GB/T30935-2014
化妆品中8-甲氧基补骨脂素等8种禁用呋喃香豆素的测定高效液相色谱法
Determinationof8furocoumarinesincluding8-methoxypsoralenincosmetics―Highperformanceliquidchromatography
- 中国标准分类号（CCS）Y42
- 国际标准分类号（ICS）71.100.70
- 实施日期2014-11-01
- 文件格式PDF
- 文本页数12页
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化妆品中8-甲氧基补骨脂素等8种禁用呋喃香豆素的测定高效液相色谱法
国家标准 GB/T30935一2014 化妆品中8-甲氧基补骨脂素等 8种禁用味喃香豆素的测定 高效液相色谱法 Determinationof8furoeoumarinesineluding8-methoxypsoralenincosmeties Highperformanceliquidchromatography 2014-07-08发布 2014-11-01实施 国家质量监督检监检疫总局 发布 国家标准花管理委员会国家标准
GB/T30935一2014 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草
本标准由轻工业联合会提出
本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口
本标淮起草单位;检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所 本标淮主要起草人马强,王超、马会娟、李文涛、白桦,孟宪双、陈云霞、沈敏、钱茵
GB/T30935一2014 引 言 本标准的被测物质是我国《化妆品卫生规范》规定的禁用物质,不得作为化妆品生产原料即组分添 加到化妆品中
如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带人化妆品时,则化妆品成品应符合化妆品卫 生规范》对化妆品的一般要求,即在正常及合理的可预见的使用条件下,不得对人体健康产生危害
目前我国尚未规定这些物质的限量值,本标准的制定,仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法
GB/T30935一2014 化妆品中8-甲氧基补骨脂素等 8种禁用喃香豆素的测定 高效液相色谱法 范围 本标准规定了化妆品中8-甲氧基补骨脂素等8种禁用味喃香豆素的高效液相色谐测定方法
本标淮适用于膏霜、散粉,蜡基,水剂和香波类化妆品中8甲氧基补骨脂素等8种禁用吠喃香豆素 的测定
本标准的检出限和定量限:8-胫基补骨脂素的检出限为0.1mg/kg,定量限为0.25mg/kg;补骨脂 素,异补骨脂素,8-甲氧基补骨脂素、5-甲氧基补骨脂素、三甲沙林,欧前胡素、异欧前胡素的检出限为 0.2 mg/kg，定量限为0.5mg/kg 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
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(GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 原理 试样经溶剂提取,微孔滤膜过滤后,用高效液相色谱测定,外标法定量
试剂和材料 除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水
甲醇:色谱纯
4.1 4.2乙睛;色谱纯
4.3无水乙醇
4.4四氢吠喃
4.550%乙醇水溶液;量取50mL无水乙醇和50mL水,混匀 4.650%甲醇水溶液;量取50mL甲醇和50mL.水,混匀
4.750%乙睛水溶液;量取50ml乙腊和50ml.水,混匀
4.8标准品;8-甲氧基补骨脂素等8种禁用吠喃香豆素标准品中文名称、,英文名称,cAs号、分子式、结 构式和相对分子质量参见附录A表A.l,纯度不小于95%
8种禁用肤喃香豆素的标准储备液.准确称取每种味喃香豆素标准品(4.8)各10mg,精确至 4.9 分别置于10mL容量瓶中,用乙睛(4.2)溶解并定容至刻度摇匀,配制成浓度分别为 0.1 mg， 4g/mL的标准储备液,于4C保存,可使用3个月 1000 4.108种禁用吠喃香豆素的混合标准储备液分别准确移取8种禁用吠喃香豆素标准储备液各1mL
GB/T30935一2014 于10mL容量瓶中,用乙睛(4.2)稀释至刻度,该溶液中8种禁用峡喃香豆素的浓度均为1004g/mL 仪器和设备 5.1高效液相色谱(HPLC)仪:配有二极管阵列检测器
5.2液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)仪:配有电喷雾离子源(ESI) 5.3分析天平:感量为0.0001g和0.001g 5.4离心机转速不低于5000r/ /min 5.5超声波水浴
5.6涡旋混合器
5.7具塞徘形瓶50mL
5.8具塞塑料离心管;10ml 5.9微孔滤膜:0.45m,有机相
分析步骤 6.1样品处理 6.1.1膏霜类样品 称取1g(精确至0.0o1g)试样于50ml具塞锥形瓶(5.7)中,加人10mlL50%乙醇水溶液(4.5),涡 旋混合后超声提取30n min
取部分溶液转移至10ml具塞塑料离心管(5.8)中,以5000r/nin离心 10min， 上清液经0.454m微孔滤膜(5.9)过滤,供高效液相色谱测定 6.1.2水剂类样品 称取lg(精确至0.001E)试样于50mL具塞锥形瓶(5.7)中,加人10mL无水乙醇(4.3),涡旋混合 后超声提取30min
以下步骤同6.1.1
6.1.3香波类样品 称取1g(精确至0.001g)试样于50mL具塞锥形瓶(5.7)中,加人10mL50%甲醇水溶液(4.6),涡 旋混合后超声提取30 以下步骤同6.1.1
min
6.1.4蜡基类样品 称取1g(精确至0.001g)试样于50ml具塞锥形瓶(5.7)中,加人2ml四氢吠喃(4.4),涡旋混合 后再加人8ml50%乙醉水溶液(4.5),超声提取30 以下步骤同6.1.1 min
6.1.5散粉类样品 称取lg(精确至0.0o1g)试样于50ml具塞锥形瓶(5.7)中,加人10ml50%乙睛水溶液(4.7),涡 旋混合后超声提取30 以下步骤同6.1.1
min
6.2测定条件 高效液相色谱测定参考条件如下 a 色谱柱;ZORBAXSBPhenyl,5Am,250mm×4.6mm(内径),或相当者 b流动相:见表1;
GB/T30935一2014 流迷,1.0mL/" min; d柱温;30; e 检测波长;2501 nm f 进样量:10AL
表1流动相 步骤 时间/minm 甲醉/% 乙精/"% 水/% 55 22 23 0.00 12.50 55 22 23 32 14.00 37 31 21.00 36 32 32 22.00 50 50 55 22 23 25,00 6.3标准曲线的绘制 用乙睛(4.2)将混合标准储备液逐级稀释得到浓度为0.0254g/mL,0.054g/mL,0.14g/mL、 0.54g/mL、1.04g/mL2.54g/mL、54g/m的混合标准工作溶液,按6.2的测定条件浓度由低到高 进样测定,以峰面积-浓度作图,得到标准曲线回归方程
8种禁用吠喃香豆素标准品色谱图参见附录B中的图B.1
6.4测定 按6.2的测定条件对待测样液进行测定,用外标法定量
待测样液中对峡喃香豆素的响应值应在 标准曲线的线性范围内,超过线性范围则应稀释后再进样分析
进行样品测定时,如果检出吠喃香豆素 的色谱峰的保留时间与标准品相一致,并且在扣除背景后的样品色谱图中,该物质的紫外吸收光谱与标 准品的紫外可见吸收光谱相一致,则可初步确认样品中存在被测峡喃香豆素
必要时,阳性样品需用液 相色谱-质谱进行确认试验(参见附录C) 6.5空白试验 除不称取样品外,均按上述测定条件和步骤进行
结果计算 结果按式(1)计算,计算结果保留两位小数(G计算结果应扣除空白值) w一 式中: 化妆品中吠哺香豆素的含量,单位为毫克每千克(mg/kg) W -从标准工作曲线上蠢出的样液中被测吠喘香豆索的浓度,单位为微克每毫升(4g/ml)7 -样液最终定容体积,单位为毫升(ml) 试样的质量,单位为克(g)
GB/T30935一2014 检出限和定量限 本标准的检出限和定量限:8-胫基补骨脂素的检出限为0.1mg/kg,定量限为0.25mg/kg;补骨脂 素,异补骨脂素,8-甲氧基补骨脂素5-甲氧基补骨脂素、三甲沙林,欧前胡素异欧前胡素的检出限为 0.2mg/kg，定量限为0.5mg/八 g 回收率和精密度 在添加浓度0.25 /kg一25mg/kg范围内,回收率在85.0%一105.8%,相对标准偏差为0.41%一 ;mg/" 7.90%
10允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%
GB/T30935一2014 附 录A 资料性附录 8种禁用肤喃香豆素的中文名称,英文名称,CAs号,分子式、结构式和相对分子质量 表A.18种禁用肤喃香豆素的中文名称,英文名称,CAs号分子式、结构式和相对分子质量 中文名称 英文名称 CAS号 分子式 结构式 相对分子质量 OH 8-羚基补骨脂素 8-Hydroxypsoralen2009-24-7CH,O. 202.16 补骨脂素 66-97-？ CH.O 186.16 Psoralen 异补骨脂素 lsopsoralen 523-50-2CH,O 186.16 216.19 8-甲氧基补骨脂素8Methoporalen298817c;H,o 5-甲氧基补骨脂素5-Methoxypsoraen484-20-8CH,O 216.19 三甲沙林 228.24 Trioxsalen 3902-71-4CHaO. H.C H, 欧前胡素 Imperatorin 482-44-0CHO 270.28 482-45-1CHO 270.28 异欧前胡素 Isoimmperatorinn
GB/T30935?2014 B ? ?? ???? mAU 25 20 15 0 10 20 22.5 /min ? -? 8- ?; ??; 8-?; 5-?; ?; -??; ?? ?B.18?÷??????
GB/T30935一2014 附 录 C 资料性附录 确认试验 C.1液相色谱条件 液相色谱测定参考条件如下 a)色谱柱;XBridgeCw,5Am,150mm×2.1mm(内径),或相当者; b)流动相;见表C.1, 流速:0.3mL/min; c) d柱温:35; 进样量:10L
表C.1流动相 步骤 时间/min 水/% 乙睛/% 0.00 70 30 6.50 70 30 10.00 100 12.00 l100 13.00 70 30 70 30 15.00 C.2质谱条件 质谱测定参考条件如下 电离方式:电喷雾电离; a b 毛细管电压:3.0V; 萃取电压;,1.0v; 射频透镜电压;0.0V; 离子源温度;150 脱溶剂气:氮气,流速500L/h,温度350C; 锥孔气:氮气,流速50L/h 碰撞气:氯气 扫描模式:多反应监测(MRM),8种禁用吠喃香豆素的电离方式、定性离子对,定量离子对、锥 孔电压和碰撞气能量、相对丰度、允许偏差参见表C.2.
GB/T30935一2014 表c.28种禁用肤喃香豆素的电离方式、定性离子对定量离子对锥孔电压和碰撞气能量、 相对丰度,允许偏差 电离 定性离子对 定量离子对 锥孔电压 碰撞气能量 相对 允许偏差 中文名称 方式 1/" eV 丰度 (nn/文 201.1/157.1 18 32 8-羚基补骨脂素 35 ESI 201.1/173.l 士20 19 201.1/173.1 100 187.3/115.4 20 22 补骨脂素 39 ESI 187.3/131,4 士20 187.3/131.4 23 00 187.3/131.4 21 78 35 异补骨脂素 ESI 187.3/143.3 士20 17 187.3/143.3 100 217.5/174.3 28 89 35 士25 8-甲氧基补骨脂素 ESI 217.5/202.3 217.5/202.3 20 100 217.5/174.3 27 44 32 5-甲氧基补骨脂素 ES 217.5/202.3 士25 217.5/202.3 20 100 229.5/142.3 100 25 三甲沙林 ES 229.5/142. 士20 40 229.5/173.4 22 47 271.6/147.3 30 00 欧前胡素 ESI 20 士25 271.6/147.3 74 271.6/203.4 14 271.6/147.3 30 100 异欧前胡素 15 ESI 271,6/147.3 士25 12 82 271.6/203.4 C.3定性判定 按照上述条件测定试样和标准工作溶液,如果试样中的质量色谱峰保留时间与标准工作溶液一致 变化范围在士2.5%之内);样品中目标化合物的两个子离子的相对丰度与浓度相当标准溶液的相对丰 -致,相对丰度偏差不超过表c.2的规定,则可判断样品中存在吠喃香豆素
度 8种禁用吠喃香豆素的选择离子质量色谱图参见图C.1
GB/T30935?2014 14.0o 6.00 8.00 10.00 12.00 p . ?. 10.0 200 4.00 4.00 " 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 95 4o .00 6.00 8.00 10.00 12.00 4.00 4.00 6.00 8.00 0.00 12.00 /min ? -8-??? ?; ??; 8-?; -5-?; ? ?? 8 ??? ?c.18?ζ?????
化妆品中禁用呋喃香豆素的测定高效液相色谱法GB/T30935-2014
为了保障消费者的安全健康，我国对化妆品中某些成分作出了明确规定，其中包括禁用呋喃香豆素。呋喃香豆素是一种常见的合成香料，由于其易致敏性、致癌性和致突变性等问题，已被许多国家列入禁用范围。
GB/T30935-2014是我国针对禁用呋喃香豆素的测定方法标准，采用高效液相色谱法进行检测。该方法可以同时测定化妆品中的8-甲氧基补骨脂素等8种禁用呋喃香豆素。
具体的测定步骤如下：
1. 样品的制备：将化妆品样品加入甲醇中，并经过超声提取。提取液经过离心分离后，取上清液进行进一步处理。
2. 色谱条件的设置：采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱进行分离，流动相为乙腈-水溶液，梯度洗脱方式。
3. 禁用呋喃香豆素的浓度的计算：使用外标法对样品进行定量分析。将不同浓度的标准物质加入样品中，通过检测峰面积计算出禁用呋喃香豆素的浓度。
该方法具有检测灵敏度高、准确度高、重现性好等优点，并且可以同时测定多种禁用呋喃香豆素。因此，该方法在化妆品行业得到了广泛应用。
