GB/T38570-2020
植物转基因成分测定目标序列测序法
Determinationforingredientsofgeneticallymodifiedplants—Targetsequencingmethods
- 中国标准分类号（CCS）A21
- 国际标准分类号（ICS）07.080
- 实施日期2020-03-31
- 文件格式PDF
- 文本页数39页
- 文件大小1.28M
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植物转基因成分测定目标序列测序法
国家标准 GB/T38570一2020 植物转基因成分测定 目标序列测序法 eterminatonforingredientsfgnetieallmodfelplants一 Targesequeneingmethods 2020-03-31发布 2020-03-31实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标涯花管理委员会国家标准
GB/38570一2020 目 次 前言 范围 2 规范性引用文件 术语和定义 原理 试剂或材料 仪器设备 测定步骤 7.1抽样和制样 7.2DNA提取与纯化 7,3文库构建 7.！高通量测序 8 质量控制 结果分析与表述 9 9.1结果分析 9.2结果表述 1o防污染措施 附录A规范性附录)探针序列 附录B(规范性附录)人工DN 36
GB/38570一2020 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草
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本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任
本标准由标准化研究院提出并归口 本标准起草单位:江汉大学,武汉明了生物科技有限公司、标准化研究院、北京工商大学、 科学院遗传与发育生物学研究所,湖南杂交水稻研究中心、深圳华大智造科技有限公司
本标准主要起草人:彭海、陈利红、方治伟、张嘉楠、李甜甜、李论、崔野韩、马爱进、贾英民、陈红、 周俊飞、翟文学许娜、梁勇、高利芬、宋书锋、胡美霞、符习勤、张静、余进文
GB/38570一2020 植物转基因成分测定 目标序列测序法 范围 本标准规定了用目标序列测序法测定植物转基因成分的方法
本标准适用于植物及其产品中的外源基因和转基因品系的定性检测
本方法外源基因的定性检出 低限(LOD)为0.1%(外源基因与内标准基因间的拷贝数比)
规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求 GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法 GB/T19495.5一2018转基因产品检测实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测方法 GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法 GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件
3.1 内标准基因endogenousreferencegene 在植物不同物种中普遍存在且拷贝数恒定的基因
3.2 外源基因 exogenoIsgene 利用生物工程技术转人的使生物品种表现新的生物学性状的其他生物基因
3.3 质控样品 controlsample 与待测样品平行制样,用于显示待测样品在制样过程中是否被污染的样品
3.4 模板片段templatefragmment 由高通量测序片段中一组具有相同随机条形码的测序片段推测的一条模板脱氧核糖核酸(DNA) 序列
3.5 外源基因特征片段 characteristicfragmmentofexogeousgene 包含了外源基因但在自然界中不存在的模板片段
注，包括含有人工改造序列的外源基因序列,以及外源基因与除外源基因在起源物种中的边界序列以外的序列相 连接的序列
GB/T38570一2020 原理 通过抽样与制样获得待测样品与质控样品,提取并片段化样品基因组DNA、连接接头序列、PCR 扩增连接产物、探针捕获扩增产物,扩增捕获产物获得测序文库、高通量测序、分析测序数据和进行质量 控制并得出检测结论
本方法通过不同的样品条形码识别并控制实验室气溶胶污染;通过外源基因特征片段识别外源基 因并区分微生物污染;通过与多种转基因元件匹配的杂交探针同时检测多种转基因成分 试剂或材料 5 除非另有规定仅使用分析纯试剂
5.1水:GB/T6682一级
5.2文库构建试剂盒
5.3高通量测序试剂盒
5.4探针序列见附录A 5.5人工DNNA序列:见附录B. 6 仪器设备 高通量测序仪
测定步骤 7.1抽样和制样 7.1.1待测样品抽样与制样 按GB/T19495.7中规定的方法执行
7.1.2质控样品制样 从待测样品制样开始到结束的过程中,把1ng/L的人工DNA的溶液暴露于制样环境中,作为质 控样品
7.2DNA提取与纯化 按GBy/T19495.3的方法或具有相同效果的基因组DNA提取试剂盒提取并纯化待测样品和质控 样品DNA
7.3文库构建 7.3.1概述 利用文库构建试剂盒及其操作说明进行文库构建
7.3.2DNA片段化 利用酶切消化或机械破碎的方法,将待测样品和质控样品基因组DNA片段化至100bp~1000bp
GB/38570一2020 片段化时,基因组DNA的最低加人量参照GB/T19495.5一2018中附录B中规定的定量下限为0.1% 时的DNA模板最低加人量
7.3.3末端修复与接头连接 对7.3.2中获得的产物进行末端修复并连接接头序列
接头序列应包括三个部分:约20个碱基的 通用序则.个贼基组成的随机条形码序列和12个狱基的样品条形码序列
其中,不同的待测样品或 质控样品使用不同的样品条形码序列,且在同一个实验室中相同的样品条形码序列在30天内,只使用 -次
按试剂盒说明纯化连接产物
7.3.4PCR扩增 利用7.3.3中接头上的通用序列设计引物对7.3.3中获得的产物进行扩增,扩增循环数小于或等于 15个
其中,所设计的引物序列包含高通量测序仪的测序引物序列
按试剂盒说明纯化扩增产物
将具有不同样品条形码的待测样品或质控样品等质量混合后成为混合样品,每个混合样品中待测 样品或质控样品的数目不宜超过4个
7.3.5杂交捕获 将附录A中的探针按等摩尔质量混合,形成混合探针,利用混合探针对7.3.4中获得的产物进行杂 交捕获
按试剂盒说明纯化捕获产物
7.3.6CR扩增 利用高通量测序仪的测序引物序列对7.3.5中的产物进行扩增,扩增循环数小于或等于20个,获得 测序文库
按试剂盒说明纯化测序文库
7.4高通量测序 利用高通量测序试剂盒及其操作说明对测序文库进行高通量测序,每个待测样品的测序碱基数据 量设置为大于或等于1G
质量控制 利用转基因鉴定软件对获得的测序数据进行质量控制,并输出质量控制结论
质量控制程序要求 如下 当质量控制结论为制样过程中存在交叉污染时,从7.1开始重新实验
a 当质量控制结论为模板片段数量不足时,加大基因组DNA用量后从7.3或之前的步骤开始重 b 新实验
当质量控制结论为文库构建失败时,从7.3或之前的步骤开始重新实验
c d)当质量控制结论为测序数据量不足时,从7.4或之前的步骤开始重新实验
当质量控制结论为测序数据质量合格时,进行结果分析
e 结果分析与表述 9 g.1结果分析 利用多位点多核苷酸多态性(MLMNP)转基因鉴定软件计算待测样品中外源基因特征片段的数目 TEF)
GB/T38570一2020 g.2结果表述 9.2.1当TEF<3时,表述为“未检出××外源基因(或××转基因品系)” 9.2.2 当TEF>3时,表述为“检出××外源基因(或××转基因品系)” 9.2.3对于无法有效提取DNA的样品,表述为“未检出核酸成分” 10防污染措施 7.17.3.2的测定步骤的防污染措施按GB/T27403和GB/T19495.2中的规定执行
GB/38570一2020 附 录 A 规范性附录) 探针序列 A.1外源基因探针序列见表A.1表A.28
表A.1花椰菜花叶病毒的35S启动子(pCaMV35S)探针序列 编号 探针序列从5'端到3'端》 GACCTAACAGAACTCGCCGTAAAGAC'T(GGCGAACAGTTCATACAGAGTCTCTTACGACTCAATGA CAAGAAGAAAATcTTcGTcAAcATGGTGGAGcAN NcGACAcGcTTGTcTACTccAAA AATATCAAAGATACAGTCTCAGAAGACCAAAGGGCAATTGAGACTTTTCAACAAAGGGTAATAT CcG;GAAAccTccTcGGATTcc cTTTATTGTGAAGATA GTGGAAAAGGAAGGTGGCTCCTACAAATGCCATCATTGcGATAAAGGAAAGGCCATcGTTGAAG AcccAcG;AGG;AGcATcGTG ATGCCTCTGCCGAAGTGGTCCAA AGCAAGTGGATTGATGTGATATCTCCACTGACGT AAGGGATGACGCACAATCCCAC TCTATATAAGGA TAACAGCACAGTTGCTCCTCTCAGAGCAGAATCGGGTATTCAACACCCTCATATCAACTACTACGT TGTGTATAACGGTCCACATGCCGGTATATACGATGACTGGGGTTGTACAAAGGC GGCAACAAAcGGCGTTCcCGGAGTTGCACACAAGAAATTTGcCACTATTACAGAGGCAAGAGCAG CAGCTGACGCGTACACAACAAGTCAGCA AGGTTGAAC'TTCATCCCCAA AGGAGAAGCTcAAcTcAAGcccAAGAGCTTTGcTAAGGcccTAACAAGcccAccAAAGCAAAAAG CCCACTGGCTCACGCTAGGAACCAAAAGGCCCAGCAGTGATCCAGCCCCAAAAGA GACTcCTTTGCCcCGGAGATTACAATGGACcGATTTcCCTCTATCTTTACGATcTAGGAAGGAAGTTC GAAGGTGAAGGTGACGACACTATGTTCACCACTGATAATGAGAAGGTTAG;CCTC TTCAATTTCAGAAAGAATGCTGAcCCACAGATG;GTTAGAGAG(Gc'TACGCAGCAG(GTcTCATCAA CCAGGAGAT GACGATCTACCCGAGTAACAATCTCCAG ACCT'TCCCAAGAAGGTT AAAGATGcAGTcAAAAGATTcAGGAcTAATTGcATcAAGAAcAcAGAGAAAGAcATATTTcTcA 1c AGATCAGAAGTACTATTCCAGTATG;GACGATTCAAGGCTTGCTTCATAAACCAAGG CAAGTAATAGAGATTGGAG;TcTcTAAAAAGGTAG;TTccTAcTGAATcTAAGGccATGCATGGAG 11 TCTAAGATTcCAAATCGAGGATCTAACAGAACTcGCccGTGAAGACTGGCGiAACAGTT CATACAG;AG;TcTTTTAcGACTcAATGACAAGAAGAAAACTTcGTcAAcATG;G:TGGAGicAcG;ACA 12 CTCTGGTCTACTCCAAAAATGTCAAAGATACAGTCTCAGAAGACCAAAGGG;CTAT TGAGACTTTTcCAACAAAGGATAATTTCGGGAAACcTccTcG;GATTcCATTGccCAGcTATCTGTCA 13 CTTCATcGAAAGGACAGTAGAAAAGGAAGGTGGCTcCTACAAATGCCATCATTG CGATAAAGGAAAGGcTATcATT .AGATcccTcTGccGAcAGTGGTccCcAAAGATGGAcccccAcc 14 CACGAGGAGCATCGTGGAAAAAGAAGACGTTCCAACCACGTCTTCAAAGCAAG;T GG;ATTG;ATGTGACATCTccACTGAcGTAAG;G; .ATGAcGcAcA.ATcccAcTATccTTcccAAGAcce 15 TTCCTCTATATAAGGAAGTTCATTTCATTTGGAGAGGACACGCTGAAATCACCA
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GB/38570?2020 A.8( ?(5'?3') cCAACTcCTACcGTAcCTcGCATTACcCTTAcGCTGAAGAGATGCTcGACTGGGCAGATGAACATG GCATCGTG;GTGATTGATGAAACTGCTGCTGTCGGCTTTAACCTC'TCTTTAGGCA TTGGTTTCGAAGCGGGCAACAAGCCGAAAGAACTGTACAGCGAAGAGGCAGTCAACGGGGAAAC 1C TcAGcAAGCGCAcTTAcAGGCGATTAAAGAGcTGATAGcGcGTGACAAAAAccAcc CAAGCGTGGTGATGTGGAGTATTGCCAACGAACCGGATACCCGTCCGCAAGGTGCACGGGAATAT 1 TTcGCGCCACTGGCGGAAGCAACGCGTAAACTCGACcCGACGCGTcCGATCACCT GcGTcAATGTAATGTTcTGCGAcGCTcAcAccGATAccATcAGcGATcTcTTTGATGTGcTGTGcc 12 TGiAACCGTTATTACGGATGGTATGTcCAAAGiCGGCGATTTGGAAACGGCAGAGA AGGTACTGGAAAAAGAACTTcTGGcCTGGCAGGAGAAACTGCATCAGccGATTATcATCAccGAA 1 TAcG;GcG;TGG;ATAcGTTAGccGGGcTGcAcTcAATGTAcAccGAcATGTGG;AG;TG AAGAGTATCAGTGTGCATGGCTGGATATGTATCACCGCG,TCTTTGATcGCGTCAGCGCCGTcGTCG 14 GTGAACAGGTATGGAATTTCGcCGATTTTGcGACCTCGCAAGGCATATTGCGcG GTAAcAAGAA.AGGGATcTTCAcTcGcGACcGcAAAccGAAGTcGGcGGcTTTTcTGcTGc TT Tccco6 15 AAAAACGCTGGACTGGCATGAACTTCGGTGAAAAACCGCAGCAGGGAGGCAAAC A.9????(TMIv-CP)? ?д5'?3'? TGTC'TTACAGTATCACTACCCCATCTCAGTTCGTGTTCTTGTCATCAGCG'TGGGCCGACCCAATAG AG;TTAATAATTATG;TAcTAATGccTTAGG;AAATcAG;TTTcAAA cAcAACAAG CTAGAACTGTCGTTCAAAGACAATTCAGTGAGGTGTGGAAACCTTCACCACAAGTAACTGTTAGG TTccccGACAG;TGAcTTTAAGGTGTAcAGGTAcAATGcGG;TATTAGAcccGcTAG TCACAGCACTGTTAGGTGCATTCGACACTAGAAATAGAATAATAGAAGTTGAAAATCAGGCGAA CCCCACGACTGCCGAAACGTTAGACGCTACTCGTAG GCCATAAGGAGCGCTATAAATAAT'TTAGTAGTAGAAT'TGATCAGAGGAACCGGACCTTATAATC GGAGCTCTTTCGAGAGCTcC'TTCTGGTTTGGTTTGG;ACCTCTGG;TCCTGCAACTTGA A.10????(CMVv-CP)? ?(5'?3') TCGCAACCGTCGACGTCGTCCGCGTCGTGGTTCCCGCTCCGCTTCCTCCTCCGCGGATGCCAACTT'T AGAGTCTTGTCGCAGCAACTTTCGCGACTTAACAAGACGTTGGCAGCTGGTCG AAccT ACGTTcACATc rcCTAccATTAAcCAccCAAccTTTGrGGGG GAGTGAAcGTGTA5 GGGTAC TATTACcCTGAAGCCACCAAAAATAGACCGTGGGTCTTATTATGGTAAAAGGTT GTTAcTAccTGATTcAGTcAcGGAATTcGATAAG. sAAGcTTGTTTcGcGcATTcCAAATTcGAGTTN ATCCTTTGCCGAAATTTGATTCTACCGTG;TGGGTGACAGTCCGTAAAGTTCCTGC
GB/T38570?2020 A.10( ?(5'?3'? CTCCTcGGACTTGTccGTccCcGCCATCTcTGCTATGTTTGcGGAcGGAGCcCTcAcCGGTAcCTAGTT TATCAGTATGCTGCATCCGGAGTCCAAGCCAACAATAAATTGTTGTATGATCT TTCGGCGATGCGCGCTGATATTGGTGACATGAGGAAGTACGCCGTACTCGTGTATTCAAAAGACG ATGCAcTcGAGAcGGAcGAATTAGTAcCTccATGTcGACATTGAGCAccAAcGCAT A.11 ??(PLRVrep)? ?(5'?3'? CcCAGTcTGGAAccTTGcTTTTTGAcCA" AAGATTTAAAcTTTcAAAGTTcTcTTcGTTGTcATT GCAACAGGCTTTCCTCTTCTCCTGCAGCAAGCGAGCTTAATTTACGGCTATAATC ATGAACAGATTTAcCGCATATGCc(GcCTcTTTTcTTTATGTTcTCcCTTTGCTcAAcT(GCAAAAGAG GCAGGATTTCTACATCCGGCCTTCAAC'TTCCGAGGCACC'TcCACTATGAGTGCC AACTTGACGACCCAACCACTGCCGCcCGCTTACAGATCGGAGCTACTACGAGTTA GCGGCCTCCGTGACCTTATGGGCAATTATCAGCATTTGGTTCGGTCTTTATTGGACGCTTGCAAGG TTGATcAcTTTG;TTccTcTGGAcTTTcAGcATAGAAGccTTATGCTTAATTTTG CTCGGTTGTATAACCAGCTTGATCTACAGGGGCGTGCTAAGTCTTTCAGAGCACTTACcCGGTTTTC CTGTTTATGTCCCCTC'TGAAGATTATTTGGAGGGCAGC'TTTCTCCAAAAAGAAT A.12Y??(PVYep)? ?(5'?3' GCAAATGACACAATTGATGcAGGAGGAAACAGCAAGAAAGATGcAAGAcCAGAGCAAGGcAGcCA TCCAGTCAAACCCGAACAAAGGAAAAGATAAGGATGTGAATGCTGGTACATCTGGG ATGTGAATGCTGGTACATCTGGGACACATACTGTGCCGAGAATCAAGGCTATCACGTCCAAAATG AGAATGcccAA GAAcAcTTGcTTGAG;T AAGCAAGGGAGCAACCGTGCTAAACTTAG AAACTTAGAACACTTGC'TTGAGTATGCTCCACAACAAATTGATATTTCAAATAC'TCGGGCAACTC AATCACAGTTTGATACGTGGTATGAGGCAGTGCGGATGGCATAcGACATAGGAGA cGGATGGCATAcGAcATAGGAGAAAcTGAGATGCcAAcTG;TGATGAATGGGcTTATGGTTTGGT GCATTGAAAATGGAACCTCGCCAAATGTCAACGGAGTTTGGGTTATGATGGATGGG GAGTTTGGGTTATGATGGATGGGAATGAACAAGTTGAGTACCCGTTGAAACCAATCGTTGAGAA TGcAAAAccA.AcccTTAGGcAAATcATGGcAcATTTcTcAGATGTTGcAGAAGcGT TTTCTCAGATG;TTGiCAGiAAGCGTATATAGAAATGCGCAACAAAAAGGAACCATATATGCCACGA TATGGTTTAATTCGAAATCTGCGGGATGTGGGTTTAGCGCGTTATGcCTTTGACTT 10
GB/38570?2020 A.12( ?д5'?3'? TTAGcGcGTTATGCcTTTGACTTTTATGAGGTcACATCAcGAACAcCAGTG.AGGGCTAGGGAAGc GCACAT'TCAAATGAAGGCCGCAGCATTGAAATCAGCCCAACCTCGACTTTTCGGG GCCCAACCTCGACTTTTCGGGTTGGATGGTGGCATCAGTACACAAGAGGAGAACACAGAGAGGCA CcAAG;TArGCATACTcT CAC cAccGAGG;ATGTcTcT ACTTGGAGTTAAGAAcATG A.13??(BXN)? ?(5'?3'? ATAG;TAGGG;GCTrG;AAGAGATAcGiCTrG;TTTGTcGAGcCATCAAAATAAGGG;GATTTTcATGGAc ACCACTTTCAAAGCAGCCGCTGTTCAG;GCCGAACCGGTATGGATGGATGCCGCTGC AAcAGccGATAAGAccGTGAcGcTAGTAGCTAAAGccGcCAGcGGcTGGcGcG;CAGcTcGTcGCATT TccCGAATTG;TGGiATTCCGGGiCTACCCAGiGiATTCATGiCTCACGiCACAACCAAA AGGCAATcGccGccGATGGAccAGAAATcG CGAAACCCTACCATTCATCATTAA ATTGCcGiCTC'TCCTTTGGiG;TACAG cGAAcGGGCTGGccGTAcGcTcTAcATGTcAcAAATGcTTATcGATGccGATGGCATcAccAAAAT TCGTcGTCGAAAGCTCAAAcCAACCCGCTTTGAACGAGAACTcTTTGGcGAAGG TGACGGATCGGACTTACAGGTCGCCC TGGTcGGGTGGGTGcccTcAAcTGcGcGGA GAATTTGCAGTCGCTAAACAAGTTTGCGCTTGCTGCCGAGGGTGAACAGATACA TATcTccGccTGGccATcAcGCTTGGAAGcccTG;TGCTcG;TcGGAGAcTccATcGGcGcCATcAAc CAGGTCTACGCGGCCGAGACGGGGACCTTCGTTCTCATGTCGACGCAGGTGGT TGGAccGAccGGcATcGccGccTTcGAGATcGAAGAcAGG;TAcAAcccGAATcAGTATcTTGGTGG TGGGTACGCG lTAAAA CCTGACATGCAG,TTGAAGAGCAAGTCGTTGTC AccG;AccGAAGAGG;GCATcGTcCTAcGccGAGATcGAcCcTGTCGATGCTTGAGGCAGCAAAGTACTc GCTCGATCCCACGGGCCACTATTCGCGCCCTGATGTGTTCAGCGTGTCGATTAA ccGGCAACGGCAGCcTGcGGTGTcAGAAGTTATcGAcTCAAAcGG;TGAcGAGGACccGAGAGCAGC ATGCGAGCCCGiACGiAGiGGGGiATCG;TGAGG;TcGT" A TC'TACGGCAATAGiGGGT TcTAccccGTTATTGcGGAcATTcCTAATAAAAAGAGAcAcGTTGTAccCAAAGGGGTGTTcATGT 10 CCAGACGCAGAAAATATAGCcCAGAGTTAAAAcGcGAAGcCATcGCTTTAAcccG A.14??(BARNASE)? ?(5'?3'? GAAGCACAGGTTATCAACACGTTTGACGGGGTTGCGGATTATCTTCAGACATATCATAAGCTACC TGATAATTAcATTAcAAAATcCAGAAGCAcAAGcccTcGGCTGGG;TGGcATcAAAA TACATTACAAAATCAGAAGCACAAGCCCTcGGCTGGGTGGCATCAAAAGGGAACCTTGCAGACGT cGcCTccGGGGAAAAGcATcGGcGGAGAcATcTTcTcAAAcAGGGAAG;GCAAAcTc GGGAAAAGCATCGGCGGAGACATCTTCTCAAACAGGGAAGGCAAACTCCCGGGCAAAAGCGGACG AAcATG;GcGTGAAGcGGATATTAAcTATACATcAGGcTTcAG;AAATTcAGAccGG 1
GB/T38570?2020 A.15BARNASsE?(BARSTAR)? ?(5'?3'? TAACGGGGAACAAATCAGAAGTATCAGCGACCTCCACCAGACATTGAAAAAGGAGCTTGCCCTTC CGGAATACTACGGTGAAAACCTGGACGCTTTATGGGATTGTC'TGACCGGATGGGT GGAGTACCCGC'TCGTTTTGGAATGGAGGCAGTTTGAACAAAGCAAGCAGCTGACTGAAAATGGCG CCGAGAGTGTGCTTCAGGTTTTCCGTGAAGCGAAAGCGGAAGGCTGCGACATCAC A.16????BAR)? ?д5'?3' TGGGGATCTACCATGAGCCCAGAACGACGCCCGGCCGACATCCGCCGTGCCACCGAGGCGGACATG CCGGCGGTCTGCACCATcGTCAACCACTACATCGAGACAAGCACGGTCAACTTC CCACTACATCGAGACAAGCACGGTCAACTTCCGTACCGAG;C GCCGCAGGAACCGCAGGAGTGGACGG cGACCTCGTCCGTCTGCGGGAGCGCTATCCCTGGCTCGTcGCCGAGGTGGACGG cTATccCTGGcTcGTcGccGAGGTGGAcGGcGAGGTcGccGGcATcGccTAccccGGccccTGGAN GGCACGCAACGCCTACGACTGGACG;GCCGAGTCGACCGTGTACGTCTCCCCCC AcGGccGAGTcGAccGTGTACGTcTcccCccGccAcCAGcGGAcGGGAcTGGGcTcCAcGcCTcTAcA CCCACCTGCTGAAGTCCCTGGAGGCACAGGGCTTCAAGAGCGTGGTCGCTGTC GGCACAGGGCTTCAAGAGCGTGGTcGCTGTCATcGGGcCTGCcCAAcGACcCGAGcGTGcGCATGCA CGAGGCGCTCGGATATGCCCCCCGCGGCATGCTGCGGGCGGCCGGCTTCAAGCA A.17???(PAT)? ?д5'?3' cGACATGTcTcCGGAGAGGAGAcCAGTTGAGATTAGGccAGcCTACAGCAGCTGATATGGccGCGG T'T'TGTGATATCGTTAACCATTACATTGAGACGTCTACAGTGAACTTTAG;GACAGA CATTGAGACGTcTACAGTGAACTTTAGGACAGAGCCACAAACAcCACAAGAGTGGATTGATGATc TAGAGAGGTTGCAAGATAGATACCCTTGGTTGGTTGCTGAGGTTGAGGGTGTTGT CcCTTGGTTGGTTGCTGAGGTTGAGGGTGTTGTGGCTGGTATTGCTTACGCTGGGCcCCTGGAAGGC TAGGAAcGCTTAcG;ATTGGAcAGTTGAGAGTAcTGTTTAcG;TGTcAcATAGGcA AGTTGAGAGTACTGTTTACGTGTCACATAGGiCATCAAAGGTTGGGCCTAGGATCCACATTGTACA cACATTTGcTTAAGTcTAGGAGGcGCAAG;GTTTTAAG;TcTG;TG;G;TTGcTGTTAT GGCGCAAGGTTTTAAGTCTGTGGTTGCTGTTATAGGCCTTCCAAACGATCCATCTGTTAGGTTGCA TGAGGCTTTGGGATACACAGcccGGGGTACATTGcGcGcAGCTGGATACAAGCA 12
GB/38570?2020 A.186-???(PI)? ?(5'?3') ATGCAAAAACTCATTAACTcAGTGCAAAACTATGCCTGGGGCAGCAAAACGGCGTTGAcCTGAACT TTATGGTATGGAAAATCCGTCCAGCCAGCCGATGGCCGAGCTGTGGATGGGCGCA CTGTGGATGGGCGCACATCCGAAAAGCAGTTCACGAGTGCAGAATGCCGCCGGAGATATcGTTTC AcTGcGTGATGTGATTGAGAGTGATAAATcGAcTcTGcTcGGAGAGGccGTTGcc GGAGAGGCCGTTG;CCAAACGCTTTGGCGAACTGCCTTTCCTG;TTCAAAGTATTATGCGCAGCACAG GAAATcGG;TTTTGcCAAAGAAAATGccGCAGGTATcccGATGGATGccGccGAGcG;TAAcTATAA AGATcCTAACCACAAGCcGGAGCTGGTTTTTGCGCTGACGCCTTTcCCTTGCGATG CCTTTCCTTGCGATGAACGCGTTTCGTGAATTTTCCcGAGATTGTCTCcCTACTCCAGcCGGTCGCA rAcAACAGccTGATGccGAAcGTTTAN GGTGAATCCGGCGATTGTCATTTTTA GATGCCGAACGTTTAAGCGAACTGTTCGCCAGCCTGTTGAATATGCAGGGTGAAGAAAAATCCCG cGcGCTGGcGATTTTAAAATcGGcccTcGATAGcCAGCAGGGTGAAccGTGGCAA cTGrTcT C GGTGAACCGTGGCAAACGATTCGYTTTAATTTCTGAATT'TTACCCGGAAGACAGCGG" CcGCTATTGCTGAATGTGGTGAAATTGAACCCTGGCGAAGCGATGTTCCTGTT GcGATGTTccTG;TTcGCTGAAACAccGCAcGCTTAccTGCAAGGcGTGGcGCTGGAAGTGATGGCA AACTCCGATAACGTGC'TGCGTGCGGGTCTGACGCCTAAATACAT'TGATATTCCG TACATTGATATTcCGGAACTGGTTGCCAATGTGAAATTCGAAGCCAAACCGGCTAACCAGTTGTT GACCcAGicCcGG;TGAAACAAGGTGcAGAAcTGGACTTcccGATTcCA GTGGATGAT ATTCCAGTGGATGATTTTGCCTTCTCGCTGCATGACCTTAGTGATAAAGAAACCACCATTAGCCA 10 GCAGAGTGCCGCCATTTTGTTCTGCGTCGAAGGCGATGCAACGTTGTGGAAAGGT TGGAAAGGTTcTcAGCAGTTAcAGcTTAAAccGGGTGAATcAGcGTTTATTGccGcCAAcGAATe 1 ACCGGTGACTGTCAAAGGCCACGGCCGTTTAGCGCGTGTTTACAACAAGC'TGTAA A.19????涾?(B)? ?д5'?3'? CAAcGAGTGcATccccTAcAAcTGcCTGAGcAAccccGAGGTGGAGGTGCTGGGcGGCGAGcGCAT CGAGACCGGCTACACCCCCATCGACATCAGCCTGAGCCTGACCCAGTTCCTGCT GAGCGAGTTCGT(GCCCGGCGCCGGCTTCcGTGCTGGGCCTGGTGGACATCATCTGGGGCATCTTCGG ccccAGccAG;GGGAcGccTTccTG;GTGCAG;AcG;AGcAGcTGATcAAccAGcG CATcGiAGGAGTTCGCCCGCAACCAGGCCATCAGCCGCCTGGAGGGiCCTGiAGCAACCTGTACCAAAT CTACGccGAGAGCTTCCGCGAGTGGGAGGCCGACcCCACCAACcCcGCCCTGCG NCATGAAcAccGcCcTGN CGiAGGAGATGCGCATccAGTTcAAcGAc AccAccGcCcATcccccTGTTcGcc GTGCAGAACTACCAGGTGcccCTGCTGAGCGTGTAcGTGCAGGCcGCCAAcCT 13
GB/T38570一2020 表A.19(续 探针序列(从5'端到3'端》 编号 GCAcCTGAGcGTGCTGCGcGAcGTCAGcGTGTTcGGCCAGcGCTGGGGCTTcGAcGcCGccAcCATc AACAGCCGCTACAACGACCTGACCCGCCTGATCGGCAACTACACCGACCACGC CGTGCGiCTGGTACAACACCGGCCTGGAGCGCGTGTGGGGTCCCGACAGCCGCGACTGGATCAGGTA CAAccAG;TTccGccGcGAGcTGAcccTGAccGTGcTGGACATcGTGAGccTGTT CCCCAACTACGACAGCCGCACCTACCCCATCCGCACCGTGAGCCAG;CTGACCCGCGAGATTTACACC AACCcCGTGCTGGAGAACTTCGACGGCAGCTTcCGCGGCAGCGcCCAGGGCAT CGAGGGcCAGCATccGCAGCccCcAcCTGATG;GACATCCcTGAACAGCATCAcCATCTACACcGAcGcc CAcCGcGGCGiAGTACTACTGGAGCGGCCACCAGATCATGGcCAGccCCGTcGG CTTCAGCGGCCCCGAGTTCACCTTcCCCCTGTACGGCACCATGGGCAACGCTGCACCTCAGCAGCGC ATAGTGGAAGTGGGCAGGGAGTGTACCGCACCTGAGAGACCTGTA ccGTcGAccTTTcAAc CATcGGCATCAACAACCAGCAGCTGAGCGTGCTGGACGGCACCGAGTTcGC 10 CTACGGCACCAGCAGCAACCTGCCCAGCGCcGTGTACCGCAAGAGcGGCACCGT GGACAGccTGGAcGAGATccccccTCAGiAACAACAAcGTGcCAccTcGACAGGGCTTCAGccAccG TCTGAGCCACGTGAGCATGTTCCGCAGTGGCTTCAGCAACAGCAGCGTGAGCAT cATccGTGCAccTATGTTCAGCTGGATTcAcCGCAGTGCcGAGTTCAAcAACATCATcGccTccGA 12 CTCCATCACcCCAGATCCCGGCTGTGAAGGGCAACT TCAACGGCTCCGT GATCTCCGGTCCAGGCTTCACCGGTGGCGACCTCGTGCGCCTCAACTCCTCCGGCAACAACATCCAG 13 AACcGcGG;TTACATcGAG(TGccG;ATccAcTTcCcGTcCAccTcCAcccGcTA CCGCGTGCGCGTGCGCTACGCCTcCCGTGACCcCCGATCCACCTCAACGTGAACTGGGGCAACTcCTCC ATCTTCTcCCAACACCGTGCCAGCCACCGCCACCTCcCTCGACAACCTcCAGTc CTccGAcTTcGGcCTAcCTTcGAGTccGccAAcGccTTcAccTccTccCTcGGCAACATcG;TGGGcGTG CGCAACTTCTCCGGCACCGCTGGCGTGATCATCGACCGCTTCGAGTTCATCCC GGTGACCGCCACCCTCGAAGCCGAGTACAACCTTGAGCGCGCTCAGAAGGCCGTGAACGCCCTCTTC 16 ACCTCCACCAACCAGCTCGGCTCAAGACCAACGTGACCGACTACCACATCGA CCAGGTGCCCGGGiCGiCGGCGGiCGGiCGGiCAAGCTCAAGAACCAGGACAAGCACCAGTCCTTCTcCCTCC AACGCCAAGGTGGACAAGATTTCCACcGA CCTCAAGAACGAGACCGACAT cGAGAAcGTGGAGccGT CGAACTCCAGAACATCAACCACGAGGACTGCCTCAAGATGTCCGAGTAC 18 TCG;TGTCcGTGTCCACCATCCAGACCGGCATcGGCATCGCCGGCAAGATcCTCGG cAAcCTcGGcGTGccGTTcGcAGGccAGGTGGccTcccTcTAcTccTTcATcCTcGGcGAGcTTTGG 19 CCGAAGGGCAAGTCCCAGTGGGAAATCTTCATGGAGCACGTGGAGGAACTCAT CAACCAGAAGATTTCCACCTACGCCCGCAACAAGGCCCTCGCCGACCTCAAGGGCC'TCGGCGACGCC 20 CTcGccGTGTAcCACGAGrcCcTGA;TccTGGATcAAG;AAccGCAACAACAc CCGCACCCGCTCCGTGGTGAAGTCCCAGTACATCACCCTCGAACTCATGTTCGTGCAGTCCCTCCCG TCCTTCGccCGTGTCcGGAGAGGAGGTGCCGCT cccGATcTAcGccCAGGc 14
GB/38570一2020 表A.19(续 编号 探针序列(从5'端到3'端) AGCCAAcCTcCACCTcCTcCTccTCcGCGAcGCcTCCATCTTcGGCAAGGAGTGGGGCCTcTCcGAC 22 TCCGAGATATCCACCTTCTACAACCGCCAGGTGGAGCGCACCTCcGACTACTC CGACCACTGCACCAAGTGGTTCGACACCGGCCTCAACCGCCTCAAGGGCTCCAACGCCGAAATCTG 23 GG;TGAAGTAcAAccAG;TTccGccGcGAcATGAcccTcATGGTGcTcGAccTcGT GGCCCTCTTCCAGTCCTACGACACCCACATGTACCCGATCAAGACCACCG;CCCAGCTCACCCGCGAG 24 GTGTACACCAACGCCATCGGCACCGTGCACCCGCACCCGTCCTTCGCCTCCAC cAccTGG;TAcAACAAcAAcGccccTTccTTcTccGccCATcGAGGCcGccGTGATccGcTccccGCAc 25 CTCCTCGACTTCC'TTGiAGCAGGTGACCATC'TACTCCCTCCTCTccCGCTGGTC CAACACCCAGTACATGAACATGTGGGGAGGCCACAAACTTGAGTTcCGCACCATcGGTGGCACCCT 26 cAAcAccTccAcccAGGGcTccAccAAcAccTccATcAAcccGG;TG;AcccTccc GTTCACCTCCCGCGACATCTACCGCACcGAGTcCCTcGccGGCCTCAACCTCTTcCCTCACcCAGCCcGG 27 :NGAcT CGCCTCCGACAACTTCTACTACCCTGGCTACGCcCGGCATCGGCACCCAGCTCCN CCGAGAAC 28 GAAC'TCCCTCCGGAGACCACCGGCCAGCCGAACTACGAGTCCTACTCCCACCG 29 CCGCcGACCGCACCAACACCATCCACTCCGACTCCATCACCCAGATCCcGCT CGTGAAGGCCCACACCCTCCAGTCCGGCACCACCGTGGTGAAGGGTCCAGGCTTCACCGGTGGCGAC 30 ATccTccGccGcAccTccGGAGGcccG;TcGccTTcTccAAcGTGAAccTcG CTGGAACCTCTCCCAGCGCTACCGCGCTcCGCATCCGCTACGCCTCCACCACCAACCTCcGCATGTAC 31 GTGACCATCGCAGGCGAGCGCATCTTCGCAGGcCAGTTCAACAAGACCATGAA CACAGGcGAcccGcTcAcCTTccAGTcCTTcTcCTAcGccAcCATcGAcAccGcCTTcAcCTTcccGA 32 CCAAGGCCTCCTCCCTCACCGTGGGAGCTGACACCTTCTCCTCCGGCAACGA GGTGTAcGTGGACcGCTTCGAACTCATCCCGGTGACCGCCAcCCTTGAGGCCGTGACcGACCTAGA 33 ACGCGCTCAGAAGGCC(GTGCACGA ACCAACCCTGGTGGCCT CAAGACCGAcG;TGAAGGACTACCACATcCGiACCAGGTGTcCAACCTcGTGGAGTcCCTCTCCcGACG,A 34 GTTCTACCTcGACGAGAAGcGCGAACTCTTcGAGATCGTGAAGTACGCCAAGCA TGATCAACCATGGCCAACCCCAACAATCGCTCCGAGCACGACACGATCAAGGTCACCCCCAACTCC 35 GAGCTCCAGACCAACCACAACCAGTACCcCGCTGGcCGACAACCCCAACTCCACC cAAcTccAccCcTGGAAGAGCTGAAcTACAAG;GAGTTccTGcGcATGAccGAGGAcTccTcCAcGGA 36 GGTCCTGGACAACTCCACCGTCAAGGACGCCGTCGGGACCGGCATCTCCGTCGT TcCTCcGTcGTTGGGCAGATcCTGGGcGTcGTTGGcGTcCCCTTcGCAGGTGCTCTCAcCTcCTTCTA 37 CCAGTccTTcCTGAACAcCACTGiGcCCrccGAcGCcG;AccccrGGAAGccCT TGGAAGGCCTTCATGGCCCAAGTCGAAGTCCTGATCGACAAGAAGATCGAGGAGTACGCCAAGTC 38 CAAGGcCCTGGccGAGCTGCAAGGCcTGCAAAACAACTTcGAGGAcCTAcGTcAAC 15
GB/T38570一2020 表A.19(续 探针序列(从5'端到3'端》 编号 CTACGTCAACGCGCTGAACTcCTGGAAGAAGACGCCTCTGTCcCTGCGCTcCAAGcGCTCcCAGGAc 39 CGCATCCGCGAGCTGTTCTcCCCAGGCCGAGTCCCACTTcCCGCAACTCCATGCC ACTCCATGCCGTCCTTCGCCGTCTCCAAGTTcGAGGTCCTGTTCCTGCCCACCTACGCCCAGGCTGC 40 CAACACcCAccTcCTGTTGCTGAAGGAcGCcCAG;GTcTTCG;GCGAGGAATGG;G GAGGAATGGGGCTACTCCTCGGAGGACGTCGCCGAGTTCTACCGTCGCCAGCTGAAGCTGACCCAA CAGTACACCGACCACTGCGTCAACTGGTACAACGTCGGcCTGAACGGcCTGAGG cGGcCTGAGG;GGcTcCAccTAcGAcGCA CATGGGTcAAGTTcAAccGCTTccGCAGGGAGATGAccCT 42 GACcGTcCTGGAcCTGATcGTcCTGTTccCCTTcCTACGACATcCGCcCTGTACTc GcCTGTACTCCAAGGGCGTCAAGACCcGAGCTGACcCGCGACATCTTCACGGACcCCATCTTcCTGCT 43 CAC(GACCCTCCAGAAGTACGGTCCCACCTTCCTGTCATCGAGAACTCCATC AACTCCATCCGCAAGCCCCACCTGTTCGACTACCTCCAGGGCATCGAGTTcCACACGCGCCTGAGGC 44 G;AcAAG cTAcGcc TT CTACGTCGAGACCAGGCCCTCCATCGGCTCCTCGAAGACGATCACCTCCCCTT 45 TCCACCGAGCCCGTCCAGAAGCTGTcCTTCGACGGCCAGAAGGTCTACCGCAC TcTACcG(CACCATCGcCAACAcCGAC(TCGcG(GcCTTGGccGAAcGGCAAG(GTTACcCT(G(GGc(GTcAc 46 GAAGGTcGACTTCTCcCAGTACGATGACCAGAAGAACGAGACCTCCACCCAGA TcCACCCAGACCTACGACTcCCAAGCGCAACAATGGCCACGTCTcCCGcCCAGGACTCCATCGACCAGC 47 TGccGccTGAGAccAcTG;AcGAGiccccTGGAGAAGGccTAcTcccAccAGcTG CCACCAGC'TGAACTACGCG;GAGTGCT'TCCTGATGCAAGACCGCAGGG;GCACCATCCCCT'TCTTCACC TGGACCCACCGCTcCGTCGACTTCTTCAACACCATcGAcGCCGAGAAGATCAC AGAAGATcAcccCAGcTGcccGTGG;TCAAGGccTAcGccCTG;TccTcGGG;TGccTccATcATTGAGG 49 GTCCAGGCTTCACCGGTGGCAACCTGCTG;TTCCTGAAGGAGTCCTCGAACTCCA TCGAAC'TCCATCGCCAAGTTCAAGGTCACCT(GAACTCCGCTGCCTT(GCTGCAACGCTACC(GCGTC 50 GCATCCGCTACGCCTCCACCACGAACCTG;CGCCTGTTCGTCCAGAACTCCAAC GAACTCCAACAATGACTTCCTGGTCATCTACATCAACAAGACCATGAACAAGiGiACGiATGiACC'TGA 51 CCTACCAGAcCTTcGAcCTcGcCACCAcGAACTC ATGACGGCCGACAACAACACCGAGGCCCTGGACAGCAGCACCACCAAGGACGTGATCCAGAAGGGC 52 ATCAGCGTGGTGGGCGACCTGCTGGGcGTGGTGGGCTTccCCTTCGGCGGCGcC GGcGGcGcCCTGG;TGAGcTTcTACACcAAcTTccTGAAcAcCATcTGGccCAGcGAGGAccccTGG 53 AAGGCCTTCATGGAGCAGGTGGAGGCCCTGATGGACCAGAAGATCGCCGACTAC GCCGACTAcGCCAAGAACAAGG GGCACTGGCCGAGCTACAGGGCCTCCAGAACAACGTGGAGGACTAT 54 GTGAGcGcccTGAGcAGcTGGcAGAAGAAccccGcTGcAccG;TTccGcAAcccc CGCAACCCCCACAGCCAGGGCCGCATCCGCGAGCTGTTCAGCCAGGCCGAGAGCCACTTCCGCAACA 55 GCATGCcCAGCTTcGcCATcAGcGGCTAcGAGGTGCTGTTcCTGAcCACCTAC 16
GB/38570一2020 表A.19(续 编号 探针序列(从5'端到3'端) ACCAccTAcGCCCAGGcCGcCAACAccCACCTGTTcCTGCTGAAGGACGccCAAATCTACGGAGAG 56 GAGTGGGGCTACGAGAAGGAGGACATCGCCGAGTTCTACAAGCGCCAGCTGAAG CAGC'TGAAGCTGACCCAGGAGTACACCGACCACTGCGTGAAGTGGTACAACGTGGGTCTAGACAA 57 GcTccGcGGcAGCAGcTAcGAGAGcTGGGTGAAcTTcAAccGCTAccGccGcGAG CG;CCGCGAGATGACCCTGACCGTGCTGGACCTGATCGCCCTGTTCCCCCTGTACGACGTGCGCCTGT 58 ACCCCAAGGAGGTGAAGACCGAGCTGACCCGCGACGTGCTGACCGACCCCATC TGcGcGGcTAcGGCAccAcCTTcCAGCAAcATcGAGAAcTAc GACCCCATCGTGGGCGTGAACAACCT 59 ATCCGiCAAGCCCCACCTG:TTCGiACTACCTGiCACCGCATCCAGTTCCACACGCGT 60 ACCAGCCCTTTACGGC TTC'TACGGCAACAAGAGCAGCGAGCCCGTGCAGAACC'TTGAGTTCAACGGCGAGAAGGTGTACCG 61 CGCCGTGGCTAACACCAACCTGGCcGTGTGGCCC AGCAcccAGAcc AGCGGCGTGACCAAGGTGGAGTTCAGCCA(GTACAACGACCAGACCGACGAGGCCAN 62 GACCAGCTGccccCcGAGAcCcAcCGAcGAGccccTGGAGAAGGGcTAcAcCcAcCAGCTGAAcTAc 63 GTGATGTGCTTCCTGATGCAGGGCAGCCG;CGGCACCATCCCCGTGCTGACCTGG CTGAcCTGGACCCACAAGAGCGTcGACTTCTTCAACATGATCGACAGCAAGAAGATCACCCAGCTG 64 ccccTGGTGAAGGccTAcAAGCTccAGAGcGGcGccAGcGTGGTGGcAGGcccc GCAGGCCCCcGCTTCACcGGCGGCGACATCATcCCAGTGCACCGAGAACGGCAGCGCCGCCACCATCT 65 ACGTGACCCCcCGACGTGAGCTACAGCCAGAAGTACCGCGcCCGCATcCCACTAC ATccAcTAcGcCAGcAcCAGccAGATcAccTTcAcCcTGAGccTGGAcGGGGccCcCTTCAAccCAAT 66 ACTACTTCGACAAGACCATCAACAAGGGCGACACCCTGACCTACAACAGCTTC ATGACT(GCAGACAACAACACCGA 67 TATCTCCGTTGTGGGAGACCTCTTG rG;G;GCGTGGTTGGATTTCCC'TTCGGTGGAGCC G(GTGGAGCCCTCGTGAGiCTTCTATACAAACTTTCTCAACACCATTTGGiCCAAGiCGiAGGACCCTTGG 68 AAAGCATTCATGGAGCAAGTTGAAGCTCTTATGGATcAGAAGATTGCAGATTAT GCAGATTATGCCAAGAACAAGGCTTTGGCAGAACTCCAGGGCCTTCAGAACAATGTGGAGGACTA 69 CGTGAGTGCATTGTcCAGCTGGCAGAAGAACCCTGTTAGCTCCAGAAATCCTCAC AATcCTCcACAGcCcAAGGTAGGATcAGAGAG;TTG;TTcTcTcAAGccGAATcccAcTcAGAAATTc 70 CATGCCTAGCTTTGCTATCTCCGGT CCTCACTACCTATGCT ACCTATGCTCAAGCTGCCAACACCCACTTGTTTCTCCTTAAGGACGCTCAAATCTATGGAGAAGA 7 GTG;GGGATAcGAGAAAGAGGAcA CATTGCTGAG;TTcTACAAGcG;TCAACTTAAGcTc CTTAAGCTCACCCAAGAGTACACTGACCATTGCGTGAAATGGTATAACGTTGGTCTCGATAAGCT 72 CAGAGGCTcTTCcTACGAGTCTTGGGTGAACTTCAACAGATACAGGAGAGAGATG 17
GB/T38570一2020 表A.19(续 探针序列(从5'端到3'端》 编号 AGAGAGATGAcCTTGACTGTGCTcGATCTTATCGCACTcTTTCCCTTGTACGATGTGAGACTCTAC 73 CCAAAGGAAGTGAAAACTGAGCTTACCAGAGACGTGCTCACTGACCCTATTGTC CCTATTGTCGGAGTCAACAACCTTAGGGGTTATGGAACTACCTTCAGCAATATcGAAAACTACAT TAGGAAAcCACATcTCTTcGAcTATCTTcACAGAATTCAATTccACACAAGGTTT ACAAGGTTTCAACCAGGATACTATGG;TAACGACTCCTTCAACTATTGGTCCGGTAACTATGTTTC 75 CACCAGACCAAGCATTGGATCTAATGACATCATCACATCTCCCTTC'TATGGTAAC TATGGTAACAAGTCCAG;TGAAcCTGTGCAGAAccTTGAGTTCAAcGGcGAGAAAGTcTATAGAGc 76 CGTcGCAAACACCAATcTCGCTGTGTGGCCATcCCcGCAGTTTACTcCAGGCGTCACA GGCGTCACAAAGGTGGAGTTTAGTCAGTATAACGATCAGAcCGATGAGGCCAGCACCCAGACTTA 77 CGACTCCAAACGTAAC(GTTGGC(GCAGTCT(CTTGGGATT(CTATCGACCAATTGCCT CAATTGCCTCCAGAAACCACAGACGAACCATTGGAGAAGGGCTACAGCCACCAAC'TTAAC'TATGT 78 GATGTGcTTcTTGATGCAAGGTTccAGAGGGAcCATTcCAGTG;TTGAccTGGAcA TcAATTC ACCTGGACACACAAGTCCGTGGACTTCTTCAACATGATCGATAGCAAGAAGATCACT 79 CTTGGTGAAAGCCTACAAGCTGCAATCTGGTGCTTccGTTGTCGCAGGTcCCAGA G(GTCcCAGATTCAcTGGAG(GTGACATCATCCAGTGCACAGAGAAc(GGcCAGcGCAGcCTAcCTATcTA 8c CGTGACACCTGATGTGTCTTACTCTCAGAAGTACAGGGCACGTATTCATTACGCA CATTACGCATCTACCAGcCAGATCACCTTCACACTCAGCTTGGATGGAGCACcCTTCAACCAGTAT 81 TATTG;ACAAGACcATcAACcAAAGG:TG;ACACTcTcAcATACAATAGcTTcAAc ACGAATGCATTCCATACAACTGCTTGAGTAACCCAGAAGTTGAAGTACT'TGGTG;GAGAACGCATT GAAACCGGTTACACTCCCATCGACATC'TCCTTGTCCTTGACACAGTTTCTGC'TCA GcGAGTTcGTGCCAG;GTGCTG;G;GTTcG;TTcTcG;GAcTAGTTGACATCATcTGGG;GTATcTTTG;GTc 83 CATCTCAATGGGATGCATTCCTGGTGCAAATTGAGCAGTTGATCAACCAGAGGA TcGAAGAGTTCGcCAGGAACCAGGCCATCTCTAGGTTGGAAGGATTGAGCAATCTCTACCAAATC TATGCA CAGAGAGCTTCAGAGAG;TGGGAAGCCGATCCTACTAACCCAGCTCTCCGCG AGGAAATGcGTATTCAATTCAAcGACATGAACAGCGCCTTGACCACAGCTATcCcCATTGTTcGCA 85 GTcCAGAACTACcAAGTTCCTcTCTTGTccGTGTAcGTTcAAGCAGCTAATCTTc ACCTCAGCGTGCTTCGAGACGTTAGCGTGTTTGGGCAAAGGTGGGGATTcCGATGCTGCAACCATC 86 AATAGCCGTTACAACGACCTTACTAGGCTGATTGGAAACTACACCGACCACGCTG TTcGTTGGTACAACACTGGCTTGGAGCGTGTCTGGGGTCcTGATTCTAGAGATTGGATTAGATAC 87 AACCAGTTCAGGAGAGAATTGACCCTCACAG TGGACATTGTGTCTCTCTTCC CGAACTATGACTcCAGAACCTACCCTATCCGTACAGTGTCCCAACTTACCAGAGAAATCTATACT? 88 AcccAGTTcTTGAGAAcTTcGAcGGTAGcTTccG;TGG;TcTGcccAAG;GTATcG AAGGCTCCATCAGGAGCCCACACTTGATGGACATCTTGAACAGCATAACTATCTACACCGATGCTC 89 ACAGAGGAGAGTATTAcTGGTCTGGACACCAGATCATGGcCCTcTcCAGTTGGAT 18
GB/38570一2020 表A.19(续 编号 探针序列(从5'端到3'端) TCAGCGGGCCCGAGTTTACCTTTcCTcTCTATGGAACTATGGGAAACGCcGCTCCACAACAACGTA 90 TCGTTGCTCAACTAGGTCAGGGTGTCTACAGAACCTTGTCTTCCACCTTGTACA GAAGACCCTTCAATATCGGTATCAACAACCAGCAACTTTCCGTTCTTGACGGAACAGAGTTCGCC'T 91 ATGGAAcCTcTTcTAAcTTG;cCATccGcTGTTTACAGAAAGAGCG;GAAccG;TTG ATTCCTTGGACGAAATCCCACCACAGAACAACAATG;TGCCACCCAGGCAAG;GATTCTCCCACAGGT 92 TGAGCCACGTGTCCATGTTCCGTTCCGGATTCAGCAACAGTTCCGTGAGCATCA TCAGAGcTccTATG;TTcTcATGGATTcATcGTAGTGcTGAGTTcAAcAATATcATTccTTccTcTc 93 AAATCACCCAAATcCCATTGACCAAGTcTACTAAcCTTGGATCTGGAACTTcTG TCGTGAAAGGACCAGGCTTCACAGGAGGTGATATTCTTAGAAGAACTTC'TCCTGGCCAGATTAGC 94 AGGATTc ACCTAGAGTTAAATCACTGAC TTTCTAAAGATATCGTGTC GTTACGCATCTACCACAAACTTGCAATTcCACACC'TCCATCGACGGAAGGCCTATCAATCAGGGTA 95 ccrTAGcGcTcATG CC(GTCGGTTTCATACTCCTTTAACTT(TCTAACGGATAAGCGTTTTACC 96 TGTTCAATTcCTGGCAATGAAGTGTACATTGACCGTATTGAGTTTGTGcCTGCCG cATcccGTAcAAcTGccTcAGCAAcccTGAGGTcGAGG;TGCTcGGcGGTGAGcGCATcGAGAccGG 97 TTACACCcCCATCGACATCTCC TCCCTCACGCAGTTCCTGCTCAGCGAGT CGTGCCAGGCGCTGGCTTcGTCCTGGGcCTCGTGGACATCATCTGGGGCATCTTTGGCCCCTCCCAG 98 TGGGAcGccTTccGG;TGcAAATcGAGcAGcCTcATcAAccAGAGGATcGAGGA GT'TCGCCAGGAACCAGGCCATCAGCCGCCTGGAGGG;CCTCAGCAACCTCTACCAAATCTACGCTGA 99 GCGCATcCAGTTcAACGACATGAACAGcGCccTGAcCACcGcCATCcCACTcTTcGCcGTcCAGAA 100 CTACCAAGTCCCGCTCCTGTCCGTGTACGTCCAGGCCGCCAACCTGCACCTCAG CGT(GCTGAGGGACGTCAGCGTGTTTGGCCAGAGGTGGGG(C'TTCGACGCCGCCACCATCAACAGCCG 101 ON TACAACGACCTCACCAG;GCTGATCG;GCAACTACACCGACCACGCTGTCCGCTG GTACAACACTGGCC'TGGAGCGCGTC'TGiGGGCCCTGiATTCTAGAGAC'TGGATTcGiC'TACAACCAGTT l02 cGAcTcccGcAccTAcccGATccGcAccGTGTcccAAcTGAcccGcGAAATcTACAccAAccccGTc 103 CTGGAGAACTTCGAcGGTAGcTTCAGGGGCAGCGCCCAGGGCATCGAGGGCTC cATcAGGAGcccAcAcCcTG;ATGGAcATcCTcAAcAGcATcAcTATcTAcAccG;ATGcccAccGcGG 104 CGAGTACTACTGGTCCGGCCACCAGATCATGGCCTCCCCGGTCGGCTTCAGCGG CCccGAGTTTAcCTTTcCTCTCTACGGCAcGATGGGCAACGccGCTcCACAACAAcGCATcGTcGCT 105 CAGicCTG(GiGcCAGGGicGTcTAccGiCcAccCTGAGCTccAcccT;TACcGCAG(Gicc CTTCAACATCGGTATCAACAACCAGCAGCTGTCCGTCCTGGATGGCACTGAGTTCGCCTACGGCAC 106 CTcCTcCAAcCTGCcCTCcGCTGTCTAccGCAAGAGcGGCACGGTGGATTccCT 19
GB/T38570一2020 表A.19(续 探针序列(从5'端到3'端》 编号 GGACGAGATCCCACCACAGAACAACAATGTGCCCCCCAGGCAGGGT" 门 TCCCACAGGCTCAGCCA 107 cGTGTcCATGTTcCGCTcCGGCTTCAGCAACTcGTcCGTGAGCATCATCAGAGC TcCTATGTTcTCCTGGATTCATCGCAGCGcGGAGTTCAACAATATCATTCcGTCcTCcCAAATcAC 108 CCAAATCCcCCCTCACCAAGTCCACCAACCTGGGCAGCGGCACCTCCGTGGTGAA GGGCCCAGG(CTTCACGGGCGGCGACATCCTGCGCAGGACCTCCCCGGGCCAGATCAGCACCCTCCGC 109 GTCAACATcAccGCTcCcCCTGTccCAGAGGTAcCGcGTcAGGATTCGCTAcGC TAGCAccCAcCAAcCTGCAATTcCACAccTcCATcG;AcGGCAGGCcGATCAATcAGGGTAAcTTcTc 110 CGCCACCATGTcCAGCGGCAGCAACCTcCAATcCcGGCAGCTTCCGCACCGTGGG TTTCACCACCCCCTTCAACTTCTCCAACGGCTCCAGcGTTTTCACCCTGAGCGCCCACGTGTTCAAT ll1 TccGGCAATG;AGGTGTACATTGAcCGCATTGAGTTcGTGcCAGccGAGGTcAc CTTcGA.AGcccGAGTAcGAccTGGAGAGAGcccAG CAGAAGGcTGTcAATGAGcTcTTcAcGTccAGcA 112 ATCAGATCGGCCTGAAGACCGACGTCACTGACTACCACATCGACCAAGTCTCCAA CCTCGT(GGAGTGCCTCTCCGATGAGTTC'TGCCTCGACGAGAAGAAGGAGC'TGTCCGAGAAGGTGA 113 AG;CATGcCcAAGcGTcTCAGcG;AcGAGAGGAATc TcTccTccAGGAccccAATTTccG CGGCATCAACAGGCAGCTCGACCGCGGCTGGCGCGGCAGCACCGACATCACGATCCAGGGCGGCGA 114 CGATGTGTTCAAGGAGAACTACGTGACTCTcCTGGGCACTTTcGACGAGTGCTA cCCTAccTACTTGTAcCAGAAGATcGATGAGTcCAAGCTCAAGGCTTACACTcGCTAcCAGCTCcG 115 CGGCTACATCGAAGACAGCCAAGACCTC rCGAGATTTACCTGATCCGCTACAACGC CAAGCACGAGACCGTCAACGTGCCCGGTACTGGTTCCCTCTGGCCGCTGAGCGCCCCCAGCCCGATC 116 GGCAAGTGTGCcCACcACAGcCAcCACTTCTCCTTGGACATcGATGTGGGCTG CcTTTcTATcGGAccTTGTcAGATcCTGTcTTcGTccGAGGAGGcTTTGGcAATccTcACTATGTA 117 CTCGGTCTTAGGGGAGTGGCCTTTCAACAAACTGGTACGAATCACACCCGCACA CTTAGGGGAGTGGCCTTTCAACAAACTGGTACGAATCACAcccGCACATTCAGGAACTCCGGGACc ll8 ATTG;ACTcTcTAGATGAGATAcCACcTCAAGACAACAGcG(GcGCACcCTTG;GAAT TCTCTAGATGAGATACCACCTCAAGACAACAGCGGCGCACCTTGGAATGACTACTCCCATGTGCTG 119 AATCATGTTACCTTTGTGCGCTGGCCAGGTGAGATCTCAGGTTCCGACTCATGG TC'TCG;GGCGACAAGAATGAAC'TGATCATTGGT(GCTG,AGTCCTTCGTC'TCCAACGAGAAGATCTAC 120 ATcG.ACAAGATcG.AGTTcATccccGTccAGcTGTGATAGGAAcTcTGATTGAATT CTGGCCAGCTTCAGCACCCC CCTTTcGAGCTGAGCGGCAACAACCTCCAGATCGGCGTGACCGGCCTG 121 AGCGCCGGCGACAAGGTG;TACATCGACAAGATCGAGTTCATCCcCCGTGAACTAG AAcTTGGCAAG;TTTCAGCACACCATTTG;AACTcTcAGGCAACAATcTTcAGATcGGcG;TCAccGG;1T 122 cTcAGcGccGGAGAcAAAGTcTAcATcGAcA.AGATTGAGTTcATcccAGTGAAc 20
GB/T38570?2020 A.20?绯?E9?(Te9)? ?(5'?3') ATcGGTTTcGACAACGTTCGTCAAGTTCAATGCATCAGTTTCATTGCGCACACACCAGAATcCTA CTGAGTTTGAGTATTATGGCATTGGGAAAAC'TGTTTTTCT'TGTACCATTTGTTGT GCTTGTAATTTACTGTGTTTTTTATTCGGTTTTCGCTATCGAACTGTGAAATGGAAATGGATGGA GAAGAGTTAATGAATGATATGGTccTTTTGTTcATTcTcAAATTAATATTATTTG TTTTTTCTCTTATTTGTTGTGTGTTGAATTTGAAATTATAAGAGATATGCAAACATTTTGTTTT GAGTAAAAATGTGTCAAATCGTGGCCTCTAATGACcGAAGTTAATATGAGGAGTAA AACAcTTGTAGTTGTACcATTATGCTTATTCACTAGGCAACAAATATATTTTCAGAcCTAGAAA AGCTGCAAATGTTACTGAATACAAGTATGTcCTcCTTGTGTTTTAGACATTTATGAA CTTTCCTTTATGTAATTTTCCAGAATCCTTGTCAGATTCTAATCATTGC'TTTATAATTATAGTTA ANGTATGAAAATATTTTTTAATGcATTTTATGAcT TAcTcATGGATTTGTAGTTG A.21???CpT)? ?(5'?3'? ATGATGGTGCTAAAGGTGTGTGTGCTGGTACTTTTCCTTGTAGGGGTTACTACTGiCAGCCATGiGA TcTGAAcCAccTcGGAAGTAATcATcATGATGAcTcAAGcGATGAAcCTTcTGAG GAACCACCTCGGAAGTAATCATCATGATGACTCAAG;CGATGAACCTTCTGAGTCTTCAGAACCAT GCTGcGATTcATGcATcTGCACTAAATcAATAcCTcCcTcAATGcCATTGTACAGA GcGATTcATGcATcTGcAcTAAATcAATAccTccTCcAATGccATTGTAcAGATATcAGGTTGAAT TCGTGTCACTCGGCTTGCAAATCCTGCATGTGTACACGATCAATGCCAGGCAAGT A.22??(CIP2)? ?д5'?3'? TGATcAAccATGGcGcAAG;TTAGcAGAATcTGcAATGGTG;TGcAGAAcccATcTcTTATcTccAA TCTCTCGAAATCCAGTCAACGCAAATCTCCCTTATCGGTTTCTCTGAAGACGCAG ATCTcCAATcTcTcGAAATcCAGTcAAcGcCAAATcTccCTTATcGGTTTcTcTGAAGAcGCAGCcAG AAGAAGiAGTGGGATG CATCCACGAGCTTATCcCGATTTCGTcCGTCGTGGGGATTG A.235-?-3-??(CP4-EPSPS)? ?(5'?3'? ACAACATGGCACAAGGGATACAAAcCCTTAATcCCAATTCCAATTTCCATAAACCCCAAGTTcCT AAATcTTcAAGTTTcTTGTTTTrGGiATcTAAAAAAcTrGAAAAATTcAGcAAATT cTATGTTGGTTTTGAAAAAAGATTcCAATTTTTATGCAAAAGTTTTGTTccCTTTAGGATTTcAGc ATCAGTGGCTACAGCCTGCATG;CTTCACGGTGCAAGCAGCCGGCCCGCAACcGCCC
GB/T38570一2020 表A.23(续》 探针序列(从5'端到3'端》 编号 GCAAATcCTCTGGcCTTTCcGGAACcGTcCGCATTCcCGGcGACAAGTcGATCTcCCAcCGGTCCTT CATGTTCGGCGGTCTCGCGAGCGGTGAAACGCGCATCACCGGCC'TTCTGGAAG GCGAGGACGTCATCAATACGGGCAAGGCCATGCAGGCCATGGGCGCCAGGATCCGTAAGGAAGGC GACAccTGGATCATcGATG;GcGTcGGCAAT TGGCG;GCcTCcTGG;cGcCTGAGGcGC CGCTCGATTTCGGCAATGCCGCCACGGGCTGCCGCCTGACCATGGGCCTCGTCGGGGTCTACGATT TCGACAGCACCTTCATcGGCGACGCCTcGCTCACAAAGCGCCcGATGGGCCGCG TGTTGAACcCGcTGcGcGAAATGGG;cGTGCAG;GTGAAATcGGAAGAcGGTGACcGTcTTCccGTT ACCTTGcGCGGGCccGAAGACGcCGAcGCcGATCACCTAcCGCGTGCCGATGGcCT cCGCACAGGTGAAGTcCGCCGTGCTGCTcGCCcGGCCTCAACACGCCCGGCATCACGACGGTCATCGA GCC(GATATGAC AcGTGCGATCATACGGAAAAGATGCTGCAGGGCTTTGGCGCCA ACCTTACCGTCGAGACGGATGCGGACGGCGTGCGCACCATCCGCCTGGAAGGCCGCGGCAAGCTCA ccGGccAAGTCATcGACGTGccGG(GcGACcc(:TccTcGAcGGCcTTcccGCTGG xCTGATGAAccccAcccGcAc TTGCGGCCCTGCTTGTTCCGGGCTCCGACGTCACCATCCTCAACGTG6 CGGCCTCATcCCTGACGCTGCAGGAAATGGGCGCCGACATCGAAGTCATCAACC TGcGcc'TTGccGGcGGcGAAGAcGTGGCGGAcCTGcGcGTTcGCTcCcTcCAcGcTGAAGGGc(:TcA 10 GGTGCCGGAAGACCGCGCGCCTCCGATGATCGACGAATATCCGATTCTCGCTG TCGCCGCCGCC'TTCGCGGAAGGGGCGACCGTGATGAACGGTCTGGAAGAACTCCGCGTCAAGGAAA 11 GcGAccGccTcTcGGccG;TcGccAATGGccTcAAGcTcAATGGcGTGGATTGcG ATGAGGGCGAGACGTCGCTCGTCGTGCGTGGCCGCCCTGACGGCAAGGGGCTCGGCAACGCCTCGG GC(GCCGCCGTCGCCACCCATC'TCGATCACCGCATCGCCATGAGCTTCCTCGTCA TGGGccTcGTG;TcGGAAAAcccTGTcAcGGTGGAcGATGccAcGATGATcGccAcGAGcCTTcccGG 3 AGTTCATGGACCTGATGGCCGGG(CTGGGCGCGAAGATCGAACTCTCCGATACGA CCGGAACC(GTCCGCATTcCCGGCGACAAGTC(GATC'TC 14 CCACCGGTCCT'TCATGTTCGGCG;GTCTCGCGAGCGGTGAAACGCGCATCACCG GiCCTTCTGGiAAGGiCGiAGGiACG:TCATCAATACGGGCAAGGiCCATGCAGGCCATGGiGiCGCCAGGATCC 15 GTAAGGAAGGcGACAcCTGGATCATcGATGGCGTcGGCAATGGcGGCCTcCTGG rGAccATGGGccTcGTcGG CGCCTGAGGCGCCGCTCGATTTCGGCAATGCCGCCACGGGCTGCCGGCT 16 cGAGGGccGcG;TGTTGAAccCGcTGcGcGAAATGGGcGTGCAGG;TGAAATcG;GAAGACGG;TGAc 17 CGTC'TCCCGTTACCTTGCGCGGGCCGAAGACGCCGACGCCGATCACCTACCGCG TGCCGATGGcCTcCGCACAGG'TGAAGTCCGCCGTGCTGCTcGccGGCCTCAACACGCCCGGCATCAC 18 G;AcG(G:TcATcGAGcCcGATcATG;AcG(ccGATCATAcGG;AAAAGAcTGCAGG GCTTTGGCGCCAACCTTACCGTCGAGACGGATGCGGACGGCGTGCGCACCATCCGCCTGGAAGGCC GcGGCAAGCTCACcGGcCAAGTCATcGACGTGccGGGcGACccGTcCTcGACGG 22
GB/38570一2020 表A.23(续 编号 探针序列(从5'端到3'端) ccTTCcCGCTGGTTGCGGccCTGCTTGTTcCGGGCTcCGAcGTCAcCATcCTCAAcGTGCTGATGAA 20 CCCCACCCGCACCGGCCTCATCCTGACGCTGCAGGAAATGGGCGCCGACATCG AAGTCATCAACCCGCGCCTTGCCGGCGGCGAAGACGTGGCGGACCTGCGCGTTCGCTCCTCCACGCT 21 GAAGGGcG;TCACG;G;TGCcGGAAGACcGCG;CG GcG;CcTTCGATGATcGACGAATATc CGATTCTCGCTGTCG;CCG;CCGCCTTCGCGGAAGGGGCGACCGTGATGAACGGTCTGGAAGAACTCC 22 GCGTCAAGGAAAGCGACCGcCTCTCGGCCGTcGCCAATGGcCTCAAGCTCAATG GcGTGGATTGcGATGAGGGcGAGAcG;TcGcTcGTcGTGcGTGGccGccCTGAcGGcAAGGGGcTcG 23 GCAACGCCTcGGGCGccGcCGTcGCCACCcCATcTCGATCAccGCATCGCCATGA GcTTcCTcGTCATGGGcCTcGTGTcGGAAAAccCTGTcAcGGTGGACGATGcCAcGATGATcGCCA 24 GGANcTTcGAGTT% CATGGAC CCTGATGGCCGG cdccTcccGAAGATcG6 AAC 表A.24水稻肌动蛋白1基因的启动子(pAcin1)探针序列 编号 探针序列(从5'端到3'端》 TCGAGGTCATTCATATGCTTGAGAAGAGAGTCGGGATAGTCCAAAATAAAACAAAGGTAAGATT AcCTGGTcCAAAAGTGAAAACATCAGTTAAAAGG;TGGTATAAAGTAAAATATcGGTA GTAAAATATCGGTAATAAAAGGTGGCcCAAAGTGAAATTTACTCTTTTcTACTATTATAAAAAT TGAGGATGTTTTTGTCGGTACTTTGATACGTCATTTTTGTATGAATTG(GTTTTTAA GAATTGGTTTTAAGTTTATTcGcTTTTGGAAATGcATATcTGTATTTGAGTcGGGTTTTAAGTT TcTTTAAAAAAACcCATAT(GcCTAATTTGACATAATTTTTGAGAAAAATATATATTcAG(Gc(GAAT TCTCACAATGAACAATAATAAGATTAAAATAGCTT'TCCCCCGT'TGCAGCGCATGGG TTGCAGCGCATGGGTATTTTTTCTAGTAAAAATAAAAGATAAACTTAGACTCAAAACATTTACA AAAACAAccccTAAAG;TTccTAAAGcCCAAAG;TGcTATcCAcGATcCATAGCAAGc GATCCATAGCAAGCCCAGCCCAACCCAACCCAACCCAACCCACC CCCCAGTCCAGCCAACTGGACAAT LAGAAAAAAAAGAAAAAGAAAAAAcAG CGACCGCACGTCTCGCAGCCA CAGGTGGGTcCGGGTcGTGGGGGCccGGAAACGcGAGGAGGATcGCGiAGCCAGcGACG rCCAAAGAAACGCCcCCCATcGCCACTATATAC ATACCCCCCCCT(TCCTCCAT(CCCCC CACACACACCACCA CACCACCACCACCACCTCCACC'TCCTCCCCCCTCGC'TGCCGGiACGACGAGiCTCC'TCCCCCCTcCCCCTC CGCCGCCGCCGCGCCGGTAACCACCCcGCCCCTCTcCCTCTTTcTTTCTccG GGG;TGGGc rcTTTcTTTcTccGTTm ATcTTTGGccTTGGTAGT TTTTTTCCGTCTCGGT(TCG rT 10 GAGAGGcGGCTTcGTGcGcGCcCAGATcGGTGcGcGGGAGGGGCGGGATCTcGC 23
GB/T38570?2020 A.24( ?(5'?3'? GGGCGGGATcTcGcGGCTGGGGcCTCTcGcCGGCGTGGATccGGcccGGATcTcGcGGGGAATGGGG CTCTCGGATGTAGATCTGCGATCCGCCGTTGTTGGGGGAGATGATGGGGGGTTT ATGATGGGGGGTTTAAAATTTCCGCCATGCTAAACAAGATCAGGAAGAGGGGAAAAGGGCACTA 12 TGGTTTATATTTTTATATATTTCTGCTG;CTTcGTcAG;GcCTTAGATG;TGcCTAGATcT TTTTTGTGGGTAGAATTTGAATCCCTCAG(CATTGTTCATCGGTAGTTTT AGATCTTTCTT'TCTTCTT TCTTTTCATGATTTGTGACAAATGCAGCCTCGTGCGGAGC'TTTTTTGTAGGTAGA A.25??(pUbi)? ?(5'?3' GGGTACCAGCTTGCATGCCTGCAGTGCAGCGTGACCCGGTCGTGCCCCTCTCTAGAGATAATGAGC ATTGCATGTCTAAGTTATAAAAAATTAcCACATATT TTTGTCACACTTGTT ACACTT(GTTTGAAGTGcCAGTTTATc'TATcTTTATACATATATTTAAAcCTTTAcCTcTACGAATAAT ATAATCTATAGTACTACAATAATATCAGTGTTTT TAGAGAATCATATAAATGAACA AAATGAACAGTTAGACATGGTCTAAAGGACAATTGAGTATTTTGACAACAGGACTCTACAGTTT TATcTTTTTAGTGTGcATG;TG;T TGcAAATAGcTTcAccTATAT CACCTATATAATACTTCATCCATTTTATTAGTACATCCATTTAGGGTTTAGGGTTAATGGTTTTT TAAATTAAGAAAAcTAAAAcTcTATTTTAGTTTTTTTATTTAATAATTTAGATATAAAATAGA AAAAAcTAAGG;AAACATTTTTCTTGTTTcGAGTAGATAATGcCAGcCTGTTAAAcCGccGTcGACG AGTCTAACGGACACCAACCAGCGAACCAGCAGCGTCGCGTCGGGCCAAGCGAAGC AAGCGAAGCAGACGGCACGGCATCTCTGTCGCTGCCTCTGGACCCCTCTCGAGAGTTCCGCTCCACC GTTGG;ACTTGCTccGcTGTcGGCATcCAGAAATTGcGTGGcG(GAGcGGcAGA GCGGCAGACGTGAGCCGGCACGGCAGGCGGCCTCCTCCTCCTCTCACGGCACCGGCAGCTACGGGGG ATTCCTTTCCCACCGCTCCT GCCCGCCGTAATAAATA TAATAAATAGACACcCcCTcCAcCAcCcTC CcCcCAAcCcTcGTGTTGTTcGGAGCGCACACACAe ACAACCAGATCTcCcCCCAAATCCACCCGTCGGCACCTCCGiC'TTCAAGGTACGCC AGGTACGCCGCTCGTCCTCCCCCCCCCCCCCTCTCTACCTTCTCTAGATCGGCGTTCCGGTCCATGGT 10 (GTG;TTAG;ATccGTG;TTT(GT TAGGGCCCGGTAGTTCTA(TTTGTTATGT CGTGTTTGTGTTAGATCCGTGCTGCTAGCGTTCGTACACGGATGCGACCTGTACGTCAGACACGTT CTGATTGCTAACTTGcCAGTGTTTCTcTTTGGGGAATcCTGGGATGGCTCTAGC rcCGCAGAcGGGATcGATTTcATGATTTTTTTGTTrcGTrGcATAGGGrTTG GcTcNccGTT GTTTGccCTTTTcCTTTATTTCAATATATGccGTGCACTTGTTTGTcGGGTCATc 24
GB/38570?2020 A.25( ?(5'?3') cGGGTCATCTTTTCATGCTTTTTTTTGTCTTGGTTGTGATGATGTGGTCTGGTTGGGcGGTCGTTc 13 TAGATCGGAGTAGAATTCTGTTTCAAACTACCTGGTGGATTTATTAATTTTGGA AATTTTGGATCTGTATGTGTGTGCCATACATATTCATA(GTTACGAATTGAAGATGATGGATGGA AATATcGATcTAGGATAG;GTATACATGTTGATG;cG;GGTTTTACTGATGcCATATACA GCATATACAGAGATG(C'TTTTTGTTCGCTTGGTTGTGATGATGTGGTGTGGTTGGGCGGTCGTTCA 15 TTCGTTCTAGATcCGGAGTAGAATACTGTTTCAAACTACCTGGTGTATTTATTAAT TTTATTAATTTTG;GAAcTGTATGTGTGTGTCATACATcTTCATAGTTACGAGTTAAGATG;GAT 16 GGiAAATATCGATC'TAGGATAGG:TATACATG;TTiATG;TGGiG;TTTTAC'TGATGCATAT GATGCATATACATGATGGCATATGCAGCATCTATTCATATGC'TCTAACCTTGAGTACCTATCTAT 1" TATAATN ATGATG AAAAAGTATGTTTTATAATTATTTTGATTTGATATATTGG TGATGGCATATGCAGCAGCTATATGTGGATTTTT TTTTAG;CCCTGCCTTCATACGCTATTTATTTGC 18 TTGGTACTGTTTCTTTTGTcGATGCTCACCCTGTTGTTTGGTGTTACTTCTGCAG A.26????(Xa21)? ?(5'?3'? ATGATATCAC'TcCCATTATTGC'TCTTCGTcCTGTTGTTCTCTGCGCTGCTGC'TCTGCCCTTCAAGC AGTGACGAcGATG(G;TGATGcT(ccGGcGAcGAAcTcGcGcGcTcTcTTCAAG TTTcAAGTcATcccTGcTATAccAGG;GGG;GCcAGTcGcTGGcATcTTGGAAcAcG;TccGGccAcGG CCAGCACTGCACATGGGTGGGTGTTGTGTGCGGCCGCCGCCGCCGCCGGCACCC GGCAccCACAcAGG(:TGGTGAAGcTGCTGcTGcGcCTccTcCAAccTGTccGGGATcATCTcGcc(GT CGCTCGGCAACCTGTcCCTTCCTCAGGGAGCTGGACCTCGGCGACAACTACCTCT TACCTCTCCGGCGAGATACCACCGGAGCTCAGCCGTCTCAGCAGGCTTCAGCTGCTGGAGCTGAGC GATAAcTccATcCAAG;GGAGCATccccGCGGcCcATTG;GAGCATGCAcCAAGTTG CAAGT'TGACATCGCTAGACC'TCAG;CCACAACCAACTGCGAGGTATGATC(CCACGTGAGATTGGTG CCAGCTTGAAACATCTCTCGAATTTGTACCTTTACAAAAATGGTTTGTCAGGAGA CAGGAGAGATTccATcCGcTTGG;GCAATcTCACTAGCcTcCAGGAGTTTGATTTGAGCTTCAAc AGATTATCAGGAGCTATAcCTTCATCACTGGGGCAGCTCAGCAGTcTATTGACTA TTGACTATGAATTTGGGACAGAACAATC'TAAGTGGGATGATCCCCAATTCTATCTGGAACCTTTC G;TcTcTAAGAG;CG;TTTAG;rGTcCAGAG;AA 2AAGcTAGGTGG;TATG;ATcccTA \CA ccCTACAAATGCATTCAAAAcCCTTCACCTcCTcGAGGTGATAGATATGGGCACTAAcCGTTTcCA TGGCAAAATccCTGcCTCAGTTGCTAATGCTTCTCATTTGACAGTGATTCAGAT TTcAGATTTATGccAAcTTGTrcAGTGGAATTATcAccrcGG6GGTTTGGAAGGiTTAAGAAATcre ACAGAACTGTATCTCTGGAGAAATTTGTTTCAAACTAGAGAACAAGATGATTGGG 25
GB/T38570一2020 表A.26(续》 探针序列(从5'端到3'端》 编号 GATTGGGGGTTCATTTCTGACCTAACAAATTGCTCCAAATTACAAACATTGAACTTGGGAGAAA 10 ATAAcCTGGGGGGAGTTcTTcCTAATTcGTTTTcCAATcTTTccAcTTcGCTTAG;T GcTTAGTTTTcT ATTccGAAGGATATTGGcAATe TGCACTTGAATTGAATAAGATCACAGGAAGCA TTATTGGCTTACAACATCTCTATCTCTGCAACAACAATTTCAGAGGGTCTCTTCC CTcTTCcATcATcGTTGG;GCAGGCTTAAAAACTTAGGCATTcTAcTcG;ccTAcGAAAACAAcCTTG 2 AGCGGTTcGATcCCGTTGGCCATAGGAAATCTTACTGAACTTAATATCTTACTGC TTAcTGcTCGGCAcCAACAAATTcCAG;TGGTTG;GATAcCATACACAcTCTCAAAccTCACAAAcTT 13 GTTGTCATTAGGCCTTTCAACTAATAACCTTAGTGGTCCAATACCCAGTGAATTA TAATTATTcAATATTCAAACACTATcAATAAT(GATCAATGTATCAAAAAATAACTTGAG(GG 14 ATCAATACCACAAGAAATAGGGCATCTCAAAAATCTAGTAGAATTTCATGCAGAATC CAGAATcGAATAGATTATCAGGTAAAATCCCTAACACGCTTGGTGATTGCCAGCTCTTACGGTAT 15 CTTTATcTGcAAAATAATTTGTTATcTGGTAGcATcccATcAGcCTTGGGTcAGc GGTCAGCTGAAAGG'TCTCGAAACTCTTGATCTCTCAAGCAACAATTTGTCAGGCCAGATACCCAC 16 ATccTTAGCAGATATTAcCTATGCTT AccTTTcTTTCAAcAGcCTTT CAGCTTTGTGGGGGAAGTGCCAACCATTGGTGCTTTCGCAGCTGCATCCGGGATCTCAATCCAAG GCAATGCCAAACTcTGTGGTGGAATAG G;TTGTCCATTACTAGAGAACAGAAAACATTTCCCAGTTCTACCTATTTCTGTTTCTCTGGCCGCAG 18 CACTGGCCATCCTCTCATCACTCTACTTGCTTATAACCTGGCACAAGAGAACTA TcTcTTATTcGcA CTTCCATGAAAGGCCACCCATTGGT AGAAC'TAAAAAGG;GAGCCCCTTCAAGAACT 19 GTTGGTAAAAGCAACAGATGGTTTCGCGCCGACCAATTTGTTGGGTTCTGGATCA TGGATCATTTGGcCTCAGTATACAAAGGAAAGc AGCTTAATATCcCAAGATcCATGTTGCAGTG;AAGGTA 20 CTAAAGCTTGAAAATcCTAAGGCGCTCAAGAGTTTCACTGCCGAATGTGAAGCACT AAGCACTAcGAAATATGc(GACATcGAAATcTTGTcAAGATAGTTACAATTTGCTCGAGCATTGAT 21 AACAGAGGGAACGAT'T'TCAAAGCAATTGTGTATGACTTCATGCCCAACGGCAGTC 22 GATCGAAGA(GTGACC GCGACTGGACTATCTTAC TCTTCACCGCCATGGCCCTGAACCTGTTGTACAC TACACTGTGATATTAAATCAAGCAATGTGCTGTTAG 23 ATTcTGATAG;GTAGccCATGTTG;GAGATTTTGGGcTGCAAGAATAcTTG;TTGA TTGTTGATGGGiACCTCATTGATACAACAGTCAACAAGCTcGATGGGATTTATAGGGACAATTGGc 24 TATGCAGCAcCAGAGTATGGcGTTGGGCTCATTGCATcAAcGCATGGAGATATTT GATATTTACAGCTATGGAATTCTAGTGCTGGAAATAGTAACCGGGAAGCGGCCAACTGACAGTAC 25 ATTCAGACCCGATTTGGGC TGGA TGGCAGAGTGACGGATGTTGTTGACACGAAGCTCA ATTCTGAGAACTGGCTGAACAGTA 26 CAAATAATTCTCCATGTAGAAGAATCACTGAATGCATTGTTTGGCTGCTTAGACT TcTCcAGGAATTGccATcGAGTAGAAcGccAAccGGAGATATCcATcGAcGAAcTGAATGccATcAA ACAGAATCTCTCCGGATTGTTTCCAGTGTGTGAAGGTGG;GAGCCTTGAATTCTGA 26
GB/38570?2020 A.27???7(tg7)? ?(5'?3'? TTAATTccCATCTTGAAAGAAATATAGTTTAAATATTTATTGATAAAATAACAAGTCAGGTATT ATAGTCCAAGCAAAAACATAAATTTAT'TGATGCAAGTTTAAAT'TCAGAAATATTTC AAGTCAGGTATTATAGTCCAAGCAAAAACATAAATTTATTGATGCAAGTTTAAATTCAGAAATA TTTcAATAAcTGATTATATcCAGCTGGTAcATTGccGTAGATGAAAGAcTGAGTGcG A.28?(Amy)? ?(5'?3'? GGATcCCACCATGAGGGTGTTG;CTCGTTGCCCTCGCTCTCCTGGCTCTCGCTGCGAGCGCCACCAGCG CTAAGTACcCT(GGAGC'T(GGAGGAGG(GcGGc(GTGATcCATGCAGGCGTTcTAcTGG AGGCGTTCTACTGGGACGTCCCGAGC GAGCGGAGGCATCTGGTGGiGACACCATCCGCCAGAAGATCCCCG AGcCTTccAAGGGcATGTcCGGGGGcCTACTcGATGGGcTAcGAcccGTACGACTAcCTTcGAccTcGG CGAGTACTACCAGAAGGGCACGGTGGAGACGCGCTTCGGGTCCAAGCAGGAGCT ATcG;TGATcAAccAcAGGGccGGcGGcGAccTGGAGTGGAAcccGTTcGTcG;Gc ACCccGTTcGTCGGCGACTACACCTGGACGGACTTCTcCAAGGTCGCCTccGGCAAGTACACcGCCA AcCTAccTcGAcTTcCAcccCcAAcGAGcTcAcGcGGGcGAcTccGGCAcG;TTcG CTccGGCACGTTcGGcGG;CTAcccGGAcATcTGccAcGAcAAGTcCTGGGAcCAGTAcTG;GcTCTGG GCCTCGCAG(GiATcCCTACGCGGCC GGcATcGAcGcG;TGGcGcTTcGAcTAcGTcAAGGGCTAcGGGGccTGGGTGGTcAAGGACTGGCTc AACTGGTGGGGCGGCTGGGCGGTG;GGCGAGTACTGGGACACCAACGTCGACGCG CCAACGTCGACGCGCTGCTCAACTGGGCCTACTCCTCCGGCGCCAAGGTGTTCGACTTCCCCCTGTA CTACAAG;ATGG;AcGcGGccTTcGACAAcAAGAACATccCGGcGcTcG;TcGAGG GGCGCTCGTCGAGGCCCTGAAGAACGGCGGCACGGTGGTCTCCCGCGACCCGTTCAAGGCCGTGAC CTTcGTcGCCAACCAcGACACGGACATCATCTGGAACAAGTACCCGGCGTACGC TAcccGGcGTAcGCcTTcATccTcAcCTAcGAGGGccAGcccAcGATcTTcTAccGcGAcTAcGAGG 1c AGTGGcTGAAcA.AGGAcAAGcrcAAGAAccTGATcTGGATTcAcGAcAAccTc TTCACGACAACC'TCGCGGGCGGCTCCACTAGTATCGTGTACTACGACTCCGACGAGATGATCTTCG 1 TccGcAAcGGcTAcGGcTccAAGcccGGccTGATcAcGTAcATcAAccTGGGcT CATCAACC'TGGGiCTcCTcCCAAGiGTGGGCCGCTGGiGTGTACG;TCCCGAA:TTcGCCGGiCGCGTGCAT 12 CCAcGAGTACACcGGCAACcTCGGCGGCTGGGTGGACAAGTAcGTGTACTcCTC AAGTAcGTGTAcTccTcG6cTedGTCTAccTGGAGcccccccCTAcGAccccGccA.AcG6ccAGT 13 ACGGCTACTCCGTGTGGTCCTACTGCGGCGTcGGCTCcGAGAAGGACGAGCTG
植物转基因成分测定目标序列测序法GB/T38570-2020
背景
随着生物技术的快速发展，转基因技术作为其中的一项重要技术被广泛应用于植物育种、农业生产等领域。对于转基因植物的安全性评价，成分测定是非常关键的环节之一。目标序列测序法是一种可以高效、准确地检测转基因成分的方法，在GB/T38570-2020标准中被作为一种标准方法来使用。
原理
目标序列测序法是通过PCR扩增目标序列，然后将扩增产物进行测序，并与已知转基因序列进行比对，来检测样品中是否存在转基因成分。该方法适用于含有单一或多个转基因事件的样品。
操作步骤
1.提取样品DNA：将植物材料研磨并使用DNA提取试剂盒提取DNA。
2.设计引物：根据目标序列设计引物，进行PCR扩增。
3.PCR扩增：使用PCR扩增仪进行PCR扩增，得到目标序列扩增产物。
4.纯化PCR产物：使用PCR纯化试剂盒对PCR产物进行纯化处理，以消除PCR反应体系中的杂质。
5.测序：将PCR产物送至测序平台进行测序，并与已知转基因序列进行比对，判断样品中是否存在转基因成分。
总结
目标序列测序法是一种高效、准确的植物转基因成分测定方法。在GB/T38570-2020标准中，该方法被作为一种标准方法来使用。本文介绍了该方法的原理和操作步骤，希望能够对专业人士在进行植物转基因成分测定方面提供帮助。
