨大,中后胸较狭,前胸背板的中纵线深褐色,呈倒“Y”形 腹部10节 以第了腹节最宽,中胸及第1腹节一第8腹节各有1对气孔,末节有1对褐色锯齿状尾突 见图B.5 9.5.4捅 蛹萎形,长11mm16mm,宽3mm~5mm 初化蛹时为乳白色,化蛹后10d左右首先由复眼开 始变黑色,羽化前变为蓝绿色,具金属光泽 见图B.6 9.6花曲柳窄吉丁与近似种的区别 花曲柳窄吉丁与A.cyaneonigersaunders等主要近似种的成虫检索表,见附录C 10结果判定 以成虫形态特征为主要鉴定依据,以卵、幼虫和蛹的形态特征为鉴定的参考依据 成虫形态特征符 合9.5.1时,可判定为花曲柳窄吉丁 1 标本保存 成虫针插标本经风干或烘干)定型,插人标本盒;幼虫、蛹用乙醇-甘油保存液保存 各标本需附上 时间、地点、寄主、寄主来源,采集人等基本采集信息标签,将标本放置于具防潮、防虫蛙且可避免阳光直 射的标本室或标本柜保存 鉴定后的标本建议永久保存，一般保存期不少于6个月
GB/40751一2021 附 录 A 资料性) 花曲柳窄吉丁其他基本信息 A.1地理分布 主要分布于东亚、北亚国家和地区,包括、日本,韩国、蒙古、俄罗斯远东地区,东南亚的老挝也 有分布记录;近年该虫已传人北美的美国和加拿大,俄罗斯的莫斯科地区 在国内分布于北京,天津、河 北、内蒙古、辽宁、吉林、黑龙江、山东、四川等 A.2寄主植物 主要寄主为害木犀科Oleaceae的白蜡属Frarinu、树木,包括美国花曲柳F.americana,白蜡 F.chinensis、花曲柳大叶白蜡)F,.chinensisssp.rhynchohyla、欧洲白蜡F.ercelsior、水曲柳F nmandshurica、黑白蜡F.nigra、美洲红楞F.bennsylanica、洋白蜡F.ennsyleanicavar.subintegerri ,四棱白蜡F.guadrangulata、毡毛楞(杜氏毡毛楞、绒毛白蜡)F.velatin等 其他寄主植物有胡桃 ma 科Juglandaceae胡桃属的胡桃橄变种Juglansmandshuricavar.sie ieboldia,枫杨属Pterocary的水 核桃尸.,rhoifolia;愉科Ulmaceae愉属Ulms的春榆U.dauidiana var.jaonica,粘榆U.,propinqua 等 树种 A.3危害与主要生物学特性 花曲柳窄吉丁为典型的钻蛙性害虫,除成虫外,其他虫态都在树干内度过,其幼虫在树木的韧皮部、 形成层和木质部浅层蛙食为害,致使枝叶变黄,树冠稀疏 D形羽化孔(见图A.l),经常有很多萌条产 生于死亡与活组织的中间,在树木死亡后也经常有萌条产生在树木根部,形成徒长,徒长枝到晚夏会过 早成熟变为褐色 由于树木的愈伤组织对幼虫危害发生反应,导致树干上常出现5 cm~10cm长的竖 向裂缝,木质部与韧皮部中间有虫粪填实的坑道,即s形蛙道(见图A.2) 在活树上,有时围绕幼虫坑 道常出现椭圆脱色区域 花曲柳窄吉丁1年1代,个别情况下2年1代 在或美国的部分疫区,花 ,终止于9月 温度高于25C晴朗天气 曲柳窄吉丁羽化一般开始于4月一5月,高峰期在6月一7月， 成虫活动频繁,与之相反,在夜晚、低温或阴雨环境中,成虫不活跃 在实验环境下,雄性成虫平均生存 期限为7周,雕性成虫平均期限为9周 花曲柳窄吉丁成虫具有较强的飞行能力,其一次飞行可达 m一12m,在条件允许的情况下,其可以多次飞行迁徙1km. 8 A.4传播途径 花曲柳窄吉丁的幼虫、成虫等各虫态均能随寄主植物及其产品(种苗、.原木.板材,木质包装、柴火及 新加工成的家具等)运输做远距离传播
GB/T40751一2021 图A.1D形羽化孔及成虫(http:;//www,thedenvertreeservices,com) 图A.2s形蛙道(htps://www.lorestryimages.orp)
GB/40751一2021 附录 B 资料性) 花曲柳窄吉丁形态特征图 花曲柳窄吉丁形态特征图见图B.1一图B.6 b) 侧面观 背面观 腹面观 a 图B.1成虫标本 Agrilsmaropli b)A.feretrins a c A.ulni 图B.2成虫模式标本(引自Jendek,2011
GB/T40751?2021 ?B.3?? ?B.4 Jendek&.Grebennikov,2011y http://www.technogreen.it/agrilus-planipennis,html ?B.5? ?B.6?(http;//www.exotiepests.gc.ca) http;//www.teechmogreenit/agrilusplanipennis.htnmlD)
GB/40751一2021 附录 C 资料性 花曲柳窄吉丁主要近似种成虫检索表 .小盾片小,中部不具横脊,盘区凹陷 小盾片中到大型,中部具横脊,盘区平或隆突 2.小盾片中部横脊后突出的三角形部分等于或短于小盾片长度;鞘翅侧缘端部1/3向翅端逐渐收窄 翅端不具刺;腹板和(或)侧腹板不具明亮的金色绒毛 小盾片中部横脊后的突出的三角形部分大,近等于或大于小盾片长度;鞘翅侧缘端部1/3向翅端急 剧收窄,翅端具刺或不具刺;腹板和(或)侧腹板通常具明亮金色绒毛 3 体大而粗壮,复眼大,额中部纵向深凹;边缘脊和边缘下脊汇合,汇合点明显;肩前隆脊基部G end)与前胸背板后角连接 体大型,复眼中至大型;头和前胸背板红色至红铜色,具金属光泽;额中部纵向浅至中等凹 边缘下脊近平行,不汇合;肩前隆脊基部与前胸背板后缘连接 5Agrilussinensisgrou 体紫色具金属光泽;前胸背板、鞘翅基部和端部具不规则白色绒毛或绒毛斑,胸部腹板和侧腹板具 4. 白色绒毛,阳茎侧面膨大 AgrilusheweitiKerreman 体蓝色,向翅端过渡为紫色,具金属光泽;鞘翅基部1/4,小盾片后沿翅缝具狭窄的白色绒毛斑,腹面 和侧腹板具白色绒毛,阳茎基侧面略膨大,中茎宽,端部突出 AgrilusdaillieriBaudon 5.前胸背板前叶强烈突出,近角状(几乎为三角状);鞘翅黑色,阳茎中等大小,中茎端部突出 Agrilu4s Obenberger 前胸背板前叶略突出,圆拱形,鞘翅蓝绿色或黑色,阳茎粗壮,背面扩展,中茎端部凹陷 6. 鞘翅蓝绿色 Agrilussiensissplenclidlicolli 鞘翅黑色 Agrilussinnesis e 17 复眼不突出;腹部腹面具明亮金色绒毛 Agrilus 复眼明显突出;腹部腹面光滑或被绒毛斑 腹部腹面完全或部分被金色绒毛,体色多样 8. 腹板腹面光滑,无金色绒毛,体蓝色,具金属光泽 AgrilussaphirinusJendek hamOrr 9 侧腹板完全被金色绒毛覆盖 侧腹板部分具金色绒毛斑 10 额红色,前胸背板和鞘翅基部绿色,向端部过渡为蓝色;前胸背板侧缘较直;小盾片黑色;第3腹板 + 两侧具金色绒毛 AgrilusseramensisJendek&.Chamorro 体背面不具三种颜色;前胸背板侧缘弓形;小盾片不完全黑色;第3腹板两侧光滑,无金色绒毛 1.前胸背板盘区绿色,具金属光泽;小盾片中部纵脊后突出部分平 Agriluscupri/frosDeyrole 前胸背板红色或橙红色,具金属光泽;小盾片中部纵脊后突出部分凹陷 12 12 鞘翅绿色具金属光泽;体小型至中型(约7mm);腹部单色 AgrilusmcgregoriFisher 鞘翅黑色,翅端具紫色光泽;体中型;腹部基部绿色,端部紫色 Agril4s4scaniusDeyrole 13.体中型;翅端具1个大刺 l4 Agriluuszalidu、Deyrolle 体小至中型(约7mm);翅端不具刺,近肩凹陷处具金色绒毛 4.鞘翅具绒毛斑(毛斑不易脱落 鞘翅不具毛斑
GB/T40751一202 15 每鞘翅中部和端部1/4各具1对圆形毛斑;前胸背板两侧不具金色绒毛 errema1 Agrilusuirialissim4s 每鞘翅具1个或1对圆形毛斑,前胸背板两侧具金色毛斑 erreman Agrilu4sopulent4S 16 前胸背板盘区绿色,具金属光泽;鞘翅蓝色;侧腹板中部金色毛斑小,不向前延伸 Agriluswoodlarkianu、Kerremans 前胸背板盘区橙红色,具金属光泽;鞘翅黑色,向翅端过渡为紫色;侧腹板中部金色毛斑大,向前延 AgrilusmacuuliventrisDeyrolle 伸至狭窄部 17 前胸背板盘区紫红色,具金属光泽 前胸背板颜色多样;铜色,橄榄绿色(带蓝色或金色)或黑色 18 鞘翅和前胸背板颜色不同,基部黑色,端部过渡为黄绿色;前胸背板侧缘弓形 Agrrilu.silie71trisS 鞘翅和前胸背板同色,均为紫红色;前胸背板侧缘较直 grilsostr1Ss 19，体小至中型(小于9mm); 20 ;复眼隆突,略超过头部轮廓;前胸背板不具绒毛或两侧中部具绒毛 体中型(大于10mm);复眼不隆突,不超过头部轮廓;前胸背板被绒毛 20全体铜色,具金属光泽;前胸背板侧缘略弓形;鞘翅基部和端部沿翅缝具金色绒毛 Agriluspseudoostrin4sJendek 体背橄榄绿色,带蓝色,腹面绿色,具金属光泽;前胸背板侧缘弓形;鞘翅具散生短绒毛 Agrilusspine4sJendek hamorrO 21体黑色,鞘翅基部和端部具金色绒毛斑 Agrilusampliat4sKerremans 背面橄榄绿色,有金属光泽,鞘翅近肩脚凹陷处具金色毛斑,端部近1/4,沿鞘翅缝具1对绒毛斑 AgrilusmnaculipenisKerremans 22.腹部腹板具明亮的金色绒毛,有时延伸到侧腹板上 23 腹部腹板光滑,不具金色绒毛 29 23.体背通常紫红色;腹板完全被金色绒毛覆盖;前胸背板横向,鞘翅基部与前胸背板后缘等宽(前胸背 板两侧不明显弓形 AgriluscrepuscularisJendek&.Chamor0 体背通常黑色或蓝色;腹板两侧具金色绒毛;鞘翅基部明显宽于前胸背板后缘(前胸背板两侧弓形 至明显弓形 24 24.体背黑色或深蓝色;鞘翅不具金色绒毛斑 25 体背颜色多样,蓝色、紫罗兰色或黑色;如黑色,鞘翅具4个金色绒毛斑 27 25 额具明显的中纵凹;复眼隆突,超出头部轮廓;前胸背板两侧具或不具金色绒毛斑 26 额中纵凹不明显;复眼不超出头部轮廓;前胸背板两侧具白色绒毛斑;apexofphalluscuspidate AgriluslaferteiKerremans 26 前胸背板两侧具金色毛斑 AgrilusginlingJendek 前胸背板两侧具白色毛斑 AgrilusagatusKerremans 27 额平,不超过头部轮廓或复眼前缘);鞘翅不具金色毛斑,端部具或不具白色绒毛 28 额隆突,明显超过头部轮(或复眼前缘);鞘翅具4个金色毛斑(每鞘翅各2个),端部沿翅缝具白 色绒毛斑 Agrilusbi/foveolalusKerremans 28.体蓝色,具金属光泽;前胸背板两侧光滑,不具明亮金色绒毛,肩前隆脊线状;鞘翅近端部沿翅缝具 白色绒毛斑 AgrilusauristernumObenberger 体黑色;雌虫前胸背板两侧具明亮金色绒毛斑,无肩前隆脊;鞘翅光滑,近端部不具毛斑 rro&.Jendek ;Chamor Agrilusrubensteini 29.体纤细(鞘翅与前胸背板长度比大于4.51);雄虫体蓝绿色至铜色,雌虫有时为紫罗兰色;前胸背 30 板边缘脊不伸达前角;雌虫前胸背板具金色绒毛 10
GB/40751?2021 ?(???峤?С4:1);???;????;? 31 ?,??? 30??,????,?,о?, ????? AgriluslubopetriJendek ??,?С???,?,о?,??? eudlolubopetriJendek Chamorrd ??? Agrilu4spse 31??,????;??,??;??? ???;???,???;??? Agridas cya7ne071geSaunderS #*# Agrlws tomentipenniJendek&.Chamorro 2.??1???? AgriluslanipenniFairmaire ??,?
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花曲柳窄吉丁检疫鉴定方法GB/T40751-2021

花曲柳窄吉丁是一种常见的植物病原体，对多种农作物造成危害。因此，对其进行检疫鉴定非常重要。

GB/T40751-2021花曲柳窄吉丁检疫鉴定方法包括样品采集、样品处理、PCR扩增、电泳分析等步骤。

首先，进行样品采集。在检疫过程中，可根据实际情况选择不同的采集方式，如采用手工方法、纸袋法或直接采摘法等。

然后，进行样品处理。将采集的样品进行分离、清洗和加工，以保证样品完整性和干燥度。

接下来，进行PCR扩增。使用特定的引物和PCR反应体系，对样品进行DNA扩增。

最后，进行电泳分析。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离PCR产物，观察条带出现情况，判断是否存在花曲柳窄吉丁。

GB/T40751-2021标准的实施，能够提高检疫鉴定的准确性和可靠性，保障农产品安全和市场秩序。

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2022/7/10 2:06:47 即将实施